湖北省中医院怎么样DNA染色实验

2021年2月2日发(作者：心脑血管内科)
DNA
染色实验

1
、原理与解析


( 1)
真核细胞的
DNA
主要分布在细胞核内，
RNA
主要分布在细胞 质中。


(2)
甲基绿和吡罗红两种染色剂对
DNA
和< br>RNA
的亲和力不同，甲基绿对
DNA
亲和力强，使
DNA
显 现出绿色，而吡罗红对
RNA
的亲和力强，使
RNA
呈现出红色。用甲基绿、 吡罗红的混合染色
剂将细胞染色，可同时显示
DNA
和
RNA
在细胞 中的分布。
(
同时甲基绿用二苯胺或龙胆紫代替做
平行
)
(3)
盐酸的作用


①

盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；


②
盐酸使染色体中的
DNA
与蛋白质分离，便于
DNA
与染色剂的结合。< br>

注意事项
?

1.
材料的选择


①

选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察；


②

常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、
洋葱鳞片叶表皮细胞
(< br>为避免原有颜色的干扰，
不可使用
紫色表皮细胞
)

2.
取材要点


①

取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；


②

取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。


3.
冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。
?

4.
安全要点
?

①

用酒精灯烘烤载玻片时， 不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均
匀受热，以免破裂；


②

烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却
1
分钟。


5.
换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。


主要步骤
(
以观察口腔上皮细胞为例
)

1.
取材
?

①

滴：

在洁 净的载玻片上滴一滴质量分数为
0.9%
的
NaCl
溶液；
?

②

刮：

用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；
?

③

涂：

将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；
?

④

烘：

将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
?

2.
水解


①

解：

将烘干 的载玻片放入装有
30ml
质量分数为
8%
的盐酸的小烧杯中，进行材料的水 解；


②

保：

将小烧杯放入装有
30
℃温水的大烧杯中保温
5
分钟。
?

3.
冲洗涂片


①

冲：

用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片
10
秒钟；


②

吸：

用吸水纸吸去载玻片上的水分。


4.
染色
?

①

染：用
2
滴 吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色
5
分钟；


②

吸：

吸去多余染色剂；


③

盖：

盖上盖玻片。


5.
观察
?

①

低：

在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；


②

高：

转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。