男性前列腺炎的症状中山大学_考研《生物化学》答疑库,有参考答案

2021年2月2日发(作者：骨盆外测量)
生物化学答疑库


15.
血红蛋白亚基和亚基的空间结构均与肌红 蛋白相似，但
肌红蛋白
中的不少亲水残基在
血红蛋白
中被疏
水残基取 代了，这种现象能说明什么问题。

[
答
]
肌红蛋白以
单 体的形式
存在，血红蛋白以
四聚体的形式
存在，血红蛋白分子中有更多的亲水残基，< br>说明疏水作用对于亚基之间的结合有重要意义。


16.
简述蛋白质溶液的稳定因素，和实验室沉淀蛋白质的常用方法。

[
答
]
维持蛋白质溶液稳定的因素有两个：
（
1
）
水化膜
：蛋白质颗粒表面大多为亲水基团，可吸引水分子，
使颗粒表面形成一层水化 膜，从而阻断蛋白质颗粒的相互聚集，防止溶液中蛋白质的沉淀析出。
（
2
）
同种
电荷
：在
pH≠pI
的溶液中，蛋白质带有同种电荷。若
pH< br>＞
pI
，蛋白质带负电荷；若
pH，蛋白质带正
电荷。 同种电荷相互排斥，阻止蛋白质颗粒相互聚集而发生沉淀。

沉淀蛋白质的方法，常用的有：< br>（
1
）
盐析法
，在蛋白质溶液加入大量的硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等< br>中
性盐
，去除蛋白质的
水化膜
，中和蛋白质表面的
电荷
，使蛋白质颗粒相互聚集，发生沉淀。用不同浓度的
盐可以沉淀不同的蛋白质，称分段盐析。盐析是对 蛋白质进行
粗分离
的常用方法。
（
2
）
有机溶剂沉淀法：
使用丙酮沉淀时，必须在
0
～
4
℃低温下进行，丙酮用量一般
10
倍于蛋白质溶液的体积，蛋白质被丙酮沉
淀时，应立即分离，否则蛋白质会变性。 除了丙酮以外，也可用
乙醇
沉淀。此外，还可用加
重金属盐
，加
某些
有机酸
，
加热
等方法将样品中的蛋白质变性沉淀。


20.
蛋白质变性后，其性质有哪些变化？

[
答
] 蛋白质变性后，氢键等
次级键被破坏
，蛋白质分子就从原来
有秩序卷曲的紧密结构
变为无秩序的松
散伸展状结构。即
二、三级以上的高级结构
发发生改变或破坏
，但
一级
结构没有破坏。变性后，蛋白质的
溶解度降低
，是由于高级 结构受到破坏，使分子表面结构发生变化，
亲水基团相对减少，
容易引起分子间
相互碰 撞发生聚集沉淀，蛋白质的
生物学功能丧失
，由于一些化学键的外露，使蛋白质的分解更加容易 。


22.
凝胶过滤和
SDS-PAGE
均是利用凝胶 ，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，
蛋白质分子
越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE
中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？

[
答
]
凝胶过滤
时，凝胶颗粒排阻
Mr
较大的蛋 白质，仅允许
Mr
较小的蛋白质进入颗粒内部，所以
Mr
较大
的蛋白 质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而
Mr
小 的
蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。
SDS- PAGE
分离 蛋白质时，所有的蛋白质均要
从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移 动速度就越快。


40.
如何看待
RNA
功能的多样性
?
[
答
] RNA
有五方面的功能：

（
1)
控制
蛋白质合成
；
(2)
作用于
RNA
转录后加工与修饰
；
(3)
参与
细胞功能的调节
；
(4)
生物催化< br>与其他
细胞
持家功能
；
(5)
遗传信息的加工和进化
；关键在于
RNA
既可以作为信息分子又可以作为功能分子发挥
作用。



