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生物实训实验报告
篇一:细胞生物学实验社会实践报告
建立一个动物细胞培养室与植物细胞培养室所需的条
件与社会价值
无菌环境是细胞离体培养的最基本条件,所以构建一个
细胞培养室需要保 证工作环境不受微生物和其他有害物质
污染,并且干燥无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌
操作区设在室内较少走动的内侧
,
常规操作和封闭培养于一
室
,
而 洗刷消毒在另一室。
一、基础实验室配置
⑴消毒间:消毒间主要为了处理实验器材以及实验材料,
营造一个无菌的试验环境, 一般消毒间会配备超净实验台、
高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、
电炉 、酸缸等。
⑵无菌操作间:一般由缓冲间和操作间两部分组成。缓冲间在外侧,多用于实验之前的准备,例如:更衣,准备实
验材料,处理实验数据等,可放置电冰箱
,
冷藏器及消毒好
的无菌物品等。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱
,
离心机
,
倒置显微镜等。工作人员进入操作间一定要消毒并
更衣。
(
3
)培养基配制间:主要用于配置细胞培养所用的培
养基。
主要包括冰箱、
天平、
微波炉、
pH
计、
培养基分装 器、
药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养
皿、移液管、烧杯、量筒、容量 瓶、储藏瓶等。
(
4
)
培养室:
用 于培养细胞,
放置以接种的培养基等。
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房 间
不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度
由空调控制,光照由日光灯控制。 天花板和内墙最好用塑料
钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺
设 ,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。
培养室外应有一预备间或走廊。
培养室应配 有培养架、
转床、
摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。
(
5
)洗涤间:主要用于清洗实验之后的用具。除配置
水槽外,还 需配置洗液皿、落水架、干燥箱、柜子、超声波
清洗器等,有需求的还可以配置洗瓶机。
以上基础设施若实验室条件不够,可将消毒间,培养基
配制间,
洗涤间合并一起,
但注意实验室卫生以及仪器摆放,
房间要保持清洁,明亮。
二、辅助实验室
细胞学鉴定室:其功能 是对培养材料进行细胞学鉴定和
研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和
灰尘 污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
生化分析室:在以培养细胞产 物为主要目的的实验室中,
应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分
随时进行 取样检查。离心机、酶联免疫检测仪、天平、
PCR
仪等。
< br>温室:用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生
长的适宜环境条件。常用设备有:温室、弥 雾装置、荫棚、
移栽床、钵、盆、基质等(用于植物细胞培养室)
。
实验器材汇总:
CO2
培养箱:
37
度
+/-0.5
度;能调节温度和
CO2
浓度
冰箱:
4
度或
-20
度家用冰箱,保存一般制 剂;
-70
度保
存蛋白制剂
水质纯化装置:净化水质用于清洗或配制培养
液
培养 器皿分玻璃和塑料两种,玻璃器皿适用于大部分细
胞生长,
可重复使用,
塑料器皿方便 ,
即开即做,
无需清洗。
多孔培养板:为塑料制品。 可供细胞克隆及细胞毒性等
各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试
大量样本 ,易于进行无菌操作。培养板分为各种规格,常用
的规格有:
96
孔、
24< br>孔、
12
孔、
6
孔、
4
孔等。
Oa
贮液瓶:
主要用于存放或配制各种培养用液体如培养
液、血清 及试剂等。贮液瓶分为各种不同规格,如
1000ml
、
500ml
、
250ml
、
100ml
、
50ml
、
5ml
等 。
Ob
吸管:主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主< br>要用于吸取、转移液体,常用的有
1ml
、
2ml
、
5ml< br>、
10ml
等
规格。
无刻度吸管分为直头吸管及弯头吸管,
除 可以作吸取、
转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。
手术刀或解剖刀、手术剪或解剖剪(弯剪及直剪)
,用
于解剖动物、分离及切剪组织, 制备原代培养的材料;眼科
虹膜小剪(弯剪或直剪)
,用于将组织材料剪成小块;血管
钳及组织镊、眼科镊(弯、直)
,用于持取无菌物品(如小
盖玻片)夹持组织等;口腔科探针或 代用品,用以放置原代
培养之组织小块。
社会价值:
细胞培养实验室的社会价值在于,为实验提供基础,促
进细胞培养的发展 ,细胞培养的好处如下:
1.
直接观察活细胞的形态结构和生 命活动。用于细胞学、
遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学
等多种学科研究
. 2.
