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长沙女子医院TLC常用试剂配制及显色方法

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-27 20:35

皮肤病传染-根治灰指甲

2021年1月27日发(作者:婴幼儿阴道炎)
常用试剂配制及显色方法

(一)

通用显色剂

1


重铬酸钾——硫酸

一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。

喷洒剂:
5
克重 铬酸钾溶于
100ml

40%
硫酸中。喷洒后加热至
150
o
C
斑点出现。

2


碘:检查一般有机物


1


碘蒸汽:在一个密 闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层
放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛 水的小杯,增加缸内的湿度,可提高
显色的灵敏度。


2


0.5%
碘的氯仿溶液,
取出挥发散过量 的碘再喷
1%
淀粉的水溶液,
斑点转成蓝色。

3


碘——碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)


4


5%
——磷钼酸乙醇溶液:喷后
120
o< br>C
烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景
变为无色。

5


20%
磷酸乙醇溶液:喷后
120
o
C
,还原性物质显兰色。

6


碱性高锰酸钾试剂:还 原性物质在淡红背景上显黄色。溶液
I:1%
高锰酸钾溶液。

溶液
II

5%
碳酸钠溶液。

溶液
I
和溶液
II
等量混合使用。

7


中性
0.05%
高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。

8


硝酸银——氢氧化铵

Tollen

s--zoffaronl< br>)试剂,喷后
105
o
C

5~10
分钟,
还原性物
质显黑色。

溶液
I

0.1N
硝酸银溶液。







溶液
II
:氢氧化铵溶液。
< br>临用前溶液
I
和溶液
II

1

5
混合。注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。

9


硝酸银——高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。

溶液
I

0.1N
硝酸银溶液:
2N
氢氧化铵溶液:
2N
氢氧化钠(
1

1

2

。临用前配制。

溶液
II
:高锰酸钾
0.5g
,碳酸钠
1g
,加水 成
100ml
溶液
,
临用前溶液
I
和溶液
II等量
混合。

10
.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。





溶液
I

0.5%
四唑兰甲醇溶液。



溶液
II

6N
氢氧化钠溶液。临用前溶液< br>I
和溶液
II
等量混合。

11

铁氰化钾 :
三氯化铁试剂:
还原性物质显兰色,
再喷射
2N/L
盐酸溶液,< br>则兰色加深。





溶液
I

1%
铁氰化钾溶液。




溶液
II

2%
三氯化铁溶液。临用前溶液
I< br>和溶液
II
等量混合。

12
.浓硫酸:甲醇(
1< br>:
1
)溶液,或
5%
硫酸的乙醇溶液,喷后
100
o
C

15
分钟,各种
不同物质显不同颜色。

13
.萤光显色剂溶液:试喷以下一溶液,不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其
他萤光斑点 。

A

0.2%2.7
——二氯萤光素乙醇溶液。

B

0.01
萤光素乙醇液

C

0.1%
桑色素乙醇溶液

D

0.05
罗丹明
B
乙醇溶液

E
:萤光素一溴,检不饱和化合物。


1

0.1%
萤光素乙醇溶液


2

5%
溴的
CCL
4
溶液。

喷洒(
1
)以后,放置(
2
)溶液的缸内,可在
UV
光下检查萤光,萤光素与溴

化合成曙
红(
ensln

(无萤光)
,而光饱和化合物则与溴加成,保留了原来的萤光;若点样量较多,
则成黄色

斑点,底板成红色。

14
.碱式醋酸铅试剂(可做喷洒或沉淀试剂,多种有机化合物均反应)







Pbo14g
置乳钵内,加蒸馏水10ml
,研后成糊状后,倾入玻璃瓶中,乳钵用
10ml
蒸馏水洗净,洗液并入 瓶中,加醋酸铅溶液(取醋酸铅
22g
,加蒸馏水
70ml
制成)
7 0ml

用力振摇,放置七天,滤过,并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使成
10 0ml
即得。


二)生物碱显色剂

通用显色剂:

1
.改良碘化铋钾(
Dragendorff
)试剂:生物碱和某些含氯化合物显橙红色。

溶液
I
:碱式硝酸铋
0.85g
,溶于冰乙酸
10ml

40ml.
溶液
II
:碘化钾
0.8g
溶于水
20ml.
储 存液:溶液
I
和溶液
II
等量混合(置棕色瓶中杨以长期保存)
。< br>
显色剂:储存
1ml
与冰乙酸
2ml
和水
70ml
混合,用前配制。