44.
如何区分相对分子质量相同的单链
DNA
与单链
RNA
？

[
答
]
（
1
）用专一 性的
RNA
酶与
DNA
酶分别对两者进行
水解。
（
2
）
用碱水解
，
RNA
能够被水解，而
DNA
不被
水解。
（
3
）进行
颜色反应
，二苯胺试剂可以使
D NA
变成蓝色；

苔黑酚（地衣酚）试剂能使
RNA
变成绿色。（
4
）用
酸水解
后，进行单核苷酸的分析（层析法或电泳法）
， 含有
U
的是
RNA
，含有
T
的是
DNA
。


45.
什么是
DNA
变性？
DNA
变性后理化性 有何变化？

[
答
]
DNA
双链转化成单链的过程成变 性。引起
DNA
变性的因素很多，如高温、超声波、强酸、强碱、有机

1
溶剂和某些化学试剂
（如尿素，
酰胺
)
等都能引起变性。
DNA
变性后的理化性质变化主要有：
（
1
）
天然
DNA< br>分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失；
（
2
）天然的 线型
DNA
分子直径与长度之
比可达
1
：
10
，其 水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋
-
线团转变，黏度显著降低；
（
3
）在氯化铯
溶液中进行密度梯度离心，变性后的
DNA
浮力密大大增加；< br>（
4
）沉降系数
S
增加；
（
5
）
D NA
变性后，碱基
的有序堆积被破坏，碱基被暴露出来，因此，紫外吸收值明显增加，产生所谓 增色效应。
（
6
）
DNA
分子具
旋光性，旋光方向为右旋。 由于
DNA
分子的高度不对称性，因此旋光性很强，其
[ a ]=150
。当
DNA
分子
变性时，比旋光值就大大下降。


57.
试述
G
蛋白参与信号传递在细胞代谢调节中的意义。

[
答
]
G
蛋白在
激素、神经递质
等信息分子作用 过程中，起
信号传递、调节和放大
的作用。由于
G
蛋白家族
结构的相 似性
（指
β、γ
-
亚基）和多样性（指
α
-
亚基）
，所以它的参与使激素和许多神经递质对机体的
调节更复杂、更具多层次
，更能适应广 泛的细胞功能变化。
G
蛋白种类很多
，它的介入使激素、受体更能
适应不同细 胞反应和同一细胞反应的多样性，使机体对外界环境变化的应答
更灵敏、更准确、更精细
。一< br>些毒素如霍乱毒素和百日咳毒素等都是通过
G-
蛋白的
α
-
亚 基
ADP
核糖基化而失去正常调节功能，导致一
系列病理反应。


58.
简述
cAMP
的生成过程及作用机制。

[
答
]
胰高血糖素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素等与靶细胞膜上的特异性 受体结合，形成激素
-
受体复合
物而激活受体，
通过
G
蛋白 介导
，
激活腺苷酸环化酶，
腺苷酸环化酶
催化
ATP
转化成
cAMP
和焦磷酸，
cAMP
在磷酸二酯酶作用下水解为
5
＇
-AMP
而丧失作用。
cAMP
作为激素作用的第二信使对细胞的调节作用 是通过
激活
cAMP
依赖性蛋白激酶
（
蛋白激酶
A
）
来实现的。
蛋白激酶
A
由两个调节亚基和两个催化亚基组成的四
聚 体别构酶，当四分子
cAMP
与调节亚基结合后，调节亚基与催化亚基解离，游离的催化亚基催 化底物蛋
白磷酸化，从而调节细胞的物质代谢和基因表达。活化的蛋白激酶
A
一方面催 化胞质内一些蛋白磷酸化调
节某些物质的代谢过程，
如使无活性的糖原磷酸化酶激酶
b
磷酸化，
转变成无活性的糖原磷酸化酶激酶
α，
后者催化糖原磷酸化酶
b
磷酸化成为有活性的糖原磷酸化酶
α，
调节糖原的分解。
活化的蛋白激酶
A
另一
方面进入细胞核，可催化反式作用因子
-cAMP
应答元件结 合蛋白磷酸化，与
DNA
上的
cAMP
应答元件结合，
激活受
cAMP
应答元件调控的基因转录。另外活化的蛋白激酶还可使核内的组蛋白、酸性蛋白及膜蛋白、< br>受体蛋白等磷酸化，从而影响这些蛋白的功能。


