暗疮的最佳治疗方法前DC细胞的研究进展情况

2021年2月1日发(作者：割双眼皮手术医院)

前
DC
细胞的研究进展情况


前
DC
细胞的研究进展情况

日期：
2011-01-28
来源：
新桥医院肿瘤生物治疗中心

责任编辑：叶主任

咨询详情

机体的免疫应答首先由抗原递呈细胞
(antigen presenting cell,APC)
捕获、加工和处
理抗原
,
再将抗 原递呈给
T,B
淋巴细胞
,
从而引发一系列的免疫应答。
树突状细胞
(dendritic
cell,DC)
作为功能最强的
APC,
能激活静息型
T
细胞
(na?ve T cell),
激发初始免疫应答,
在体
内发挥强大的免疫监视功能。肿瘤患者体内
DC
功能缺陷
,
不能有效递呈肿瘤抗原
,
导致免
疫无能或免疫耐受
,
使肿 瘤得以发生发展
[1]
。随着
DC
体外诱导扩增技术的发展及分子生
物学技术和基因工程技术应用于
DC
瘤苗构建方法的发现
,DC
瘤苗用于肿瘤 免疫治疗的
实验和临床研究更趋成熟
,DC
瘤苗有望成为肿瘤免疫治疗的一种有效方式 。本文就
DC
的免疫学活性、抗原摄取和递呈途径、体外诱导扩增及其瘤苗构建和应用的研究进 展进
行综述。

1
、
DC
的抗原递呈功能是
DC< br>瘤苗抗肿瘤免疫治疗的基础
DC
在体内分布广泛
,
普遍
存在于 除脑组织外的各种组织和器官中
,
在遇到外来抗原时可捕获、处理抗原。处于组织
间隙 的
DC
为未成熟
DC(immature dendritic cell,iDC) ,
被认为是次级淋巴组织
T
细胞富集
区域中存在的成熟
DC(mat ure dendritic cell,mDC)
的前体
,
具有强大的抗原摄取能力
[2],
但
因其表面表达低水平的
MHC
Ⅰ类
,MHCⅡ类及共刺激分子
,
因而不能有效的将抗原递呈
给
T
淋巴细胞< br>,
对
T
细胞的刺激能力较低。捕获加工处理抗原后
,iDC
丧 失抗原摄取能力
,
向次级淋巴器官迁移
,
同时逐渐成熟。
mDC表面共刺激分子
(CD80,CD86)
、
MHC
Ⅰ类分
子、< br>T
细胞黏附分子
(CD48,CD58)
表达上调
,
其利用内 吞抗原有效合成
MHC
Ⅱ类分子肽复
合物的能力也得到进一步加强
,
并分泌一些细胞因子
,
如
IL-1,IL-6,IL-12,IL-18
等。

DC
通过巨胞饮作用
(macropinocytosis)
、吞 噬作用及受体介导的内吞作用来摄取抗
原
[3]
。外源性抗原被
DC
摄取处理后
,
与
MHC
Ⅱ类分子结合
,
并借助高表达的共刺 激分子
CD 86
等将抗原多肽递呈给
CD 4+T
细胞
,
促使其发生克隆增殖分化
,
并分泌
IL-12
以加强
免疫应答。与< br>MHC
Ⅱ类抗原递呈途径相比
,
对
MHC
Ⅰ类抗原递呈研究较 少。
MHC
Ⅰ类
分子不聚集于
iDC
表面
,
但是其 膜表面表达水平在成熟过程中被上调
,
同时可能有部分伴
随着
MHC
Ⅱ类分子到达细胞表面。
MHC
Ⅰ类分子限制的抗原被递呈给
CD 8+T
细 胞
,
诱
导机体产生抗原特异性
CTL,
在抗肿瘤免疫中意义重大。< br>
2
、
DC
的体外大量诱导扩增是
DC
瘤苗抗肿瘤免 疫治疗的前提



虽然
DC
在体内分布广泛
,< br>但数量极少
,
外周血单个核细胞中
DC
的比例还不到
1%,< br>在淋巴器官中虽数量较多但难以收集
,
而且由于分离出的
DC
具有异质 性
,
难以满足对
DC
的基础研究及临床应用的需要。此外
,
体内的
DC
因为肿瘤分泌的一些因子
,
如

IL-10,T GF,VEGF
限制其成熟而发生功能缺陷。因此
,
利用
DC
的前体 细胞体外诱导分化
扩增
DC
是研究
DC
瘤苗的必要途径。

2.1CD34+
干细胞诱导分化扩增
DC
CD34+
干细胞可从骨髓
(bome marrow,BM)
、脐血
(cord blood,CB)
、外周血
(peripheral blood,PB)
分离纯化而来。
CD34+
干细胞在
GM-CSF
和
TNF-
α
的作用下可增
殖分化为
DC,
而
c -kit
配体可提高
DC
的产量
,
肝细胞生长因子
(hep atocyte growth
factor,HGF)
和
PMA
也是有效 的
DC
分化扩增激活因子
[5]
。
Hogihara
等[6]
利用鼠基质
(HESS-5)
建立了一种新的
DC
培养体 系
,
利用这种培养体系从
CD34+
脐血
(CB)
中诱导扩 增
出
DC,
未成熟及成熟的
CB- DC
分别具有葡聚糖摄取能力及有效的刺激异基因淋巴细胞增
殖能力。

为了 探讨由不同来源的
CD34+
干细胞诱导分化的
DC
在表型及功能上是否有差
异
,Servido[7]
将体外诱导的
CD34+BM- DC
及
CD34+PBSC-DC
进行多方面的比较
,
如细胞
内吞能力、混合白细胞反应、免疫表型分析等。结果发现
,
与
BM- DC
相比较
,PBSC-DC
不能摄取可溶性抗原
,
但是混合白细胞 反应强
,
表面共刺激分子表达更高。他们认为
,
BM- DC
可用来负载特异性抗原肽
,
而功能上比较成熟的
PBSC- DC
更适合应用于基因治
疗。

2.2
单核细胞诱导分化扩增
DC
Garderet
等
[ 8]
总结了外周血单核细胞体外诱导扩增
DC
的基本过程
,
包括用白 细胞
提取法收集外周血单个核细胞
,
淘选法分离单核细胞
,
人血清培 养基
(
含患者自体血清或
AB
血清
)
或无血清培养基
+GM-CSF+IL-4
与单核细胞共同培养。
另一种方法就是从脐血单核
细胞诱 导扩增
DC [9],
培养条件与外周血单核细胞诱导
DC
相同。比较这些< br>CB
黏附细胞
来源的
DC (CB- DC)
和
PB
黏附细胞来源的
DC (PB- DC)
的表型和功能后发现
,
第
7
天的
CB- DC
表达较低水平的
CD80, CD1a, CD83
和
CMRF-44,
但刺激异基因脐血淋巴细胞和
外周血淋巴细胞增殖的能力与
PB-DC
相似< br>,
成熟前摄取吞噬
FITC
葡聚糖的能力也与
PB- DC
相当。

到目前为止
,
大多数研究应用单核细胞起源的
DC (MoDC)
。 在体外使大量单核细胞
分化为
DC,
虽然需要外源性细胞因子刺激和较长培养时间(6d
或更长
),
但是因其具有产量
大、纯度高、易获得等优点
,
更能满足实验和临床研究的需要。

2.3
白血病细胞诱导分化扩增
DC