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实验九、
DNA
的限制性内切酶酶切
一、实验目的
1
、了解核酸限制性内切酶的特点及其对
DNA
的酶切过程。
2
、
学会设计构建体外重组
DNA
分子的方法,
并根据目的基因合理选
择载体与限制性内切酶以及
DNA
的酶切技术。
二、实验原理
EcoR I
限制性内切酶的识别与切割顺序为:
5
’……
G
↓
AATTC
……
3
’
3
’……
CTTAA
↑
G
……
5
’
Xho I
限制性内切酶的识别与切割顺序为:
5
’……
C
↓
TCGAG
……
3
’
3
’……
TAGCT
↑
C
……
5
’
三、实验材料
1
、仪器:水浴锅、制冰机、离心机、电泳设备、各式移液枪 、核酸
紫外检测仪等。
2
、
1.5ml
离心管、移液枪枪头等。
3
、
DNA
样品:上一个实验获得的质粒
DNA
4
、限制性内切酶
Xho I
和
EcoR I
(
Takara
)
四、实验步骤
酶切体系:
质粒
DNA 5ul
EcoR
Ⅰ
1ul
Xhol
Ⅰ
1ul
2
×
Buffer H 2ul
Sw 11ul
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本文更新与2021-02-02 18:13,由作者提供,不代表本网站立场,转载请注明出处:http://www.xapfxb.com/yuer/442536.html