59.
介绍两条
Ca++
介导的信号传导途径。

[
答
] Ca++
是体内许多重要
激素
作用的第二信使，作 为第二信使
Ca++
可通过不同的途径来调节体内的物质
代谢过程。

①
Ca++-
磷脂依赖性蛋白激酶途径
：乙酰胆碱、去甲肾上腺素、促肾上腺皮质激 素等信号分子作用于靶细
胞膜上的特异受体，通过
G
蛋白激活磷脂酰肌醇特异性磷脂酶
C
而水解膜组分磷脂酰肌醇
4
，
5-
二磷酸而
生成
DG
和
IP3
。
IP3
从膜上扩散至胞质，与内质网和肌浆 网上的
IP3
受体结合，促进
Ca++
释放使胞质内
Ca++
浓度升高。
DG
在磷脂酰丝氨酸和
Ca++
的配合下激活蛋白激酶
C
，对机体的代谢、基因表达、细胞分化
和增殖起作用。

②
Ca+ +-
钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径
：钙调蛋白有四个
Ca++
结合位点，当胞 浆
Ca++
升高时，
Ca++
与钙调
蛋白结合，使其构象发生改变而 激活
Ca++-
钙调蛋白依赖性蛋白激酶，后者可使许多蛋白质的丝氨酸或苏
氨酸残基 磷酸化，引起蛋白质活性升高或降低，影响机体的代谢过程。如活化的
Ca++-
钙调蛋白依赖 性蛋
白激酶能激活腺苷酸环化酶而加速
cAMP
的生成，也能激活磷酸二酯酶而加速< br>cAMP
的降解；它还能激活胰
岛素受体的酪氨酸蛋白激酶。


72.
简述血糖的来源和去路，人体如何维持血糖水平的恒定？

[
答
]
（
1
）血糖的来源：食物
淀粉
的消化吸收，为血糖的主 要来源；贮存的
肝糖原分解
，是空腹时血糖的
主要来源；非糖物质如甘油、乳酸、大多 数氨基酸等通过糖异生转变而来。


2
（
2
）血糖的去 路：糖的
氧化分解供能
，是糖的主要去路；在肝、肌肉等组织合成糖原，是糖的贮存形式；转变为非糖物质
，如脂肪、非必需氨基酸等；转变成其他糖类及衍生物如核糖、糖蛋白等；血糖过高 时可
由尿排出。

（
3
）人体血糖水平的稳定：主要靠
胰岛 素、胰高血糖素、肾上腺素
等激素来调节。血糖水平
低时
，刺激
胰高血糖素、 肾上腺素的分泌，促进糖原分解和糖异生作用、抑制葡萄糖的氧化分解，使血糖水平升高。
当血糖水平较 高时，刺激胰岛素分泌，促进糖原合成、抑制糖异生作用，加快葡萄糖的氧化分解，从而使
血糖水平下降 。


89.
单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的。杂交瘤细胞是经抗原免疫 的
B
细胞和肿瘤细胞的融合细胞。为
便于筛选融合细胞，选用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶 缺陷（
HGPRT-
）的肿瘤细胞和正常
B
细胞融合后在
HAT（次黄嘌呤、
氨甲蝶呤、
胞苷）
选择培养基中培养，
此时只有融合细胞才 能生长和繁殖。
请解释选择原理。

