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实验十九
血清钾测定
(
火焰光度法
)
【目的】
1.
熟悉火焰光度法测定钾的原理和方法。
2
.
掌握血清钾测定的参考范围及临床意义。
【
原理
】
火焰光度分析法是一种发射光光谱分析,
被测溶 液经压缩喷雾变成雾状物后,
与可燃气
混合燃烧成火焰。
由火焰激发后各元素可发射出 特有的光谱,
样品中钾、
钠原子受到火焰热
能的激发而处于激发态,
激发态的 原子不稳定,
迅速回到基态放出能量,
发射出元素特有波
长的辐射谱线。钠的特征谱线 为
589nm(
黄色
)
,钾的特征谱线为
767nm(
深红 色
)
,用相应波
长的滤光片将谱线分离,
然后通过光电管或光电池转换成电信 号,
经放大器放大后进行测量。
样品中钾、
钠的浓度越大,所发射的光谱就越强。用已知浓度的标准液与待测标本比较,即
可计算出标本中钾、钠的浓度。
火焰光 度法测定钾有两种方法。①内标法:用含一定浓度的锂盐稀释液稀释样品,经火
焰激发溶液中的钠、钾、 锂,各自产生特异光谱,分别通过相应滤光片,照射在光电管上产
生各自的光电流,并与锂(浓度恒定) 产生的光电流比较,即可得出钠、钾的含量。②外标
法:用去离子水稀释样品,并雾化,经火焰激发钠、 钾产生特异光谱,钠
589nm
,钾
767nm
。
浓度与光谱强度在 一定范围内成正比。
内标法要求燃料纯度高,但精确度较好。外标法干扰因素多。
【
器材
】
火焰光度计、可燃气、试管、试管架、吸管。
【试剂】
钾钠标准液:
K
+
4mmol/L
;
Na
+
140mmol/L
。
【操作】
1.
开机测定程序
①
按下地面插座上红色开关,马达自行开动。
②
向上扳动仪器面板上的电源开关,见指示灯亮。
③
持续按住红色 点火按扭同时逆时针缓慢转动燃气开关,观察窗内电热丝变亮,出现
由小火,逐渐变成大火。
④
放开点火按扭,进样开关逆时针转至开的位置,观察窗内见兰色火焰。
⑤
调节燃气开关,使观察窗内火焰呈绿色轮廓清晰的梅花圈状。
⑥
用去离子水将仪表表头指针调至零点。
⑦
标准
K
、
Na
溶液以
100
倍稀释后,将钠离子仪表表头指 针调至
70
%,将钾离子仪表
表头指针调至
40
%。
⑧再用去离子水将仪表表头指针调至零点。
⑨样品血清用去离子水
100< br>倍稀释,
进样后读数并记录。
根据公式换算,
可得到血清钾
浓度。
2.
关机程序
①
关闭仪器面板上的电源开关。
②
关闭马达开关。
③
等待观察窗内火焰熄灭后,将燃气开关顺时针关闭到底。
④
将进样开关顺时针转动到底。
⑤
使用完毕,做好仪器周围的清洁整理工作,并做好仪器使用登记。
【计算】
根据以下公式换算,可得到血清钾浓度:
血清钾浓度
=
血清读数/标准液读数×标准液钾浓度
读数与钾浓度的关系如下:
40
%
=
4mmol/L
30
%
=
3mmol/L
20
%
=
2mmol/L
若样品读数大于
50
%,则将血清对
信
稀释,进样 后读数与钾浓度的关系如下:
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