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人工荨麻疹图片实验五 DNA的Feulgen染色法

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-02-02 18:13

芦笋片-吗啉胍

2021年2月2日发(作者:前列腺疾病治疗)
实验五

DNA

Feulgen
染色法

(一)实验目的

学习
DNA

Feulgen
染 色法,观察染色结果,了解反应原理。

(二)实验原理

DNA
经弱酸(
1mol/L HCl
)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间
的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与
Schiff
试剂( 无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合醌基,
醌基是一个发色基团,所以具有颜色。对照组预先 用热三氯醋酸或
DNA
酶处理,抽提去细胞中的
DNA
而得到阴性反应,从而 证明了
Feulegn
反应的专一性。

(三)实验用品

一、

材料

1.

Carnoy
液固定的蚕豆根尖切片。

二、试剂

1
. Carnoy
固定液:

3

95%
酒精加入一份冰醋酸。

2.1mol/L H Cl
:取比重
1.18
的浓
HCl82.5ml
,加水
10 0ml


2.

Schiff
试剂

3.

亚硫酸水溶液(漂白液)

10%
偏重偏亚硫酸钠水溶液
5ml
,蒸馏水
100 ml

1mol/L HCl 5ml

摇匀,塞紧瓶塞。此溶液在使用前配 制,否则会因
SO
2
逸出而失效。

5.

5%
三氯醋酸

6.

0.5%
固绿酒精溶液
(95%
酒精溶液
)
(四)实验方法

70%
酒精














































2

3min






















对照组

蒸馏水













































5%
三氯醋酸,
90
o
C

15min





















































































































70%
酒精

2

3min





















































































1mol/L HCl









































蒸馏水(过一下)






1mol/L HCl































60
o
C,

8

15min(
水浴或温箱中
)





Schiff
试剂(或者卡宝品红)




















60

90min







亚硫酸水
(
ⅠⅡⅢ
)
































(

1min)






流水冲洗









































5

15min




蒸馏水

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