为什么会长痤疮HIVELISA法抗体检测细则

2021年1月30日发(作者：老年性痴呆症)
HIV(ELISA
法抗体检测细则


1.
目的

根据《全国艾滋病检测技术规范》
（
2004
年版）
，对艾滋病病毒抗体检测作
必要的细化和补充，以规范本实验室对艾滋病病毒抗体的检测方法。

2.
适用范围

本检测细则适用于对人体血液中艾滋病病毒抗体检测。

3.
职责

3.1
检测人员：负责按照本检测细则对被检样品进行检测；

3.2
复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核；

3.3
科室负责人：负责对科室综合管理和检测报告的签发。

4.
检测依据

GB16000
－
1995
艾滋病诊断标准及处理原则。

5.
方法原理


在微孔板上预包被高纯度基因重组
HIV(1+2)
型抗原，可与样品中抗
HIV
抗
体反应，同时加入
HRP
标记
HIV(1+2)
型抗原，然后用
TMB
底物作用显色 ，加入
终止液终止反应，
有颜色变化的微孔板变为黄色，
颜色的深浅与血清中
HIV
抗体
含量呈正比，通过酶标仪检测吸光度
(OD
值
)
从而判定样品中
HIV
抗体的存在与
否。

6.
检测仪器设备名称、型号和材料

6.1
美国宝特
ELX800
型酶标仪；

6.2
水浴箱
37
℃±
1
℃；

6.3 (
新鲜的
)
蒸馏水或去离子水；

6.4
容量器
(
用于准备洗涤液
)
；

6.5
一次性隔离衣、手套、帽子、鞋套。

6.6
计时器；

6.7 84
消毒液、
75%
乙醇；

6.8
适用于盛装有可能受污染的物品的容器；

6.9
吸水纸；

6.10
微板振荡器（用于溶解及混匀结合物与样品，速度约为
900r/min< br>）
；

6.11 KHB ST-36W
洗板机；

6.12
加样器
(20
～
100
μ
L)
，准确度±
2%
及一次性加样头。

7.
检测环境条件

第
1
页共
7
页

所有的实验应
20
℃～
25
℃室温中进行

8.
检测步骤

8.1
检测前准备

8.1.1
样品收集和准备

a.
不需要特殊准备，不需要病人禁食；

b.
血清和血浆都可使用，
柠檬酸，
肝素和
EDTA
等抗 凝剂不会产生影响，
但不能
与其他药物并用；

c.
血液应以一般法收集，并要小心处理；

d.
自血清中去除纤维蛋白，自血浆中去除红血球，避免溶血；

e.
标本中若含氮化钠或微粒物质会产生错误结果；

f.
高胆红素血、高溶血、乳糜血或高蛋白血标本通常会影响实验结果；

g.
标本中应无微生物，在
2
℃～
8
℃温度下，可保存一周，新鲜血液标本可长期
保存在
-20
℃，标本要避免反复冻融；

h.
经一个冷 冻
/
融化周期处理或在
56
℃
30
分钟的热灭活标本不会影 响实验结
果；

i.
标本上应有与其它标本分开产，
并有明显标记
(
如
HIV
检测、
姓名、
编号或时
间
)< br>。

8.1.2
检测试剂：本实验室采用珠海丽珠和英科新创两种人类免疫缺 陷病毒
HIV(1+2)
型艾滋病病毒抗体酶联免疫检测试剂
(
双抗原夹心法
)
珠海丽珠

英科新创

a.
微量酶标板
12
×
8
孔；

微量酶标板
12
×
8
孔

b. 1
瓶
HIV
阳性对照（
1ml
）
，
1
瓶
HIV
阳性对照（
1ml
）

c. 1
瓶
HIV
阴性对照（
1ml
）
；
1
瓶
HIV
阴性对照（
1ml
）

d. 1
瓶
(50mL/
瓶
)
浓缩洗涤液
(20
×
)；
2
瓶
(25mL/
瓶
)浓缩洗涤
液
(20
×
)