长沙女子医院TLC常用试剂配制及显色方法

2021年1月27日发(作者：婴幼儿阴道炎)
常用试剂配制及显色方法

（一）

通用显色剂

1
．

重铬酸钾——硫酸

一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。

喷洒剂：
5
克重 铬酸钾溶于
100ml
，
40%
硫酸中。喷洒后加热至
150
o
C
斑点出现。

2
．

碘：检查一般有机物

（
1
）

碘蒸汽：在一个密 闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层
放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛 水的小杯，增加缸内的湿度，可提高
显色的灵敏度。

（
2
）

0.5%
碘的氯仿溶液，
取出挥发散过量 的碘再喷
1%
淀粉的水溶液，
斑点转成蓝色。

3
．

碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）
。

4
．

5%
——磷钼酸乙醇溶液：喷后
120
o< br>C
烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景
变为无色。

5
．

20%
磷酸乙醇溶液：喷后
120
o
C
，还原性物质显兰色。

6
．

碱性高锰酸钾试剂：还 原性物质在淡红背景上显黄色。溶液
I:1%
高锰酸钾溶液。

溶液
II
：
5%
碳酸钠溶液。

溶液
I
和溶液
II
等量混合使用。

7
．

中性
0.05%
高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。

8
．

硝酸银——氢氧化铵
（
Tollen
’
s--zoffaronl< br>）试剂，喷后
105
o
C
烤
5~10
分钟，
还原性物
质显黑色。

溶液
I
：
0.1N
硝酸银溶液。







溶液
II
：氢氧化铵溶液。
< br>临用前溶液
I
和溶液
II
以
1
：
5
混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。

9
．

硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。

溶液
I
：
0.1N
硝酸银溶液：
2N
氢氧化铵溶液：
2N
氢氧化钠（
1
：
1
：
2
）
。临用前配制。

溶液
II
：高锰酸钾
0.5g
，碳酸钠
1g
，加水 成
100ml
溶液
,
临用前溶液
I
和溶液
II等量
混合。

10
．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。





溶液
I
：
0.5%
四唑兰甲醇溶液。



溶液
II
：
6N
氢氧化钠溶液。临用前溶液< br>I
和溶液
II
等量混合。

11
．
铁氰化钾 ：
三氯化铁试剂：
还原性物质显兰色，
再喷射
2N/L
盐酸溶液，< br>则兰色加深。





溶液
I
：
1%
铁氰化钾溶液。




溶液
II
：
2%
三氯化铁溶液。临用前溶液
I< br>和溶液
II
等量混合。

12
．浓硫酸：甲醇（
1< br>：
1
）溶液，或
5%
硫酸的乙醇溶液，喷后
100
o
C
烤
15
分钟，各种
不同物质显不同颜色。

13
．萤光显色剂溶液：试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其
他萤光斑点 。

A
：
0.2%2.7
——二氯萤光素乙醇溶液。

B
：
0.01
萤光素乙醇液

C
：
0.1%
桑色素乙醇溶液

D
：
0.05
罗丹明
B
乙醇溶液

E
：萤光素一溴，检不饱和化合物。

（
1
）
0.1%
萤光素乙醇溶液

（
2
）
5%
溴的
CCL
4
溶液。

喷洒（
1
）以后，放置（
2
）溶液的缸内，可在
UV
光下检查萤光，萤光素与溴

化合成曙
红（
ensln
）
（无萤光）
，而光饱和化合物则与溴加成，保留了原来的萤光；若点样量较多，
则成黄色

斑点，底板成红色。

14
．碱式醋酸铅试剂（可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应）
。





取
Pbo14g
置乳钵内，加蒸馏水10ml
，研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵用
10ml
蒸馏水洗净，洗液并入 瓶中，加醋酸铅溶液（取醋酸铅
22g
，加蒸馏水
70ml
制成）
7 0ml
，
用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使成
10 0ml
即得。

（
二）生物碱显色剂

通用显色剂：

1
．改良碘化铋钾（
Dragendorff
）试剂：生物碱和某些含氯化合物显橙红色。

溶液
I
：碱式硝酸铋
0.85g
，溶于冰乙酸
10ml
和
40ml.
溶液
II
：碘化钾
0.8g
溶于水
20ml.
储 存液：溶液
I
和溶液
II
等量混合（置棕色瓶中杨以长期保存）
。< br>
显色剂：储存
1ml
与冰乙酸
2ml
和水
70ml
混合，用前配制。

