-
3.3.2.1
病理科目前开展项目能够满足临床工作需要
3.3.2.1.1
、建立病理检查服务项目目录
编号
项目名称
项目内涵
包括胸水、腹水、心包液、脑脊液、
各种囊肿穿刺液、唾液、龈沟液的
细胞学检查与诊断
指各种实质性脏器的细针穿刺标本
的涂片(压片)检查与诊断
计价单
位
价格
(元)
说明
需塑料包埋的
标
本
加
收
10
元
270200001
体液细胞学检
查与诊断
细针穿刺细胞
学检查与诊断
例
36
270200003
例
50
270200004
脱落细胞学检
查与诊断
包括子宫内膜、宫颈 、阴道、痰、
乳腺溢液、窥镜刷片及其它脱落细
胞学的各种涂片检查及诊断加口腔
黏液 涂片。
例
40
270200005
细胞学计数
包括支气管灌洗液、脑脊液等细胞
的计数,不含骨髓涂片计数
18
例
270300001
穿刺组织活检
检查与诊断
包括肾、乳腺、体表肿块等穿刺组
织活检与诊断
例
50
以两个蜡块为
基价,超过两
个者,每个加
收
20
元
以两个蜡块为
基价,超过两
个者,每个加
收
20
元
270300002
内镜组织活检
检查与诊断
局部切除组织
活检检查与诊
断
包括各种内镜采集的小组织标本的
病理学检查与诊断
包括切除组织、咬取组织、切除肿
块部分组织的活检
例
108
270300003
例
99
1
编号
项目名称
项目内涵
计价单位
价格
(元)
说明
27030000
4
骨髓组织活检检
查与诊断
指骨髓组织标本常规染色
检查
例
60
27030000
5
手术标本检查与
诊断
部位
99
以 两个蜡块
为基价,
超过
两个者,
每个
加收
10
元;
不脱钙直接
切片标本加
收
30
元
27030000
6
截肢标本病理检
查与诊断
包括上下肢截肢标本等
每肢、每指
(趾)
100
27040000
1
冰冻切片检查与
诊断
液基薄层细胞制
片
包括液基细胞学薄片技术
和液基细胞学超薄片技术
例
200
27080000
4
次
162
27080000
5
27080000
6
病理大体标本摄
影
每个标本
81
每个视野
10
疑难病理会诊
27080000
7
次
117
由
高
级
职
称
病
理
医
师
主
持
的
专
家
组
会诊
不
符
合
疑
难
病
理
会
诊
条件
的
其
它
会
诊
普通病理会诊
27080000
8
次
108
利川市物价局
2006
年元月
2
能开展常规病理切片、快速冰冻切片、细胞学诊断等项目
1
、病理组织常规石蜡切片诊断
临床病理学最基础的部分就是病理组织常规 石蜡切片诊断,
通过对活
体组织的形态学及组织学的观察,为临床诊断提供诊断及治疗依据。< br>目前我科的年检量达
3
千多例,已能基本满足临床的需要。
常规病理学检查及工作流程
普通活检组织常规病理学检查规范及工作流程
【病理活检标本的签收】
1
、
病理科应有专人验收普通 活体组织病理学检查
(
常规活检
)
申请单
和送检的标本。
(
1
)同时接受同一患者的申请单和标本。
(
2
)
认真核对每例申请单与送检标本及其标志
(
联号条或其他写明患
者姓名、< br>送检单位和送检日期等的标记
)
是否一致
;
对于送检的微小标
本
,
必须认真核对送检容器内或滤纸上是否确有组织及其数量。发现
疑问时
,
应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。
(
3
)认真检查标本的标志是否牢附于放置标本的容器上。
(4
)认真查阅申请单的各项目是否填写清楚
,
包括
:
①患者基本 情况
[
姓名、
性别、
年龄、
送检单位
(
医院、科室
)
、
床位、
门诊号
/
住院号、
送检日期、
取材部位、
标本数量等
];
②患者临床情况
[
病史
(
症状和体
征
)
、化验
/
影像学检查结果、手术
(
包括内镜检查
)
所见、既往病理学
检查情况
(
包括原病理号 和诊断
)
和临床诊断等
]
。
(
5
)在申请单上详细记录患者或患方有关人员的明确地址、邮编及
3
电话号码
,
以便必要时进行联络
,
并有助于随访患者。
2
、
验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改
动。
3
、
下列情况的申请单和标本不予接收。
(
1
)申请单与相关标本未同时送达病理科。
(
2
)申请单中填写的内容与送检标本不符合。
(
3
)标本上无有关患者姓名、科室等标志。
(
4
)申请单内填写的字迹潦草不清。
(
5
)申请单中漏填重要项目。
(
6
)
、标本严重自溶、腐败、干涸等。
(
7
)
、标本过小
,
不能或难以制做切片。
(8)
、其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。
病理科不能接收的申请单和标本一律当即退回
,
不予存放。
4、
临床医师采取的标本应尽快置放于盛有固定液
(4%
中性甲醛
,
即
10%
中性福尔马林
)
的容器内
,
固定液至少为标本体 积的
5
倍。
对于需要做
特殊项目检查
(
如微生物、电镜、免 疫组织化学、分子生物学等
)
的标
本
,
应按相关的技术要求进行固定 或预处理。
5
、
病理医师只对病理科实际验收标本的病理学诊断负责。
6
、病理科应建立与 送检方交接申请单和标本的手续制度。具体交接
方法由各医院病理科自行制定。
4
【
活体组织取材】
1.
