磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯

2021年2月28日发(作者：狼疮抗凝物)
磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯
(Triglyceride,TG)
一、实验目的

测定血清中的甘油三酯含量，为临床诊断疾病提供依
据。

二、实验原理

血清中甘油三酯经脂蛋白脂酶（
LPL
）作用，可水 解为
甘油和游离脂肪酸
(FFA)
，甘油在
ATP
和甘油激酶
(GK)
的作
用下生成
3-
磷酸甘油，
再经磷酸甘油氧化酶作用生 成磷酸二
羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与
4-
氨基安替比林（
4-APP）
和
4-
氯酚在过氧化物酶（
POD
）作用下，生成红色醌类化 合
物，其显色程度与
TG
的浓度成正比。

三、试剂

1.
甘油三酯液体稳定酶试剂

GOODs
缓冲液（
PH=7.2
）
50 mmol/L
脂蛋白脂酶

≥
4000 U/L
甘油激酶

≥
40 U/L
磷酸甘油氧化酶

≥
500 U/L
过氧化物酶

≥
2000 U/L
ATP 2.0 mmol/L
硫酸镁
15 mmol/L
4-AAP 0.4 mmol/L
4-
氯酚
4.0 mmol/L
2.
三油酸甘油酯标准液
2.26 mmol/L
（
200mg/dl
）

准确称取三油酸甘油酯（平 均分子量：
885.4
）
200mg
加
Triton X-100 5ml
，用蒸馏水定容至
100ml
，分装后，
4
℃
保存。

四、实验步骤

1.
取三支试管按下表操作




加入物

空白管（
B
）

标准管
(S)
测定管
(U)

血清（
μ
l
）

—


—

10

标准液（
μ
l
）

—
10
—


蒸
馏
水
（
μ
l
）






10








—

—


酶试剂（
μ
l
）
1000 1000
1000

































































混匀置
37
度水浴保温
5
分钟，以空白管调零，在波长
50 0nm
处测各管的吸光度。


五、计算


血清
TG(
mmol/L)=A
测定管
/A
标准管
×标准液浓度


六、参考范围


正常成人血清
TG
为
0.55~1.70 mmol/L
；


临界阈值：
2.30 mmol/L
；


危险阈值：
4.50 mmol/L
。


七、临床意义


1.
血清
TG
增高常见于家族性 脂类代谢紊乱、
肾病综合征、
糖尿病、甲状腺功能减退、急性胰腺炎、糖原积累病、胆道
梗阻、原发性甘油三酯增高症、动脉粥样硬化等。