第一次做会不会怀孕-解放军305医院
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高考生物实验
必修一
一、观察核酸在细胞中的分布
材料:人的口腔上皮细胞
试剂:甲基绿、吡罗红混合染色剂
原理:甲基绿能使
DNA
呈现绿色,吡罗红能使
RNA
呈现红色,因此利用这两种染色剂将细胞
染色,可以真核生物
DNA
主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的
DN A
;
RNA
主要分布在细胞质中。
步骤:
1
、取材
①
滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为< br>0.9%
的
NaCl
溶液(保持细胞渗透压)
;
②
刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;
③
涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;
④
烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2
、水解
①
解:将烘干的载玻片放入装有
30 ml
质量分数为
8%
的盐酸
(改变细胞膜的通透性,加速染
色剂进入 细胞,同时使染色质中的
DNA
和蛋白质分离,有利于
DNA
与染色剂结合) 的小烧杯
中,进行材料的水解;
②
保:将小烧杯放入装有
30
℃温水的大烧杯中保温
5
分钟。
3
、冲洗涂片
①
冲:用
蒸馏水的缓水流
冲洗载玻片
10
秒钟;
②
吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4
、染色
①
染:用
2
滴吡罗红甲基绿 混合染色剂滴在载玻片上,染色
5
分钟;
②
吸:吸去多余染色剂;
③
盖:盖上盖玻片。
1
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5
、观察
①
低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;
②
高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
实验结果
:
细胞核呈绿色
,
细胞质呈红色
注意事项:
盐酸的作用——改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色 体中的
DNA
与蛋白质分离,有利于
DNA
与染色剂结合。
二、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。
1
、还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)的检测
试剂:斐林试剂(甲液:
0.1g/ml
的
NaOH
乙液:
0.05g/ml
的
CuSO
4
)
颜色变化:浅蓝色─→
砖红色沉淀
步骤:取样液
2mL
于试管中→加入
刚配
的斐林试剂
1mL
(斐林试剂甲液和乙液等量混 合均匀
后再加入)→水浴加热
2min
左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
注意事项:①
甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用
②
必须用水浴加热
2
、脂肪的鉴定
试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
颜色变化:橘黄色或红色
步骤:
制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液
2
~
3
滴切片上→
2
~
3min
后吸去染液→滴体积分数50%
的酒精洗
去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴
1
~
2
滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
注意事项:①
切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
②
50%
酒精的作用是:洗去浮色
③
需使用显微镜观察
2
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3
蛋白质的鉴定
颜色变化:变成紫色
试剂:双缩脲试剂(
A
液:
0.1g/ml
的
NaOH
B
液:
0.01g/ml
的
CuSO
4
)
步骤:试管中加样液
2mL
→加双缩脲试剂
A
液
1mL
,摇匀→加双缩尿试剂
B
液
4
滴,摇匀→
观察颜色变化
(
紫色
)
注意事项:①
先加
A< br>液
1ml
,再加
B
液
4
滴
②蛋清要先稀释
4
淀粉的检测和观察
试剂:碘液
颜色变化:变蓝
三、使用显微镜观察多种多样的细胞。
高倍镜的使用步骤
(
1
)在低倍镜下找到物像,将物像移至视野中 央。
(
2
)
转动转换器,换上高倍镜。
(
3
)
调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。
(
4
)
调节细准焦螺旋,使物像清晰。
显微镜的放大倍数
=
目镜的放大倍数×物镜的放大倍数
面积的放大倍数
=
显微镜放大倍数的平方。
显微镜下的物像与实际上下,左右相反。
四、用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体。
1
实验原理
(
1
)叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在 高倍显
微镜下观察它的形态。
(
2
)
线粒体普遍存在于动 物细胞和植物细胞中,
健那绿染液
(活细胞染液)
能专一性使活细胞
中的线粒 体呈现
蓝绿色
,而线粒体周围的细胞质中为无色的状态。通过染色,可以在高倍显微
镜 下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
2
材料
藓类、菠菜或黑藻的叶,人的口腔上皮细胞。
3
方法步骤:
1
、
观察叶绿体