标本收集后,首先进行编号登记;
2.
标本取材前,应先校对送检标本瓶上的标签号码、患者姓名以
及标本性质、瓶数与送检单所描述的是否相 符,然后才开始取材;
3.
检查标本,观察其大小形态、色泽、硬度及肉 眼病理改变并进
行描述。
检查病变部位应按诊断的实际要求取材,
组织块厚度不超过< br>0.3cm
,
大小在
22
×
22mm
范围内,
放入用铅笔写好号码的组织脱水盒
内,每合原则上放一块(小块组织例外)
,如放入两块以上 者,应在
组织脱水盒上号码后注明
A
、
B
、
C
?? 字样,以便区分;
4.
芝麻或帽针头大的组织,必须用擦镜纸包裹,色泽 灰白色者应
加染伊红,以免在制作过程中失落;
5.
标本必须全 埋者,在送检单上注明全埋字样。皮肤,囊壁或管
状组织必须全埋者亦在送检单上注明全埋字样;
6.
骨及钙化组织应行脱钙处理,取材时要用骨锯忌用凿子,组织
块厚 度通常不超过
0.5cm
,并向技术室当班者交待清楚;
7.
< br>取材完毕,肉眼标本应按顺序排列归档、保留两周,如需要继
续保存者,通知技术室保存;
8.
凡重切重埋或加特殊染色项目的标本,应书面通知技术室当班
者;
9.
取材完毕,工具在稀来苏溶液中消毒
30min
,取出用肥皂 水洗,
然后以自来冲洗、擦干,必要时抹上防锈油,以便下次使用。
5
【常见肿瘤和器官的取材常规】
肿
瘤
1
、
观
察
注意肿瘤的部位,形态、大小、颜色以及与周围组织关系,有无
完整或不完整 的包膜,测量肿瘤的体积,包括长度、阔度、高度(厘
米)
,实质性肿瘤量直径,浅表部的肿瘤 应注意其与皮肤的关系,是
否凸出皮面,与皮肤有无粘连,四周有无正常的皮肤组织。
2
、
扪
诊
注意肿瘤的质地(硬实、中等、软)各处的坚实度是否一致,有
无与周围组织粘连的情况。
3
、
切
面
方法:切面应暴 露肿瘤的最大面积,以便较全面观察肿瘤内部,
巨型肿瘤应多作平行切面;
观察:注 意肿瘤切面的形状,大小和颜色,在结构上是否均匀一
致,有无出血坏死,有无包膜,有无浸润;
包埋组织块的选择:根据肿瘤的大小决定包埋组织的块数,原则
上选择:
(
1
)
肿瘤中央;
(
2
)
肿瘤边缘与瘤外组织相连部份,包括瘤外组织;
(
3
)
肉眼所见的不同性状的各部份;
(
4
)
所有淋巴结作包埋。
6
食道癌
1.
肿
瘤中央;
2.
肿
瘤边缘;
3.
食
道旁淋巴结组织;
4.
手
术标本切缘。
胃
癌
1.
溃
疡型者取材包括溃疡中央及溃疡边缘并直达浆膜;
2.
大
小网膜淋巴结;
3.
正
常胃壁;
4.
手
术标本切缘。
结肠癌
1.
取
肿瘤中央;
2.
肿
瘤边缘;
3.
周
围淋巴结;
4.
标
本外科切缘。
宫颈原位癌
1.
宫颈按
12
点钟位置切
12
切;
2.
全宫切除者取宫壁组织
1
块(从宫内膜至浆膜
)
。
子宫体癌
1.
肿瘤中心直达宫壁浆膜,因组织块太大可在肌层分成
2
块;
2.
肿瘤边缘包括正常宫内膜相连接的部分;
3.
宫颈组织
1
块;
7
4.
有双侧附件者,均取组织进行检查;
5.
区域淋巴结(根治术清扫)若临床分瓶送检者均应取
材包埋,宫旁组织、阴道穹窿需取材检查。
乳腺癌
1.
肿物中心;
2.
肿物基底部;
3.
与皮肤相连的部分;
4.
乳头部;
5.
乳腺深部淋巴结;
6.
腋窝淋巴结(乳腺深部淋巴结一般不多,应全部取材,腋窝淋
巴结可有 选择地取材)
。
肝
癌
1.
肿
物中心;
2.
肿
物边缘;
3.
远
处肝组织
1
块,
(淋巴结一般由外科分别标明部位分瓶盛装送
检,应全部取材包埋)
。
甲状腺肿瘤
1.
肿
物中心;
2.