[
答
]
细胞内核苷酸 合成有两条途径，一是从头合成途径，另一条是补救途径。对于
B
细胞，由于不能在
培 养基上繁殖，所以未融合的
B
细胞不能在培养基上繁殖。对于肿瘤细胞，因为是
HGP RT
缺陷型，因而它
不能通过补救途径合成核苷酸；又因为选择性培养基
HAT
中含氨甲蝶呤，它是叶酸的拮抗剂，叶酸是嘌呤
和嘧啶核苷酸从头合成途径中转移一碳单位的辅酶（四 氢叶酸）的来源，所以氨甲蝶呤抑制了核苷酸的从
头合成途径，这样未融合的肿瘤细胞也不能在选择性培 养基上生长和繁殖，只有融合细胞具有了双亲的遗
传性，才能在
HAT
选择性培养基中 利用补救途径合成核苷酸，从而生长和繁殖。


90.
怎样确定双向复制是
DNA
复制的主要方式，以及某些生物的
DNA
采取单向复制？

[
答
]
通过放射自显影方法，
在复制开始时，
先用低放射 性的
3H-
胸腺嘧啶核苷标记大肠杆菌。
经数分钟后，
再转移到含有高放射性 的
3H
-
胸腺嘧啶核苷的培养基中继续标记。这样在放射自显影图上，复制起始区的
放射性标记密度比较低，感光还原的银颗粒密度就较低；继续合成区标记密度较高，银颗粒密度也较高。
对于枯草杆菌、某些噬菌体和高等真核细胞的染色体等许多
DNA
来说，都是双向复制 ，所以银颗粒的密度
分布应该是中间密度低，
两端密度高；
而对于大肠杆菌噬菌体P2
、
质体和真核细胞线粒体等某些
DNA
来说，
复制是单向的 ，则银颗粒的密度分布应该是一端高、一端低。



和
RNA
各有几种合成方式，各由什么酶催化新链的合成？

[
答
]
（
1
）
DNA
→
DNA
，

其中
DNA
半不连续复制需要
DNA
聚 合酶
III
、
DNA
聚合酶
I
和
DNA
连 接酶；
DNA
修
复合成需要
DNA
聚合酶
I
、DNA
连接酶。

（
2
）
RNA
→
DNA
，
RNA
指导下反向转录合成
DNA
需要
逆转录酶
。

（
3
）
RNA
合成包括：
DNA
→
R NA
，以
DNA
为模板转录合成
RNA
需要
RNA
聚合酶
；
RNA
→
RNA
，以
RNA
为模板合成
RNA
需要
RNA
复制酶
；
RNA
→
DNA
→
RNA
需要
RNA
转录酶和
RNA
聚合酶。


95.
真核生物
DNA
聚合酶有哪几种？它们的主要功能是什么？

[
答
]
真核生物的
DNA
聚合酶有
α、β、γ、 δ、ε
五种，均具有
5′→

3′聚合酶活性
，
DNA聚合酶
γ、
δ
和
ε
有
3′→5′外切酶活性
，
DNA
聚合酶
α
和
β
无外切酶活性。
DNA
聚合酶
α
用于
合成引物，
DNA
聚合酶
δ
用于< br>合成细胞核
DNA
，
DNA
聚合酶
β
和
ε< br>主要起
修复作用
，
DNA
聚合酶
γ
用于
线粒 体
DNA
的合
成
。


96.
要说明原核生物的转录过程。

[
答
]
原 核生物大肠杆菌转录过程大致可以模板的识别、
转录的起始、转录的延伸和终止
4
个阶 段。
RNA
聚
合酶在
σ
亚基引导下，识别并结合到启动子上，然后在 与
RNA
聚合酶结合的部位，
DNA
双链局部被解开。
在转录的起始 阶段，酶继续结合在启动子上催化合成
RNA
链最初
2
～
9
个核苷酸。随后
σ
亚基即脱离核心
酶，并离开启动子，起始阶段至此结束，转录进入延 伸阶段。在延伸阶段核心酶一直沿着
DNA
分子向前移
动，
解链区也跟着移动 ，
新生
RNA
链得以延长，
直至
RNA
聚合酶识别
DNA
上的终止子，
转录终止，
酶与
RNA
链离开模板。核心酶具有 基本的转录功能，对于转录的全过程都是需要的，而识别启动子和起始转录还需

3