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常用染色液的配制
1.
吕氏(
Loefflev
)美蓝染色液
A
液:
2%
美蓝(
Methylene blue
)
95%
酒精溶液
B
液:
10%KOH
溶液
取
A
液
30ml
、
B
液
0.1ml
与
100ml
蒸馏水 混合。
2.
石炭酸复红染色液
A
液:
4%
碱性复红(
basic fuchsin
)
95%
酒精溶液
将碱性复红在研钵中研磨后,< br>逐渐加入
95%
酒精,
继续研磨使其溶解、
配成
A
液 。
B
液:
5%
石炭酸溶液
取
A
液
10ml
、
B
液
90ml
混合即可。
一般可将 此溶液稀释
5-10
倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3.
革兰氏(
gram
)染色液
(
1
)草酸铵结晶紫染液:
A
液:
1%
结晶紫(
Crystal violet
)
95%
酒精溶液
B
液:
1%
草酸铵(
Ammonium oxalate
)溶液
取
A
液
20mlB
液80ml
,静置
48/
小时后使用。
(
2
)路哥氏(
Lugol
)碘液:
碘片
1.0g
、碘化钾
2.0g
、蒸馏水
300ml 先将碘化钾溶解在少量水中,
再将碘片溶解在碘化钾溶液另,
待碘全部
溶解后,加 够水即成。
(
3
)
95%
酒精溶液
(
4
)蕃红(沙黄)复染液:
2.5%
蕃红(
Safranlne O
)
95%
酒精溶液。
取此液
10ml
与
90ml
蒸馏水混匀即成。
4.
芽孢染色液
(
1
)
5%
孔雀绿
(Malachite green)
溶液。
(
2
)
0.5%
蕃红溶液。
(
3
)苯酚品红溶液
称取
11g
碱性品红溶于
100ml
无水酒精中。
再取上述溶液
10ml
与
100ml 5%
的苯酚溶液混合,过滤备用。
(
4
)黑色素
(nigrosin)
溶液
10%
黑色素溶液,
置沸水浴中
30min
后,
滤纸过滤二次,
补 加水到
100ml
,
然后加入
40%
甲醛
0.5%(v/v)
作防腐剂。
5.
荚膜染色液
(
1
)黑色素水溶液
将黑色素在蒸 馏水中煮沸
5min
,配成
5%
溶液,然后加入
40%
甲醛
0.5%(v/v)
作防腐剂。
(
2
)蕃红染色液
与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.
鞭毛染色液
A
液:单宁酸
5.0g
、
FeC1
3
1 .5g
、蒸馏水
100ml
,福尔马林(
15%
)
2.0m l
、
NaOH(1%)1.0ml
。
配好后应当日使用,次日即效果差,第三日则不能使用。
B
液:
2%AgNO
3
溶液
待
AgNO
3
溶解后,取出
10ml
备用。向其余的
90ml
AgN O
3
中滴入浓
NH
4
OH
,
使之成为很浓厚的悬浮 液,
再继续滴加
NH
4
OH
,
直到新形成
的沉淀又 重新刚刚溶解为止。
再将
10ml
德用的
AgNOa
溶液慢慢滴入。
此时会出理薄雾,轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入
AgNO
3
溶液直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,
此染液可使用一周;如雾重,则 银盐沉淀出,不宜使用。
7.
乳酸石炭酸棉蓝染色液
石炭酸
2.0g
、
甘油
40ml
、
乳酸
(密度1.21
)
20ml
、
蒸馏水
20ml
、
棉蓝
(
Cotton
blue
)
0.05g
石炭酸在蒸馏水 中加热溶解
,
然后加入乳酸和甘油
,
最后加入棉蓝
,
使其溶 解即
成。
8.
富尔根氏(
Feulgen
)核染色液
(
1
)席夫氏(
Schiff
)试剂
将
1g
碱性复红加于
200ml
煮沸的蒸馏水中,振荡
5
分钟,冷却至
50
℃
左右过滤。
加入
1.0M HC1 20ml
,摇匀。
待冷至
25
℃时,
加
Na
2
S
2
O
5
(偏
重亚硫酸钠)
3g
,摇匀后装在棕色瓶中,用黑 纸包好,放于暗处过夜,
此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用)
。再用中性活性炭过滤,
其滤液振荡
1
分钟后再过滤,滤液置于冷暗处备用。注意:过滤需在避
光条件 下进行。
在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、
干燥,
以消除还 原性
物质。
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