2
．碘化铂钾（碘铂酸）试剂，不同的生物碱显不同的颜 色。
10%
六氯化铂酸溶液
3ml
和
水
97ml
混 合，加
6%
碘化钾溶液
100ml
，混合均匀，临用前配制。

3
．碘—碘化钾（
Wagner
）试剂：生物碱

显棕褐色。

碘
1g
和碘化钾
10g
溶于
50ml
水中，加热，加冰醋酸
2ml
用水稀释到
100ml
。
4
．改良碘化铋钾：碘，碘化钾（
1
：
1
）试剂；生 物碱显紫棕色或灰黑色。

5
．硫酸铈——硫酸试剂（改良
sonnensc lein
试剂）
：喷后
110
o
C
烤几分钟，不同的生物碱
显不同的颜色。硫酸铈
0.1g
悬浮于水
4ml
中，加三氯化乙酸< br>1g
，加热煮沸，放冷，逐滴
加入浓硫酸直到混浊消失为止。

6．碘化氯钾（
vmayer
）试剂（沉淀试剂）
：取
HgCL
2
（毒）
1.35g
加蒸馏水
60ml
溶解后，
量取碘化钾< br>5g
，加碘馏水
10ml
使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成
100 ml
即得。

7
．硅钨酸（
Bertrand
）试剂（沉淀 试剂）
：
5g
硅钨酸溶于
100ml
蒸馏水中，加稀盐酸使呈
酸性反应即得。

（三）强心苷显色剂

1
．碱性
3.5
——二硝基苯甲酸试剂：强心苷显紫红色、几分钟后褪色。
2%3.5
——二硝基苯甲酸甲醇溶液与
2N
氢氧化钾溶液，用前按劳
1
：
1
混合。

2
．碱性三硝基苯：在浅橙色背景上显橙红色。

溶液I
：间三硝基苯
100mg
。溶于二甲基甲酰胺
40ml
，加浓
HCL3~4
滴，加水至
100ml
，
避光能长期保存。

溶液
II
：
5%
碳酸风溶液







先喷溶液
I
，再喷溶液
II，喷后
90~103.0
o
C
烤
5
分钟。
< br>3
．三氯乙酸试剂：喷后
110
o
C
烤
7~10分钟，紫外光下观察萤光。

试剂
I
：
25%
三氯乙酸 的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日。或用试剂
II
：上述乙醇溶
液用前每
10ml
加过氧化氢溶液
4
滴或新配
3%
氯铵
T
水 溶液按
4
：
1
混合。

4
．三氯化锑试剂：喷后< br>100
o
C
烤
5
分钟，日光下或紫外光下观察。

25%
或饱和的三氯化锑氯仿溶液。

5
．磷酸——溴试剂

溶液
I
：
10%
磷酸溶液。




溶液
II
：溴化钾饱和溶液：
25%
盐酸溶液（
1
：
1
：
1
）
。

薄层用溶液
I
喷洒后，
在
125
o
C
烤
12
分钟
（薄层太湿时则烤的时间可适当延长）
，
在紫外
光下观察一次，将薄层再烤热，趁热 喷溶液
II
，再在紫外光下观察。

6
．
Keller——
Kllianl
试剂：
（检查
α
——去氧糖）
< br>试液：
100ml
冰
HAC
和
FeCL
3
试 液
0.5ml
混匀，试样
1ml
混匀。试样
1ml
加试液< br>2ml
溶
解后，沿试管壁滴入浓硫酸
2
接触面即显棕色。渐变浅绿，兰 色。最后
HAC
层全部染成
兰色。

（四）黄酮苷显色剂







黄酮类成份在紫外光下大多显出不同 颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化
钠等碱性溶液，则颜色