包
膜及包膜外的正常甲状腺组 织(甲状腺肿瘤必须注明有无包
膜及包膜是否完整,
若为一般腺瘤,
可在包膜两侧包括 肿物与肿物外
围正常甲状腺组织共取
1
块即可)
。
肿物有囊性变者可 再取囊壁
1
块,
若为癌者要在疑有包膜侵润部位多取组织块;
8
3.
有
淋巴结应全数取材包埋。
骨肿瘤
1.
肿
瘤实质部分带骨和 不带骨的组织尽量分别取材包埋(肿瘤实
质部分尽可能取
2
块以上组织)
;< br>
2.
肿
瘤边缘部分(包括骨质)
;
3.
肿
瘤外围组织。
脑肿瘤
原则上就包括肿瘤本身,肿瘤和肿瘤处相连组织。
肾肿瘤
1.
肿
瘤在肾盂部位者应取肿瘤中心及肿瘤与肾实质相连部位组织
包埋;
2.
有
输尿管相关者应注意输尿管内膜情况并切取组织一块,以切
取病变的狭窄或扩张为原则,并注意;
(
1
)
中心部分;
(
2
)
向肾包膜及与包膜外相邻组织部位;
(
3
)
与肾盂相连部位;
(
4
)
有出血坏死者应切一块包括无出血坏死及出血坏死部位;
(
5
)
肾外组织;
(
6
)
输尿管;
(
7
)
有淋巴结者应全数取材。
胃溃疡
1.
测
量胃的长度及宽度;
9
2.
沿
胃大弯剪开;
3.
标
示溃疡部位,测量溃疡的直径;
4.
若
未见溃疡则应注意幽门偏外科切口粘膜下层有无粘连,肌层
有无增厚及有无疤痕形成 ,原则上应切取这些有改变的部位;
5.
溃
疡有无穿孔,溃疡的取材应通过溃疡中心,并直达浆膜层。
子宫肌瘤
1.
肌
瘤中心;
2.
肌
瘤边缘(小者取
1
块即可,其中包括肿瘤中心及边 缘与正常
子宫肌相连部位)
;
3.
子
宫内膜和宫壁;
4.
宫
颈;
5.
如
为多发性子宫肌瘤应记录数目及最大肿物与最小肿物的直
径 ,取材应取
2
块肿物为原则;
6.
若
肿物切面 编织状条纹结构模糊或消失,质地变软或呈鱼肉样
外观者,则该肿物应多处取材。
输卵管
1.
输
卵管积水
(
1
)
测量输卵管长度及膨大积水部之直径;
(
2
)
作纵行切开,
注意检查囊肿是否与输卵管相通,
并作好记录;
(
3
)
囊壁部取
2
块,近端输卵管横断面取
1
块。
2.
输
卵管妊娠
(
1
)
测量输卵管长度及膨部直径;
10
(
2
)
检查有无破裂出血,管壁侧有无血块附着;
(
3
)
沿纵轴剪开;
(
4
)
包埋组织选择,应选取血块中包含有灰红色绒毛样组织,另
外在血块与管壁相连部有选择地切取
1
块,
胎盘绒毛常在血块中才能
找到,故应注意检查血块的情况,在怀疑有绒毛处多取几块。
卵巢囊肿
1.
临
床提示卵巢朱古力囊肿者,
应注意囊肿内是否含咖啡色液体,
囊肿外侧卵巢表面是否粗糙,
囊肿的大小均应作好记录。选取囊壁组
织
2
块,
1
块向卵巢表面,
1
块向 卵巢深部;
2.
囊
肿内含皮脂毛发及牙齿等,常规记录囊肿直径 及囊内内容物
性质。
包埋组织块的选择原则凡囊内实性部位应取
1~2
块,< br>牙齿和骨
一般不取,但应作好记录;
3.
囊
肿为 多房性,囊内含假粘液块状物或稀粘液样内容物者,常
规作好囊肿大小及囊外形状,
内容物的记 录。
其中包括囊壁厚薄度的
记录,尤其注意有无实性部分、实性部分的色泽、硬度、有无出血坏
死。取材原则:
(
1
)
实性部位有选择地取
(
2
)
最厚囊壁部位取
(
3
)
最薄囊壁部位取
2
块以上;
2
块;
1
块;
4.
囊
肿为单房性的,囊内含清黄色液 体并见囊壁有乳头形成者,
应注意囊肿表面是否也有乳头生长,
作好记录。
卵巢浆液性 乳头状囊
腺瘤有时仅有单个极细的小乳头,
应仔细检查,
并在乳头形成和无乳
11
头形成的囊肿壁取材共
2
块;乳头形成较广泛而且体积较大 较实者,
应切开观察切面有选择地切取
2
块以上,
同时注意有无砂粒体,必要
时先行脱钙处理。
卵巢实性肿瘤
同肿瘤取材。
阑
尾
1.
记录阑尾长度、直径及外表的状态,注意有无穿孔、恶臭;
2.
在病变较明显或穿孔部位取材,一般作横切面取
1
~
2
块;
3.
