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刘先进实验九、DNA的限制性内切酶酶切

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-02-02 18:13

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2021年2月2日发(作者:大姨妈来了)
实验九、
DNA
的限制性内切酶酶切

一、实验目的

1
、了解核酸限制性内切酶的特点及其对
DNA
的酶切过程。

2


学会设计构建体外重组
DNA
分子的方法,
并根据目的基因合理选
择载体与限制性内切酶以及
DNA
的酶切技术。

二、实验原理

EcoR I
限制性内切酶的识别与切割顺序为:

5
’……
G

AATTC
……
3


3
’……
CTTAA

G
……
5


Xho I
限制性内切酶的识别与切割顺序为:

5
’……
C

TCGAG
……
3


3
’……
TAGCT

C
……
5


三、实验材料

1
、仪器:水浴锅、制冰机、离心机、电泳设备、各式移液枪 、核酸
紫外检测仪等。

2

1.5ml
离心管、移液枪枪头等。

3

DNA
样品:上一个实验获得的质粒
DNA
4
、限制性内切酶
Xho I

EcoR I

Takara


四、实验步骤

酶切体系:

质粒
DNA 5ul
EcoR

1ul
Xhol

1ul
2
×
Buffer H 2ul
Sw 11ul

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