为什么来月经有血块新生儿溶血病检测卡标准操作程序(SOP)

2021年1月19日发(作者：许文益)
长春博迅生物技术有限责任公司

新生儿溶血病检测卡标准操作程序（
SOP
）

一、

准备工作

（一）微柱凝胶试剂卡的准备：
观察外观，如有干胶、杂质、气泡 不可使用，之后将卡放置室温（
18
－
25
℃）平衡，再用专用离心机离心< br>5
分钟。

(
二
)
试剂的制备：
6%
牛血清白蛋白（盐水稀释）

（三）标本采集
：采集被检对象静脉血，将该同一人血 液分别制备成红细胞标本和血清标本。

（四）红细胞标本的制备
：用红细胞稀释液配 制红细胞悬液，红细胞最终浓度为
0.8%
－
1
％。

（五 ）血清标本的制备：
将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，
10
分钟后 离心，取上
清；或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中，
4
℃放置
12小时，或
37
℃放置
2
小时后离心，
2000rpm
，
10
分钟，取上清。该上清不得有絮状物或沉淀。

（六）放散试验：
1
、
充分洗涤红细胞至少三次，取同体积洗涤后的压积血和
6%
牛血清白蛋 白混匀，
置于
56
℃孵育
10
分钟，期间不断摇动，离心
1 000rpm
，
2
－
3
分钟，取上清。即放散液。

2
、
充分洗涤红细胞至少三次，用博讯公司生产的酸性 放散试剂盒做室温放散。参见
酸性放散试剂盒使用说明书。


二、

实验步骤

1
、
取新生儿的红细胞
0.8%
－1
％悬液
50ul
分别加入卡
1
中的
1
－6
孔中。

2
、
使用专用离心机离心
5
分钟，
900rpm 2
分钟，
1500 rpm 3
分钟。

3
、
取出，判读结果。

4
、
第二卡
1< br>－
3
孔分别加入
50ul
新生儿血清，
4
－
6
孔分别加入
50ul
新生儿红细胞放散液。

5
、
将
A
型红细胞悬液
50ul
分别加入
1
号、
4< br>号；将
B
型红细胞悬液
50ul
分别加入
2
号、5
号；
将
O
型红细胞悬液
50ul
分别加入
3
号
6
号孔中。

6
、
37
℃孵育
15
分钟。

7
、
取出，使用专用离心机离心
5
分钟（
900rpm2
分钟，
1500 rpm3
分钟）
，取出，判读结果。

结果判定
阳性结果：
红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中。表明被检者血清中含有对应其抗原的抗体或血细胞被致敏。

阴性结果：
红细胞完全沉降到凝胶底部，在凝胶管底部形成红细胞 扣。表明血清中无相应抗原免
疫的抗体或血细胞没有被致敏。

反应强度：
特 异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反
应；愈靠近胶底部颗粒 愈小，反应愈弱（
2+
或
1+
）
。

三、注意事项

1
、
红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳 性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本实
验。

2
、
血清标本： 血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红
细胞沉淀，呈假阳性反 应。

3
、
如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反 应，也不排除其他原因所致
溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员多报告并讨论。
4
、
父亲红细胞标本也可用与其同型的
A
型或
B型红细胞代替。

5
．
洗出尽量多红细胞进行放散；
注意放散的 温度不可超过
56
℃，以防溶血；天冷时放散液注意保
温；尽可能多得放散液吸出；注 意出去放散液中残留的红细胞；放散前红细胞要充分洗涤，
至少三次。

6
、
每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。

7
、< br>红细胞悬液的浓度控制在
0.8%
－
1
％之间。

8
、
试剂卡应放在
18-25
℃储存，如若长期放在
4
℃冰箱 ，建议每
1-2
个月取出，用专用离心机离
心
一
次
，
以
防
止
干
胶
或
产
生
气
泡
。