慢性阑尾炎在距阑尾末端
1.5
公分附近及有病变处取材。
【脱水】
脱水机的使用和维护
1.
检查升降 机械部分是否正常;
校正各试剂罐的位置,
使标本篮
升降时正好落入罐内;
检 查恒温电源插头是否对号插入插座;
有恒温
水箱者,检查箱内水位;
2.
按选定的脱水方案调整好时间控制装置,
用表盘控制者,
按方
案剪好缺口,并装于机上;
用旋钮控制时间者,按方案拔各调节旋钮
到指定位置;
3.
向试剂罐内注入各脱水剂等试剂。使用过程中试剂挥发较多,
应注意及时添加;
4.
合上电源开关,加热蜡罐和恒温水箱,使达预期温度;
5.
将标本篮挂升降伞的挂钩上,
放入第一个脱水剂中,
按机器设
计的启动顺序,使机器开始工作;
12
6.
有延时装置者,
于需重延时工作时,
按延时装置使用要求使用;
7.
当完成最后一道程序后,
应及时取出标本包埋,
并随时关闭机
器;
8.
使用注意事项及维护:
(
1
)
机器应放于清洁、通风、平稳处;
(
2
)
应经 常注意机器运转是否正常,时间控制及温度控制是否准
确,恒温水箱水位是否足够;
(
3
)
应经常做好清洁除尘工作,并向机械部分加润滑油此时应注
意切断电源,以保安全。
石蜡包埋
1.
包
埋时先将融蜡倾入模型,然后以钝头热 镊夹取组织块,使病
灶或指定面向下
(包埋分层次的组织在蜡中安放平正。
注意防止混 杂
组织碎屑;
2.
组
织埋入蜡块中以后,即将该组织的号码小条埋入蜡块一侧;
3.
蜡
稍凝后,即移入冷水中加速凝固;
4.
蜡
块 的大小,以在组织周围包有
1-2mm
之蜡为宜。蜡块做成正
方形或长方形,以便切片 。
石蜡切片法
1.
将切片刀装在持刀座上,
刀刃与蜡块表面呈
5
0
夹角。
调整后勿
任意变动;
2.
将蜡块固定于持蜡器上,并调整蜡块与刀至适当位置;
3.
移动刀座或持蜡器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座;
13
4.
以右手匀速旋转机轮,
到组织已全部切出,
或所需的部分已切
出。微小组织应注意勿修切过多。调节厚薄器到
4
~
6um
,继续切片,
除特殊要求者,一般勿切过厚;
5.
以小镊取完整无划痕、厚薄均匀的切片,将其放入温水中,使
展平无折,每一蜡块多切数个切面,选 择较好的切片裱于载玻片上。
需要多个不同水平切面时,应多选切片。水浴温度以低于蜡熔点
1 0~12
℃上下为宜;
6.
裱片时使切片玻片之间无气泡,切片的位置应端正,
裱成后随
即在玻片上写上号码;
7.
将切片放在烘片板或温箱中烘干;
8.
有特殊要求者应按要求切片。
【苏木紫
-
伊红染色法】
伊红液配制
伊红
1g
,蒸馏水5ml
。溶解后滴冰醋酸于期中,有沉淀生成,至
成浆糊状再加入水数毫升,
并继 续滴冰醋酸,
直至沉不再增加,
过滤,
弃滤液留沉淀物,待其干燥后,溶于
9 5%
乙醇
200ml
即成。
石蜡切片染色法
1.
二
甲苯去蜡(经二次)
5~10min
;
2.
无
水乙醇、
95%
乙醇、
80%
乙 醇、
70%
乙醇各
1~2min
,然后蒸馏
水洗
3min< br>(换数次)
;
3.
苏
木紫液染色约
5min
(视染液种类和着色情况增减)
;
4.
水
洗;
1%
酸性乙醇
(盐酸
1ml
、
70%
乙醇
99ml
)
,
或
1%
盐酸分化。
14
显策微镜下控制;
5.
流
水浸洗至少
15min
,至细胞核呈蓝色,也可短时水洗后,浸
于
40
℃温水使核变蓝。显微镜观察,若核染色过深或不足,应再分
化或重染;
6.
伊
红液染
1~2min
后,
95%
乙醇二次,无水乙醇二次,每次约
1~2min
;
7.
苯
酚二甲苯(
1:4
)
1
分钟;
8.
二
甲苯二次
,
每次
1
分钟;
9.
用
中性树胶或
DPX
以盖片封片,贴标签。
【镜观检查】
1.
镜观检查前应该对切片号码,标本种类;仔细阅读病史和眼
观检查记录。
2.
要将切片全部检查到,以免漏诊。若曾做过与此次有关的病
理检查,应与旧片做 对比。观察完毕后要提出切片质量的意见。
3.
诊断时密切结合临床,必要时与经 治医师联系。当镜下所见
与临床诊断有重大出入时,更要慎重,并须检查制片过程有无错误。
4.
活体组织的急诊检查时,应以最快速度做出确实诊断,诊断
有困难时,不勉强下 结论,应多做切片观察,并与临床医师联系,提
供检查情况,以便考虑进一步处理。
5.