2
.碘化铂钾(碘铂酸)试剂,不同的生物碱显不同的颜 色。
10%
六氯化铂酸溶液
3ml


97ml
混 合,加
6%
碘化钾溶液
100ml
,混合均匀,临用前配制。

3
.碘—碘化钾(
Wagner
)试剂:生物碱

显棕褐色。


1g
和碘化钾
10g
溶于
50ml
水中,加热,加冰醋酸
2ml
用水稀释到
100ml

4
.改良碘化铋钾:碘,碘化钾(
1

1
)试剂;生 物碱显紫棕色或灰黑色。

5
.硫酸铈——硫酸试剂(改良
sonnensc lein
试剂)
:喷后
110
o
C
烤几分钟,不同的生物碱
显不同的颜色。硫酸铈
0.1g
悬浮于水
4ml
中,加三氯化乙酸< br>1g
,加热煮沸,放冷,逐滴
加入浓硫酸直到混浊消失为止。

6.碘化氯钾(
vmayer
)试剂(沉淀试剂)
:取
HgCL
2
(毒)
1.35g
加蒸馏水
60ml
溶解后,
量取碘化钾< br>5g
,加碘馏水
10ml
使溶解将两液混合,加蒸馏水稀释使成
100 ml
即得。

7
.硅钨酸(
Bertrand
)试剂(沉淀 试剂)

5g
硅钨酸溶于
100ml
蒸馏水中,加稀盐酸使呈
酸性反应即得。

(三)强心苷显色剂

1
.碱性
3.5
——二硝基苯甲酸试剂:强心苷显紫红色、几分钟后褪色。
2%3.5
——二硝基苯甲酸甲醇溶液与
2N
氢氧化钾溶液,用前按劳
1

1
混合。

2
.碱性三硝基苯:在浅橙色背景上显橙红色。

溶液I
:间三硝基苯
100mg
。溶于二甲基甲酰胺
40ml
,加浓
HCL3~4
滴,加水至
100ml

避光能长期保存。

溶液
II

5%
碳酸风溶液







先喷溶液
I
,再喷溶液
II,喷后
90~103.0
o
C

5
分钟。
< br>3
.三氯乙酸试剂:喷后
110
o
C

7~10分钟,紫外光下观察萤光。

试剂
I

25%
三氯乙酸 的乙醇或氯仿溶液,配制后可放置数日。或用试剂
II
:上述乙醇溶
液用前每
10ml
加过氧化氢溶液
4
滴或新配
3%
氯铵
T
水 溶液按
4

1
混合。

4
.三氯化锑试剂:喷后< br>100
o
C

5
分钟,日光下或紫外光下观察。

25%
或饱和的三氯化锑氯仿溶液。

5
.磷酸——溴试剂

溶液
I

10%
磷酸溶液。




溶液
II
:溴化钾饱和溶液:
25%
盐酸溶液(
1

1

1



薄层用溶液
I
喷洒后,

125
o
C

12
分钟
(薄层太湿时则烤的时间可适当延长)

