试管怕打针蛋白质含量测定——双缩脲试剂法-实验报告

2021年1月20日发(作者：试管移植内膜薄有成功)
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蛋白质含量测定——双缩脲试剂法

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一、实验目的

1.1.
掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；

1.2.
掌握双缩脲试剂的配制；

1.3.
熟悉血清总蛋白的临床意义；

1.4.
了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。

二、实验原理

2.1.
两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（
H2N-OC-NH-CO-NH2< br>），因分子内含有两
个邻接的肽键，在碱性溶液中可与
Cu2+
发生双缩脲反应 ，生成紫红色络合物。

2.2.
蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键
（
-CO-NH-
）< br>，
同样能在碱性条件下与
Cu2+
发生双缩脲反应，
生成的紫红色络合 物，
且在
540nm
处的吸光度与蛋白质的含量在
10
～
1 20g/L
范围内有良好的线性关系。

三、材料与方法：

3.1.
实验材料：

3.1.1.
实验试剂：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH
溶液；③双缩脲试剂
:
硫酸酮、酒
石酸钾钠、 碘化钾；④蛋白质标准液（
70g/L
）；⑤
0.9%NaCl
；⑥蒸馏水。

3.1.2.
实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管；⑥玻 璃棒

；⑥
1100
分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。