低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。
2
、
观察线粒体
3
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取材→染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。
五、观察植物细胞质壁分离和复原
1
原理:植物细胞的吸水和失水
细胞内的液体环境主要指的是液泡里面的细胞液。
原生质层:细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质(相当于选择透过性膜)
外界溶液浓度
>
细胞
液浓度时,细胞质壁分离
外界溶液浓度
<
细胞液浓度时,细胞质壁分离复原
外界溶液浓度
=
细胞液浓度时,水分进出细胞处于动态平衡
质壁分离(蔗糖溶液)
质壁分离复原(清水)
中央液泡大小
变小
逐渐恢复原来大小
原生质层位置
脱离细胞壁
恢复原位
细胞大小
基本不变
基本不变
2
、
质壁分离产生的条件:
①
具有大液泡
②
具有细胞壁
③细胞内外溶液浓度差④活细胞
3
、
质壁分离产生的原因:
内因——原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性
外因——外界溶液浓度
>
细胞液浓度(不断失水)
4
、材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡)
,质量浓度
0.3g/mL的蔗糖溶液,清水
等。
5
、步骤:制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片 →观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液
,
另一侧用吸水
纸吸引→观察
(
液泡 由大到小
,
颜色由浅变深
,
原生质层与细胞壁分离
)
→盖玻 片一侧滴清水
,
另一
侧用吸水纸吸引→观察
(
质壁分离复原
)
注意事项:
低倍镜下观察
填图并写出
4
、
6
、
7
处液体的颜色
六、探究影响酶活性的因素
1
实验原理:
淀粉遇碘后, 形成紫蓝色的复合物。麦芽糖和
遇碘后,不形成紫蓝色的复合物,但能与斐林试剂
化还原反应, 生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
4
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葡
萄
糖
发
生
氧
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2
方法步骤:
(
1
)温度对酶活性的影响
编号
可溶性淀粉液
温度
新鲜的淀粉酶溶液
碘液,
实验结果
(
2
)
pH
对酶活性的影响
编号
新鲜猪肝研磨液
pH
H
2
O
2
溶液
实验结果
3
实验结论:
(
1
)在最适宜的温度和最适宜的
ph
条件下,酶的活性最高。
(
2
)低温导致酶活性下降,高温、过酸、过碱导致酶活性丧失。
七、叶绿体色素的提取和分离
1
、原理:叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的溶解度不同
,
随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2
、步骤:
(
1
)称取
5g
绿色叶片并剪碎
提取色素
研钵→研磨→漏斗过滤→
(
2
)加 入少量
SiO
2
、
CaCO
3
和
10ml
无水乙醇
收集到试管内并塞紧管口
(
1
) 将干燥的滤纸剪成
10cm
长,
1cm
宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同 时到
5
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1
两滴
盐酸
2mL
无气泡
2
两滴
蒸馏水
2 mL
很多气泡
3
两滴
氢氧化钠
2 mL
无气泡
1
2ml
60
℃
1ml
1
滴
未变蓝
2
2ml
100
℃
1ml
1
滴
变蓝
3
2ml
0
℃
1ml
1
滴
变蓝
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制滤纸条
达滤液细线)
(
2
)在距剪角一端
1cm
处用铅笔画线
(
1
)
用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线,
均匀,
直,
细,
滤液划线
(
2
)
干燥
后重复划
2-3
次
(
1
)向烧杯中倒入
3ml
层析液(不能让滤液细线触及层析液)< br>
纸上层析
(
2
)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中
(
3
)用培养皿盖盖上烧杯(防止挥发)
观察结果:滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图)
最宽:叶绿素
a
;
最窄:叶绿素
b
;
(含量)
相邻色素带最近:叶绿素a
和叶绿素
b
;相邻色素带最远:胡萝卜素和叶黄素。
(溶解度)
注意事项:
(
1
)二氧化硅:为了使
研磨充分
;碳酸钙:
保护色素
免受破坏;无水乙醇:色素的溶剂。
(
2
)过滤时不能用滤纸,用
尼龙布
。
(
3
)滤纸条要剪去两角:防止两侧层析液扩散过快。
(
4
)滤液细线要直:防止色素带的重叠;干后要重画几次:增加色素量,使色素带的颜色更深
一 些。
(
5
)
滤液细线不能触到层析液
:
防止色素溶解到层析液中。
八、探究酵母菌的呼吸方式
1
、原理
:
酵母菌是一种单细胞真菌,属于兼性厌氧菌
。
在有氧条件下进行有氧呼吸
,
产生二氧化碳和水:
C
6
H
12
O
6
+
6O
2
+
6H
2
O
→
6CO
2
+
12H
2
O
+
能量
在无氧条件下进行无氧呼吸
,
产生酒精和少量二氧化碳:
C
6
H
12
O
6
→
2C
2
H
5
OH
+
2CO
2
+
少量能量
2
、装置:
6
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