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北京安定医院官网真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测操作SOP文件

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-30 07:34

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2021年1月30日发(作者:早期症状图片)
真菌(
1-3

-
β
-D
葡聚糖测定规范操作

1.
目的



建立真菌(
1- 3

-
β
-D
葡聚糖检测标准操作规范,保证实验结果的准确性。< br>

2.
授权操作人

经培训合格的微生物实验室检验人员。


3.
实验原理


1-3

-
β
-D
葡聚糖检测原理:真菌(1-3

-
β
-D
葡聚糖激活酶反应主剂中的
G
因子后形
成凝固蛋白,

根据其所引起的浊度变化对真菌(
1-3

-
β
-D
葡聚糖浓度进行定量测定。


4
.产品性能指标

4.1


灵敏度




10pg/ml

4.2


精密度



批间


CV

10%


4.3


准确性


回收率
75-125%



4.4


标准曲线相关系数


r
绝对值≥
0.980




5
.实验组成

5.1
实验仪器及器具:



MB-80
微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪,

20~200?
l
加样器、
100~1000?
l
加样器、 旋涡混合器、定时器。

5.2
实验耗材:


200?< br>l
无热原吸头、
1000?
l
无热原吸头、无热原平底试管、无热原真 空采血管。

5.3
试剂盒组成


真菌(
1-3

-
β
-D
葡聚糖检测试剂盒(光度法)


试剂盒包括反应主剂和样品处理液。


6
.工作环境




相对湿度:
20%~80%


温度控制:
10~30
℃;

电源电压:
220V±
10%

50Hz±
2%



7
.标本采集及保存

7. 1
检测样本:

血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液等。

7.2
采集要求:


采样过程要求无菌操作,用专用的无热原真空采血管(肝素类抗凝)


常规病人早上用药治疗前采血
/
取样(血透患者透析前采血)


7.3
样本保存:

样本采集后应在
3000

/
分进行离心,若不能及时检测,
应将血浆转移至无热原转移
管内,在
-20< br>℃冰箱中冷冻保存,一周内使用。


8
.操作程序

8.1
打开
MB-80
微生物快速动态检测系统主机、电脑及恒温仪预热< br>30min


8.2
打开
MB-80
微生物快速 动态检测系统软件,录入病人信息、样本种类及检测项目等
信息后点击采集。

8.3
血液前处理过程,无菌操作,用专用无热原真空采血管(肝素类抗凝)抽取静脉血
4ml
轻轻混匀,按转速
3000r/min
进行离心
1
分钟,得到富含血小板血 浆。

8.4
取上述富含血小板血浆
100?
l
,加入到 样品处理液中,轻轻摇匀
10
秒后插入恒温仪
加热区中进行
70
℃干 热
10min


8.5
干热结束后,将前处理液冷却
5m in
,至室温后取出(取出时切忌震荡)


8.6
取上述前处理 液中上清液
200?
l
加入到反应主剂中,
轻轻混匀
(一般混匀10
秒即可)

待完全溶解至透明后,全部移液至平底试管中
(
不要产生气泡
)
,立即插入
MB-80

生物快速动态检测系统中进 行检测。

8.7
反应结束后仪器自动计算结果并保存。


待测血浆样品制备、检测示意图


9
.操作注意事项

9.1
预热采集

在进行试验之前,仪器一定要提前预热
30min
,达到工作温度后,按要求填写表头
信息,完毕后点击采集,使仪器处于采集状态后再进行试验 。

9.2
样本预处理

9.2.1
血液标本
3000r/min
离心
1min

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