病变描写要真实、客观、有条理,简明扼要地说明诊断依据。
诊断应经负责医师 复核签署,方可发出报告。
6.
疑难病例应展开讨论,必要时邀请有关单位会诊。
15
2
、针吸细胞病理检查
针吸细胞学即穿刺细胞学,
由于创面小,< br>取材方便、
灵活,
安全可靠,
定位也较准确,无需贵重设备,不需麻药,经济实 用等诸多优点,能
做到早期诊断早期治疗,
因此此技术方法在我科应用的较为普及。
主
要有胸水、腹水、心包液、尿液、痰等脱落细胞以及淋巴结、乳腺、
涎腺、甲状腺、皮肤、软组 织、等针吸细胞病理学的检查,为肿瘤的
早期发现、早期诊断、早期治疗提供了不可替代的作用。
针吸细胞病理学检查规范及流程
1.
器械准备
(
1
)
5ml
一次性塑料注射器。
(
2
)
~9
号针头。
(
3
)
消毒用的
2.5%
腆酒、
75%
乙醇、棉签或棉球。
2
穿剌部位选择
(
1
)
肿块暴露较好
,
操作较方便。
(
2
)
邻近无重要神经、血管及脏器
(
3
)
淋巴结或 肿块较大、较硬、无液化、坏死或继发感染
,
如怀疑
结核
,
应穿刺陈 旧肿大淋巴结
,
如怀疑转移癌肿
,
应穿刺新生肿物。
(
4
)
尽量穿刺原发病灶的淋巴结或肿块。
(
5
)
多部位淋巴结肿大
,
首选锁骨上、
颈部淋巴结
,
其次依次为腋下
淋巴结、腹股沟淋巴结。
(
6
)
穿刺点应避免体表血管、炎症及溃疡等部位。
3
穿刺步骤
(1)
穿刺方法
病人取适当位置
(
一般为坐位或卧位
),
充分暴露淋巴结或肿块。
常规碘酒、乙醇局部消毒。
以左手拇指及示指固定淋巴结、肿块及其邻近皮肤
,
右手持针以
与体表垂直或成
450
的角度
,
由皮肤进针
,
再进入淋巴结或肿块内。
操
作时
,
应沿淋巴结或肿块长轴 方向进针。进针深度以刺入淋巴结或肿
块假想半径的
1/3~2/3
为宜。
左
手
固
定
针
头
及
空
针
,
右
手
将
注
射
器
针
芯
向
后
牵
拉
至
造
成
0.5~1ml
的负压
,然后前后左右多方向多部位穿刺取材。待抽吸物充
满注射器乳头时
,
将针芯放置原 位
,
即可拔针。
然后将针头拔下
,
再将针管充压
4~5ml,
将针头按上
,
将抽取物涂
在玻璃片上。
16
干后根据不同要求染色
,
如做细胞学检查做全显染色
,(
瑞氏
-
姬
姆萨混合染色
);
如做抗酸菌检查
,
做抗酸菌染色
;
如做组织化学
,
按不
同要求进行组织化学 染色。
做特殊染色检查
,
如
CD
系列、
基因、< br>凋亡、
DNA
倍体分析等检查
,
需将标本放
0.5ml
生理盐水中待测。
(2)
注意事项
在穿刺过程中
,< br>如注射器已具负压
,
但无吸取物出现
,
可将负压加
大
(
针芯再向后拉
),
并以右手维持空针负压
,
左手固定淋巴结和肿块
,
将针沿纵轴方向轻轻反复在肿块内进退数次
,
至获得吸取物为止。
如穿刺物过于粘稠或固态物
,
在拔针之前可将注射针头在负压下
在皮下停留数 秒钟
,
取出血液少许
,
以使吸取物稀释
,
并使所需检查的< br>细胞能均匀、弥散地分布于标本中
,
便于涂片检查。
穿刺深部组织或 质地较脆的重要器官时
,
不宜反复抽取
,
以防止
出血及其他合并症发 生。
如一次穿刺不成功
,
或穿刺吸取物细胞成分过少
,
不 能确诊时
,
可
从原针眼进针
,
改变进针方向
,
再次 抽吸
,
或变换部位重检查。
淋巴结或肿块过大时
,
中心部 位往往易发生出血、坏死、液化
,
为此穿刺针应以刺人边缘硬质部位取材为佳。
如发生休克或晕针时
,
不必慌张
,
针刺人中或将患者放在床上低
头位数分钟即可恢复。
穿刺抽取液应以尽可能快的速度推注或滴入玻璃片上
,
用推片法
制成涂片
,
染色检查。如抽取物有组织碎片
,
可同时送病 理检查。
17
3
、液基薄层细胞学检查(
TCT
)
液基薄层细胞学检查 (
TCT
)
。此项技术是近几年才新兴发展起来的,
也属于细胞病理学范畴。
主要是对妇科宫颈脱落细胞以及非妇科标本
如细针抽吸标本、
呼吸道及胃肠道的粘液性 标本、
各种体液
(胸腹水)