在紫外
光下观察一次,将薄层再烤热,趁热 喷溶液
II
,再在紫外光下观察。

6

Keller——
Kllianl
试剂:
(检查
α
——去氧糖)
< br>试液:
100ml

HAC

FeCL
3
试 液
0.5ml
混匀,试样
1ml
混匀。试样
1ml
加试液< br>2ml

解后,沿试管壁滴入浓硫酸
2
接触面即显棕色。渐变浅绿,兰 色。最后
HAC
层全部染成
兰色。

(四)黄酮苷显色剂







黄酮类成份在紫外光下大多显出不同 颜色,用氨熏,喷三氯化铝溶液或喷氢氧化
钠等碱性溶液,则颜色

变深或变色。

1
.氨气

2

10%
氢氧化钠或氢氧化钾溶液。

3

1%

5%
碳酸钠溶液。

4

1%

5%
三氯化铝乙醇溶液。

5

2%
乙酸镁甲醇溶液。

6
.饱和三氯化锑的 氯仿溶液,
100
o
C

5
分钟。

以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。

7

1~2%
三氯化铁乙醇溶液。

8

1%
中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。

9

0.1N
硝酸银溶液。

10
.铁氰色钾——三氯化铁试剂。

溶液
I

2%
铁氰化钾溶液。






溶液
II

2%
三氯化铁溶液。临 用前溶液
I
与溶液
II

量混合。

11
.硼氢化钾试剂:双氢黄酮化合物显红、橙红色。

溶液
I
1~2%
硼氢化钾(钠)异丙醇溶液,必须新鲜配制。溶液
II
:浓盐 酸

先喷
I

5
分钟后放入盐酸蒸气槽内。
12

Shinoda
试剂:
在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸,
黄酮醇显红紫色。
制备硅胶薄层时,
加入
2%w/w
锌粉混合,
薄层 展开后盐酸溶液
,
如展开剂为酸性,
可在展开后先喷锌——丙
酮混悬液,再喷 盐酸溶液。

罗丹明——氨试剂。

溶液
I

0. 1%
罗丹明
B

4%
盐酸溶液。



溶液
II
:浓氨溶液。

先喷溶液
I
,然后再将薄层放入氨汽槽内。

14
.对氨基苯磺酸试剂。

溶液
I
:对氨基苯磺酸盐溶液。


溶液
II

5%
亚硝酸钠溶液。

将对氨基苯磺酸
0.3g
溶液对
8%
盐酸溶液
100ml
中,到紫溶液25ml
用冰冷却,加预冷的
溶液
II1.5ml


15
.硼酸——柠檬酸试剂

溶液
I
:饱和硼酸的丙酮溶液。





溶液
II
:柠檬酸丙酮溶液。

先喷溶液
I
,再喷溶液
II


16
.福林试剂(
Folin Ciocalteu
试剂)

钨酸钠
10g
和钼酸钠
2.5g
溶于
70ml
水中,再缓 缓加
85%
磷酸
5ml
和浓盐酸
10ml
,将混
合 液回流煮沸
10
小时,
然后加硫酸锂
15g


5 ml
及溴
1
滴,
再回去流煮沸
15
分钟,所
得溶液 冷却后移置
100ml
溶量瓶中并用水稀释到刻度(贮备液)
,溶液应不显绿色。
溶液
I

20%
碳酸钠溶液。







溶液
II
:临用前上述贮备液
1
份用水三分稀释。

先喷溶液
I
,稍干再喷溶液
II


(五)皂苷灶显色剂

1

25%
磷钼酸乙醇溶液:喷后在
140
o
C
加热
5~10
分钟皂苷元均呈深兰色。

2
.三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液:喷后在
90
o
C

10
分钟(应在通风厨中进行)
,不同的
皂苷元在可见光或紫外光下显出各种颜色。

3
.硫酸:甲醇(
1

2
)溶液,喷后加热,不 同的皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色,
所显颜色与温度无关。

4
.氟 磺酸:乙酸(
1

1
)溶液,喷后
130
o
C加热
5
分钟。各种皂苷元可显天兰紫、粉红、
淡棕等色,在紫外光下也显不同萤光 。

5
.碘蒸汽:薄层置于碘蒸汽筒中,皂苷无皆显棕黄色斑点。

6
.三氯快乙酸或三氯乙酸:乙酸(
1

2
)溶液,喷后在
100
o
C
加热
20
分钟皆显黄色。

7

2%
血球生理盐水混悬液(溶血试验、检皂苷)

< br>取新鲜兔血(由心脏或静脉取血)适量,用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白,并用生
理盐水反复 离心洗涤至上清液无色后,量取沉降红血球(可以管的离心管通接读取)用
生理盐水配成
2%< br>混悬液贮冰箱内备用(贮存期
2~3
天)



六)蒽醌苷显色剂





蒽醌及其 苷本身在日光下显黄色,在紫外光下则显黄,红橙色萤光。在薄层上用氨
熏或喷氢氧化钾与碱溶液,则颜 色变深或变色。

1
.氨气

2

10%
氢氧化钾、甲醇溶液。

3

3%
氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。


4

50%
哌啶的苯溶液。

5
.饱和喷酸锂溶液。

6
.饱和硼砂溶液。

7

0.5%
乙酸镁甲醇溶液:喷后
90
o
C
5
分钟。

8

0.5%
乙酸铝溶液,喷后紫外光下看萤光。

9
0.5%
牢固兰
B
试剂,喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显 萤光的斑点此时在
可见光下显棕、紫或绿色。也可先喷本试剂,再喷稀氢氧化钠溶液而显色。也用于酚类
及能偶芳香胺的显色。

皮肤病传染-根治灰指甲


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