变深或变色。

1
．氨气

2
．
10%
氢氧化钠或氢氧化钾溶液。

3
．
1%
或
5%
碳酸钠溶液。

4
．
1%
或
5%
三氯化铝乙醇溶液。

5
．
2%
乙酸镁甲醇溶液。

6
．饱和三氯化锑的 氯仿溶液，
100
o
C
烤
5
分钟。

以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。

7
．
1~2%
三氯化铁乙醇溶液。

8
．
1%
中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。

9
．
0.1N
硝酸银溶液。

10
．铁氰色钾——三氯化铁试剂。

溶液
I
：
2%
铁氰化钾溶液。






溶液
II
：
2%
三氯化铁溶液。临 用前溶液
I
与溶液
II
等
量混合。

11
．硼氢化钾试剂：双氢黄酮化合物显红、橙红色。

溶液
I：
1~2%
硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制。溶液
II
：浓盐 酸

先喷
I
、
5
分钟后放入盐酸蒸气槽内。
12
．
Shinoda
试剂：
在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，
黄酮醇显红紫色。
制备硅胶薄层时，
加入
2%w/w
锌粉混合，
薄层 展开后盐酸溶液
,
如展开剂为酸性，
可在展开后先喷锌——丙
酮混悬液，再喷 盐酸溶液。

罗丹明——氨试剂。

溶液
I
：
0. 1%
罗丹明
B
的
4%
盐酸溶液。



溶液
II
：浓氨溶液。

先喷溶液
I
，然后再将薄层放入氨汽槽内。

14
．对氨基苯磺酸试剂。

溶液
I
：对氨基苯磺酸盐溶液。


溶液
II
：
5%
亚硝酸钠溶液。

将对氨基苯磺酸
0.3g
溶液对
8%
盐酸溶液
100ml
中，到紫溶液25ml
用冰冷却，加预冷的
溶液
II1.5ml
。

15
．硼酸——柠檬酸试剂

溶液
I
：饱和硼酸的丙酮溶液。





溶液
II
：柠檬酸丙酮溶液。

先喷溶液
I
，再喷溶液
II
。

16
．福林试剂（
Folin Ciocalteu
试剂）

钨酸钠
10g
和钼酸钠
2.5g
溶于
70ml
水中，再缓 缓加
85%
磷酸
5ml
和浓盐酸
10ml
，将混
合 液回流煮沸
10
小时，
然后加硫酸锂
15g
，
水
5 ml
及溴
1
滴，
再回去流煮沸
15
分钟，所
得溶液 冷却后移置
100ml
溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备液）
，溶液应不显绿色。
溶液
I
：
20%
碳酸钠溶液。







溶液
II
：临用前上述贮备液
1
份用水三分稀释。

先喷溶液
I
，稍干再喷溶液
II
。

（五）皂苷灶显色剂

1
．
25%
磷钼酸乙醇溶液：喷后在
140
o
C
加热
5~10
分钟皂苷元均呈深兰色。

2
．三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液：喷后在
90
o
C
烤
10
分钟（应在通风厨中进行）
，不同的
皂苷元在可见光或紫外光下显出各种颜色。

3
．硫酸：甲醇（
1
：
2
）溶液，喷后加热，不 同的皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色，
所显颜色与温度无关。

4
．氟 磺酸：乙酸（
1
：
1
）溶液，喷后
130
o
C加热
5
分钟。各种皂苷元可显天兰紫、粉红、
淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光 。

5
．碘蒸汽：薄层置于碘蒸汽筒中，皂苷无皆显棕黄色斑点。

6
．三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（
1
：
2
）溶液，喷后在
100
o
C
加热
20
分钟皆显黄色。

7
．
2%
血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂苷）
。
< br>取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白，并用生
理盐水反复 离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通接读取）用
生理盐水配成
2%< br>混悬液贮冰箱内备用（贮存期
2~3
天）
。

（
六）蒽醌苷显色剂





蒽醌及其 苷本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光。在薄层上用氨
熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜 色变深或变色。

1
．氨气

2
．
10%
氢氧化钾、甲醇溶液。

3
．
3%
氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。


4
．
50%
哌啶的苯溶液。

5
．饱和喷酸锂溶液。

6
．饱和硼砂溶液。

7
．
0.5%
乙酸镁甲醇溶液：喷后
90
o
C
烤5
分钟。

8
．
0.5%
乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光。

9．
0.5%
牢固兰
B
试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显 萤光的斑点此时在
可见光下显棕、紫或绿色。也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显色。也用于酚类
及能偶芳香胺的显色。