等等进行肿瘤筛查,起到一个早期诊断的作用。目前,妇科 宫颈组织
标本的肿瘤筛查应用的较为普及,
在很大程度上免除了原始的宫颈活
检检查, 大大减少了病人的痛苦。
液基薄层仪操作规范
1
、
准备工作:
备份保存液,固定液,溶解液,润滑油。
2
、
操作步骤:
(
1
)
打开 电源开关,
仪器自动复位和自检
,
或再按
“复位”
键复位。
(
2
)
按顺序将保存液杯放入标本位,
将过滤器装在过滤器盖
(
预先
湿润
)
上卡入旋转位,将载玻片插在玻片架上,将玻片杯放入< br>玻片杯位。上述四项步骤差一项或未到位时,按“运行”键后
仪器会自动出现红色提示。
(
3
)在屏幕上选择标本项目,按“运行”键,该键变为黑色,仪器
便自动工 作。
如按
“运行”
键后仪器提示需要复位,
则需按
“复
位” 键,待仪器再次复位后再按“运行”键,仪器即会自动工
作。
(
4
)仪器运行完成后,制好的玻片被自动抛入玻片杯内,
“运行”
键变为白色。取出玻片放入玻片 架内,轻轻放入固定液内固定
18
10
分钟以上后取出染色。
又可重复操作步骤进行下一个标本处
理。
2
、
注意事项:
(
1
)
制片 前分类出那些标本可直接制片,
那些标本需作前期处理。
(
2
)该 机运行参数设置好后,有密码锁定,不要随意改动运行参
数。
(
3
)画面的“复位”按钮用于复位反回或应急处理,当操作过程
中发现过滤器抽液过少时,可按此键复位反 回,将标本前期处
理后再重新操作。
(
4
)工作完成后,若无标本处理,需关断电源开关。
(
5
)仪器及过滤器盖应定期清洁处理。
(
6
)定期清倒废液桶内废液。
4
、冰冻切片(术中活体组织快速制片)病理诊断
冰冻切片是应用于手术中 病理诊断的一种方法。历时较短,在
30
分
钟内将病理诊断报告给手术台上的临床医生 ,
对其手术方式及手术治
疗有重大帮助及指导意义,
尤其是对肿瘤良恶性的定性判断。
由于此
技术具有快速、准确、可靠的优点而得到广泛的应用,它是外科医生
在手术中很 快了解病变性质已决定下一步手术范围,
降低了再次手术
的比率,减轻医患双方的负担,减少不 必要的纠纷。为临床提供了很
大的方便。
19
冷冻切片技术及诊断工作规范
一、冷冻切片检查的任务
临床上一些疾病在术前无法通过活检确定病变质,
而只能通
过在术中切取病变组织进行冷冻快 速制片后确定病变性质后方
能确定治疗方案。
术中的冷冻切片检查,
本质上是一项特殊 的临
床病理急会诊工作,
要求病理医生在很短时间内向手术医师提供
参考性诊断意见,
由于冷冻切片诊断较之常规石蜡切片有相当的
局限性,因此需严格掌握冷冻切片诊断的使用范围 。
(一)冷冻切片在术中的作用
1.
确定病灶的性质。
首先要确定病灶是炎症还是肿瘤,
病灶
性质的确定和有无转移是手术方案制定的依据。
2.
确定切缘状况。此类冷冻切片诊断主要用于确定手术范
围,
有的肿瘤位于 要害器官,
其切除范围需根据切缘状况来确定,
例如声带鳞癌的切缘状况对手术采用局部切除还 是全喉切除具
有决定性的指导作作。
因组织切缘范围较广,
冷冻切片难以广泛
取材,
故此类冷冻标本应由手术者确立可疑切缘部位,
请病理科
重点检查。
3.
判断组织来源。如隐睾等。
(二)下列情况之一者,一般不宜进行冷冻切片病理会诊。
1.
常规活检或 穿刺活检容易获得病理标本并能明确定病变
性质的病灶,如内窥镜(肠镜、胃镜、支气管镜等)咬取的组 织
标本、多发性皮肤病变标本。
2.
涉及截肢或某些严重影响功能的广泛切除的根治性标本
20
等,其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。
3.
病灶或组织过小(一般 小于
0.2cm
)和含水量较多的脑组
织标本。此类标本因取材破碎、量少,常影响冷 冻制片质量。
4.
骨、脂肪和钙化组织标本。
5.
主要 依赖于发现有无侵袭、
转移或血管浸润等恶性生物学
行为证据来判断良恶性者。
此类标 本因限于切片质量、
数量和时
间紧迫,常难以作出可靠的定性诊断。
6.
淋巴结标本要求确定是否为恶性淋巴瘤时。
7.
