什么是心衰大肠埃希菌

2021年1月30日发(作者：原地跑步能减肥吗)

山东聊城阿华制药有限公司

SOP-UIS 04 00
Shandong Liaocheng Ehua Medicine CO., LTD





山
东聊城阿华制药有限公司标准操作程序

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码

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草
人

审
核
人

批
准
人

实
施日期

SOP-UIS 04 00




日


期

日


期

日


期

版


次




01
检验
SOP
控制菌检查

大肠埃希菌

1
．简述







大肠埃希菌
(Escherichia
coli)
即大肠杆菌，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。用
4-
甲基伞形酮葡糖苷酸
（
MUG
）和靛基质（
Indole
）
试验 检查大肠埃希菌，检验步骤为：增菌培养后，
转种
MUG-
蛋白胨培养基培养，
多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌，
如
MUG
、
Indole
试验为阳性或阴性即可报告结果。

原理：
利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物 ，
产生颜色或荧光反应作为指示系统来鉴
定目标菌。实验证明，
96%
的大肠 埃希菌含
β
-
葡糖苷酸酶（
GUD
）
。
MUG被
GUD
水解，
产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色的反应强，易于观察。通 常将
MUG
与靛基质试
验结合，来检测大肠杆菌。如
MUG
与
Indole
试验的反应不一致时，则需将供试液的增菌
培养物用
EMB
琼 脂平板分离培养、革兰染色、镜检及生化试验鉴别。

2
．仪器、设备及用具

2.1
无菌室


微生物检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统。

2.2
净化工作台

2.3
培养箱（
36
℃±
1
℃）
。

2.4
高压蒸汽灭菌器。

2.5
显微镜（
1500
×）
。

2.6
恒温水浴（
45
℃±
1
℃）
。

2.8
离心机（
500~4000r/min
）
。

2.9
电冰箱。

2.10
匀浆仪。

2.11

366nm
紫外灯。

2.12
玻璃器皿、器具
[
参照细菌、霉菌和酵母菌计数
2.2.2]
。

3
．试液、指示液。

3.1 0.9%
无菌氯化钠溶液。

3.2 pH7.0
无菌氯化钠
-
蛋白胨缓冲液。

3.3 pH7.2
无菌磷酸盐缓冲液。

3.4
靛基质（
Kovacs
）试液。

3.5
甲基红试液。

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3.6 V-P
试液。

3.7
革兰染色液。

3.8
中性红指示液。

3.9
亚甲蓝指示液。

3.10
溴麝香草酚蓝指示液。

3.11
酸性品红指示液。

3.12
曙红钠指示液。

4
．
培养基

4.1
营养肉汤

4.2
营养琼脂

4.3
胆盐乳糖
(BL)
培养基。

4.4 4-
甲基伞形酮葡糖苷酸蛋白胨培养基。

4.5
乳糖培养基、
5%
乳糖培养基。

4.6
蛋白胨水培养基。

4.7
磷酸盐葡萄糖胨水培养基。

4.8
枸橼酸盐培养基。

4.9
曙红亚甲蓝（
EMB
）琼脂。

4.10
麦康凯琼脂。

5
．对照用菌液

菌液制备：
取大 肠埃希菌的营养琼脂斜面培养物少许，
接种至
5ml
营养肉汤培养基内，
置< br>36
℃
±
1
℃培养
18~24h
，
取均匀培 养物
1ml
用
0.9%
无菌氯化钠溶液稀释制成每
1ml
含 菌
10~100cfu
的菌悬液，其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经培 养后计数确定。

6
．准备

6.1
供试品的检验量
[
见细菌、霉菌和酵母菌计数
5.3]
。

6.2
供试液的制备。

6.2.1
液体供试品
[
见细菌、霉菌和酵母菌计数
7.1]
。

6.2.2
固体、半固体或粘稠液供试品
[
见细菌、霉菌和酵母菌计数7.2]
。

6.2.3
非水溶性供试品
[
见细菌、霉菌和酵母菌计数
7.3]
。

7
．操作步骤

7.1
检验程序






















































MUG
阳性

、
Indole
阳性











































36
℃±
1
℃





MUG
阴性

、
Indole
阴性






报告

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