直接观察细胞的变化可便于摄影。
3.
研 究细胞种类如低等
到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。
4.
便于使用
各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观
察和研究细胞状况。
5.
是分子生物学和基因工程学的研究对
象,也是其主要的组成部分。
6.
易于施用物理、 化学生物的
实验研究。
7.
易于提供大量生物性状相似的实验对象
,
耗资
少比较经济。
8.
成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程
等的材料来源。
篇二:生物实训
微生物代谢产物制备与鉴定实训总结
一、实验目的
1
、了解细菌生 理生化反应原理,掌握细菌鉴定中常用
的生理生化反应的测定方法。
2
、
通 过不同细菌对不同含碳、
含氮化合物分解利用情况,了解细菌碳、氮代谢类型的多样
性。
3
、了解细菌在培养基中的生长现象及其代谢产物在鉴
别细菌中的意义。
4
、学习各种接种技术。
二、实验原理
各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解
能力也不一样,因而代谢产物 存在差别。以此用生理生化试
验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从
而鉴别 细菌的种属,称之为细菌的生理生化反应。
1
、糖(醇)类发酵实验
不同的细菌含有发酵不同的 糖(醇)的酶,因而发酵糖
(醇)的能力各不相同,产生的代谢产物也不同:有的产酸
产气,有 的产酸不产气。指示剂溴甲酚紫
【
pH 5.2
(黄色)
~ pH 6.8
(紫色)
】
,当发酵产酸时,培养基将由紫变黄。产气可由杜氏小管中有无气泡来证明。
2
、甲基红实验(
M.R.
实验)
甲基红【
pH 4.4
(红色)~
pH 6.2
(黄色)
】实验,是
用来检测由葡萄糖产生的有机酸,如甲酸、乙酸、乳酸等。
有些细菌分解糖类产生丙 酮酸,
丙酮酸进一步反应形成甲
酸、乙酸、乳酸等,使培养基的
pH
降低到
4.2
以下。有
些细菌在培养的早期产生有机酸,但在后期将有有 机酸转化
为非酸性末端产物,
如乙醇、
丙酮酸等,
使
pH
升至大约
6
。
3
、靛基质(吲哚)实验
某些细菌,如大肠杆菌,能 产生色氨酸酶,分解蛋白胨
中的色氨酸,产生靛基质,靛基质与对二甲基氨基苯甲酸结
合,形成 玫瑰色靛基质(红色化合物)
。
4
、淀粉水解实验
细菌水解淀粉的过程可以通过底物的变化来证明,即用
碘测定不再产生蓝色。
8
、
5
、柠檬酸盐实验
有的细菌如产气杆菌,能利用柠檬酸钠为碳源,因此能
在柠檬酸盐培养基上生长,并分
解柠檬酸盐后产生碳酸盐,
使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香草酚蓝指示剂
【
pH6.0(
黄
)
~
7.6(
蓝
)
】,由绿色变为深蓝色。
6
、硫化氢实验
某些细菌能分解含硫的氨基酸,产生硫化氢,硫化氢与
培养基中的铁盐反 应,形成黑色的硫化铁沉淀,为硫化氢试
验阳性。
7
、乙酰甲基实验
某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液 中能分解葡萄糖产
生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱
环境下,被空气中 氧,氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的
胍基生成红色化合物,称
V
-
P(
+
)反应。
三、实验器材
1
菌种
大肠杆菌、普通变形杆菌、枯草杆菌、产气肠杆菌
2
培养基
淀粉培养基、蛋白胨培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、
柠檬酸铵半固体培养基、
葡萄糖发酵管和乳糖发酵管各
3
支。
3
溶液和试剂
卢戈氏碘液、甲基红试剂、
40%
KOH
溶液、
?
萘酚,乙醚
和吲哚试剂
4
仪器和其他用品
接种针、接种环、涂布棒、酒精灯、试管、锥形瓶、烧
杯、量筒、平皿
四、试剂及培养基配置
(一)试剂
(
1
)
V
.
P
.试剂
1
.
5%
α
-
萘酚无水酒精溶液
:α
-
萘酚
5g
、无水乙醇
100ml
2
.
40%KOH
溶液
:
KOH 40g
、蒸馏水
100ml
(
2
)甲基红试剂
甲基红
0.1g
、
95%
乙醇
760ml
、蒸馏水
100ml
(
3
)吲哚试剂
对二甲基氨基苯 甲醇
8g
、
95%
乙醇
760ml
、浓
HCL
160ml
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