已知传染性疾 病标本。
此类标本一般不宜作出冷冻切片检
查,应待组织固定后再行常规则制片处理。
二、冷冻切片检查的工作程序
申请:填写术冷冻切片病理会诊申请单(申请单主页)
。冷
冻切片病理检查应由手术医师提前一天向病理科提出书面申请,
并详细说明患者的 病情及要求解决的问题。
病理医师亦应尽量了
解患者各项实验室检验、
影像学检查、< br>即往病理检查结果以及手
术所见等资料。
必要时应于术前亲自复习检查患者。
若 术中临时
要求作冷冻切片诊断时,病理医师应通过电话联系,向手术
医
师了解病情、术中所见、要求作冷冻切片的理由及目的,发便正
确诊断。
说明:术前病理医师或临床应向病人或其家属说明
冷冻切
片诊断的意义及局 限性,
也可采用
“术中快速冷冻切片病理会诊
患者知情同意书”
的书面形式向 病人或家属说明,
并取得病人家
属的理解和签字,发尽量避免减少必要的纠纷。
三、术中冷冻标本的签收
21
要求术中冷冻切片检 查的标本不能添加任何保存液,
直接将
标本连同填写的申请单附页送到病理科,
交值班 病理医师,
由值
班病理医师当面查对申请单与送检标本一致后方能接收。
四、巨检要求
冷冻切片标本送到后,值班病理医师必须立即亲自参与巨
检, 所有巨检及记录要求常规巨检相同。冷冻切片通常选取
1-2
块组织,
如肉眼观察病灶 定位不明时,
可酌情多取数块组织以减
少漏诊;
对组织的包埋面或某些需要特别关注的 部位
(例如包膜
的完整性)
,应当面向技术员讲清。冷冻切片巨检完毕后,巨检
者及记录者应签名。
五、标本处理
诊断一经确定,
标本应立即 固定。
冷冻取材后剩余标本称
“冰
剩”
。申请单上必须注明编号,放置“冰剩 ”标本的容器应标明
患者姓名及编号,以便查对。
技术员接收标本后应于
1 5
分钟内制成切片交病理医师阅
片。
切片应立即贴上有编号的标签。
已冷冻的 组织应保留于切片
机的“冷冻头”上,待诊断确立后再取下。
冷冻切片后 留下的组织称“冰对组织”
。诊断明确后,应立
即置“冰对组织”于组织盒中,与“冰剩”组织 放在同一个固定
容器内,作常规制片,发备作对照之用。
22
六、诊断结果的处理
医师阅片结束后,
检查结果以
“术 中冷冻切片病理会诊意见
书”
的书面报告形式为准,
书面报告送达科室前就电话通知手 术
室,电话内容应包括患者姓名、性别、年龄及病理诊断意见。接
电话者必须是护士或医生,< br>接电话时应复述诊断,
心要时应做书
面记录。如需对诊断进行解释,必须请手术医师请自 接电话,发
免误传、误解;如需了解更多的术中情况,可电话向手术医师询
问,
必要时 应亲自赴手术室观察病灶的状况,
并与手术医师商榷
进一步的措施。如诊断确有困难(病变不典 型、交界性)
,不应
勉强诊断,可说明情况,暂停手术,等待常规切片结果。与诊断
有 关的电话内容应及时记录于申请单签名,
同时还应记录诊断报
告的时间。
冷冻切片诊断 报告,
一般应有
2
位或
2
位发上具有冷
冻诊断报告资格的高 年资医师共同签发。
“术中冷冻切片病理会诊意见书”的书面诊断报告一般应在
24
小
时内送出。
同一患者术后病理送检的标本诊断报告中,应包含术中冷冻病 理会
诊的内容,
若冷冻理会诊意见与常规病理诊断不符,
应及早与医生联
系, 并以常规病理诊断报告为最后诊断。
七
.
冷冻切片档案管理
冷冻切片所有资料应及时归档,保存时间与常规切片相同
23
3.3.2.1.2
、工作场所及专业技术设备
3.3.2.1.2
病理仪器、设备使用保养符合规定
一、设备仪器使用的操作流程及规范
设备操作总则
1.
操作人员必须先经专业培训
,
培训合格后方能上机操作。
2.
操作人员必须严格按照设备使用说明书规定的方法和步骤操作。
3.< br>开机后
,
操作人员应坚守工作岗位
,
并密切注意设备的工作状态
,
若
有异常
,
应立即关机
,
并将其作详细记录
,
然后通知设备维修人员维
修。
4.
每日做好仪器的使用记录和人员交接记录。
5.
按要求做好日常保养工作。
自动组织处理机的使用和维护
【
机器使用
】
应熟悉机器说明书中的使用说明及注意事项:
9.
检查升降机械 部分是否正常;
校正各试剂罐的位置,
使标本篮
升降时正好落入罐内;
检查恒 温电源插头是否对号插入插座;
有恒温
水箱者,检查箱内水位;
10.
按
选定的脱水方案调整好时间控制装置,
用表盘控制者,< br>按方
案剪好缺口,并装于机上;
用旋钮控制时间者,按方案拔各调节旋钮
到指定 位置;
11.
向
试剂罐内注入各脱水剂等试剂。使用过程中试剂 挥发较多,
应注意及时添加;
24
12.
合
上电源开关,加热蜡罐和恒温水箱,使达预期温度;
13.
< br>将
标本篮挂升降伞的挂钩上,
放入第一个脱水剂中,
按机器设
计的启动 顺序,使机器开始工作;
14.
有
延时装置者,
于需重延时工作时,
按延时装置使用要求使用;
15.
当
完成最后一道程序后,
应及时取出标本包埋,
并 随时关闭机
器;
16.
使
用注意事项及维护:
(
4
)
机器应放于清洁、通风、平稳处;
(
5
)
应经常注意机器运转是否正常,时间控制及温度控制是否准
确,恒温水箱水位是否足够;
(
6
)
应经常做好清洁除尘工作,并向机械部分加润滑油此时应注
意切断电源,以保安全。
【
组织处理机脱水程序和时间
】
1.
10%
福尔马林
1
小时
20
分钟;
2.
85%
乙醇
2
分钟;
3.
95%
乙醇Ⅰ
1
分钟
30
分钟;
4.
95%
乙醇Ⅱ
1
分钟
30
分钟
5.
无水乙醇Ⅰ
1
分钟;
6.
无水乙醇Ⅱ
1
分钟;
7.
无水乙醇Ⅲ
1
分钟;
8.
二甲苯Ⅰ
30
分钟;
9.
二甲苯Ⅱ
45
分钟;
25
10
石蜡
30
分钟;
11.
石蜡
30
分钟。
12.
石蜡
30
分钟
包埋机及冷冻台的使用
5.
检查包埋机内装蜡情况
;
6.
接通电源
,
打开包埋机及冷冻台的开关
;
7.
待蜡缸里的蜡为液态时
,
开始包埋
;
8.
包埋时先将融蜡倾入模型,然后以钝头热镊夹取组织块,使病灶
或指定 面向下(包埋分层次的组织在蜡中安放平正。注意防止混
杂组织碎屑;
9.
蜡稍凝后,即移入冷冻台中加速凝固;
10.
焊上组织块的相应病理标签
;
11.
蜡块的大小,以在组织周围 包有
1~2mm
之蜡为宜。蜡块做成正方
形或长
0
方形,以便切片< br>;
12.
包埋好的蜡块冷冻于冰箱内,待切。
切片机及漂烘仪的使用
1.
漂烘仪里加入适量的清水。
2.
接通电源,打开开关。
3.
设定漂片、烘片、烤片的温度。
4.
待温度到达设定温度后,准备切片。
5.
调节切片机的切片厚 度(
4
μ
m
~6
μ
m)
,装上刀片,调好倾斜的角
度(
5
0
)
,备好专用刷子及镊子。
26
6.
将蜡块固定于持蜡器上,并调整蜡块与刀至适当位置。
7.
以右手匀速旋转机轮,到组织已全部切出,或所需的部分已切出。
微小组织应注意 勿修切过多。调节厚薄器到
4
~
6um
,继续切片,除特
殊要求者, 一般勿切过厚。
8.
以小镊取完整无划痕、厚薄均匀的切片,将其放入温水中,使展 平
无折,每一蜡块多切数个切面,选择较好的切片裱于载玻片上。需要
多个不同水平切面时,应 多选切片。水浴温度以低于蜡熔点
10~12
℃
上下为宜;
9.< br>裱片时使切片玻片之间无气泡,
切片的位置应端正,
裱成后随即在
玻片上写上号 码;
10.
将切片放在烘片板或温箱中烘干;
11.
有特殊要求者应按要求切片。
冰冻切片机的使用
一、开机
1
、打开电源开关。
2
、用“箱体温度设置按钮”将箱体温度设置到切片所需温度。
3
、用“样品头温度设置按钮”设置样品头温度。
二、切片
1
、安装好刀片,用夹紧样刀旋钮固定刀片。待刀片与箱体温度一致
后方能切片。
2
、用“切片厚度调节旋钮”调节切片所需的切片厚度。
3
、将样品放到样品托上,涂敷包埋剂,放到冷台上冷冻。
27
4
、讲冷却透的样品放到样品头上,夹紧样品托的旋钮。
5
、推进刀架使刀接近样品,用样品快进按钮将样品移进刀口。
6
、调节防卷板的位置,使切出的样品平整的进入防卷板与刀片的狭
缝。
7
、摇动切片手轮切片。
三、注意事项
1
、可利用控制面板上的“键盘锁按钮”讲键盘锁定。
2
、当停机时,应将玻璃窗打开,待机器完全干燥后再开机。
3
、严禁随意关闭箱体压缩机,否则会严重影响你的动作。
液基薄层细胞制片仪的使用及注意事项
操作流程
一
标本
(一)接收
1
、
核对标本瓶及申请单上的申请号,登记。
2
、
粘贴实验室编号于标本瓶和申请单的相应位置。
3
、挑选出需要处理的标本:血和粘液过多者;进入下一步处
理。
4
、登记重处理标本,检查后确定是否必要。提前处理,保证
当天传递。
(二)处理(通风)
1
、依次排列,编号
28
-
-
-
-
-
-
-
-
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