怀孕多久能打掉-
第
八
章
血液常规检查检验程序
检测血液中红细胞、
白细胞和血小板数量、
白细胞分类及相关参数
(HGB< br>、
HCT
、
MCV
、
MCH
、
MCHC、
RDW
及
MPV
等
)
的变化对临床有关疾病的诊断、 观察疾病的变化及治疗效果具有重要参
考价值。现根据
ISO15189
文件―《医学 实验室质量与能力专用要求》的规定,以
SF-3000
、
ADVIA-120
和
BC-2000
血细胞分析仪为例进行介绍。
第一节
血细胞分析仪检测原理
血常规检查方法采用血细胞自动分 析仪法,参见《全国临床检验操作规程》
p7
~
11
,白
细胞分类计 数采用显微镜检查法,参见《全国临床检验操作规程》
p5
~
7
。现简要介绍 如下。
一、
电阻抗法血细胞计数
在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极,两电极间通有恒定电流,经过稀释液
(
电解质溶液
)
稀释的血样
(
血细胞
)
在通过检测器微孔时,产 生了一个电脉冲;脉冲的高低代表细胞
体积的大小,脉冲的个数代表细胞的数目。记录脉冲的数目可以得 到细胞计数的结果。
二、细胞化学和光散射法白细胞计数
将血 液经过细胞化学试剂染色,
不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。
当
这些 白细胞通过测量区时,
由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异,
激光束射到细胞上的
前向角和散射角不同,
以
X
轴为吸光率,
Y
轴为光散射,
每 个细胞产生两个信号结合定位在细
胞分布散点图上。
计算机对存储的测量信息进行分析处理,< br>得出白细胞总数和分类计数结果。
适用于
ADVIA-120
血细胞分析仪。< br>
三、多角度激光法白细胞计数
在白细胞分类通道:
全血 加入溶血剂
(FD-
Ⅰ和
FD-
Ⅱ
)
作用后,
嗜酸 性粒细胞内颗粒被染
色;其他白细胞略有皱缩。
WBC/BASO
通道:全血加入溶血 剂
(FB)
溶血。除
BASO
外,其他白细
胞均明显皱缩。
仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。
计算机对存储的测量信息进
行分析处理,得出白 细胞总数和分类计数结果。适用于
SF-3000
血细胞分析仪。
四、光电比色法测量血红蛋白
在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红 蛋白,
后者与溶血剂中有关成分
结合形成
Hb
衍生物,
进入
Hb
测试系统,
在特定波长
(
一般在
530
~
55 0nm)
下比色,
吸光度的变
化与液体中
Hb
含量成正比,
仪器便可显示其浓度。
不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方
不同,形成的
Hb衍生物亦不同,其吸收光谱各异但最大吸收均接近
540nm
。
五、光散射法红细胞和血小板计数
以二维激光散射法检测红细胞和血小板。
红细胞测试原理是:
在测试系统中,
全血与红
细胞
/
血小板稀释液混 合,使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固
定,此种处理并不影响
MC V
体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时,被激光束照射后所
得的信号是相同的。
激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞,
根据
低角度光散射转换能量大 小,
测量单个红细胞体积与总数;
根据高角度光散射得出单个红细
胞内血红蛋白浓度。
血小板与红细胞在一个系统中测量,
其原理是:
根据同质性球体光散射
的Mie
理论,当球形化的血小板单个通过激光照射区时,仪器在两个角度测定激光的散射强
度:
高角度主要测细胞的折射指数
(RI)
,
它与细胞的密度有关;
低角度主要测细胞体积的大
小。血小板的体积在
1
~
30fl
,RI
在
1.35
~
1.40
。计算机对存储的测量信息进行分析 处理,
得出红细胞和血小板计数结果。适用于
ADVIA-120
血细胞分析仪。
六、显微镜白细胞分类计数
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,
经瑞氏染料染色后,
在显微镜下根据白细胞形态
特征予以分类计数,得出相对比值(
百分率
)
,并观察细胞形态的变化。
第二节
仪器性能参数
血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。
一、
SF-3000
血细胞分析仪
1.
该仪器检测血细胞的测量范围为
WBC
:
(0.0
~
99.99)
×
10
9
/L
;
RBC
:
(0.00
~
9.99)
×
10
12
/L
、
HGB
:
1
~
300g/L
;
PLT
:
(0
~
999)
×
10
9
/L
。
2.
本仪器检测血细胞的精密度为
WBC
:±
3.0%
;
RBC
:±
1.5%
;
HGB
:±
1.5%;
PLT
:±
5.0%
。
二、
ADVIA-120
血细胞分析仪
1.
本仪器检测血细胞的测量范围为
WBC
:
(0.00
~
400)
×
10
9
/L
;
RBC
:< br> (0.00
~
6.76)
×
10
12
/L
;
HGB
:
0
~
225g/L
;
PLT
:
(0
~
3980)
×
10
9
/L
。
2.
本仪器检测血细胞的精密度为
WBC
:±
3.0%;
RBC
:±
1.5%
;
HGB
:±
1.5%
;
PLT
:±
5.0%
。
三、
BC-2000
血细胞分析仪
1.
本仪器检测血细胞的测量范围为
WBC
:
(0.0
~
99.99)
×
10
9
/L
;
RBC
:
(0.00
~
9.99)
×
10
12
/L
;
HGB
:
0
~
300g/L
;
PLT
:
(0
~
999)
×
10
9
/L
。
2.
本仪器检测血细胞的精密度为
WBC
:±
3.0%
;
RBC
:±
2.0%
;
HGB
:±
2.0%;
PLT
:±
5%
。
第三节
血常规检验程序主要内容
一、标本
1.
临床护士抽取患者抗凝静脉血
2ml
。
2.
采血后立即送到临床检验科。
3.
血量不够
1ml< br>或血液凝固、溶血或严重脂血标本不能进行检测。
二、设备和试剂
1.
设备
SF-3000
、
ADVIA-120
、
MEK-6108K
和
BC-2000
血细胞 分析仪。
2.
试剂
(
1
)稀释液、溶血剂和清洗液。
(
2
)
CBC
试剂、
DIFF
试剂、消泡剂和鞘液冲洗液。
(
3
)瑞氏染液及缓冲液。
3.
购买的试剂应放室温保存,注意防尘、防潮。
4.
开封后的试剂应尽快用完,变质、超过有效期的试剂不能使用。
三、容器及试剂添加剂
血液标本采集的容器是一次性含
EDTA-K
2
抗凝剂的真空采血管;血液标本必需添加剂是
EDTA-K
2
抗凝剂。< br>
四、校准步骤
血
细
胞
分
析< br>仪
的
操
作
过
程
分
别
见
SF -3000
血
细
胞
分
析
仪
标
准
操
作
程
序
(PLA
301-LJK-ZY-YQ-07)
、
ADVIA-120
血
细
胞
分析
仪
标准
操
作
程
序
(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)
和
B C-2000
血细胞分析仪标准操作程序
(PLA301-LJK-ZY- YQ-09)
中
6
仪器校准程序。
五、操作步骤
1.
申请单及标本编号
整理血液常规检 验申请单及血液标本,
审核合格后,
对检验申请
单和血液标本进行编号。
2.
上
机
测
试
操
作
过
程
分
别
见
SF-3000
血
细
胞
分
析
仪
标
准
操
作
程
序
(PLA 301-LJK-ZY-YQ-07)
、
ADVIA-120
血细胞分析仪标准操作程 序
(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)
、
BC-2000
血细胞分 析仪标准操作程序
(PLA301-LJK-ZY-YQ-09)
和
MEK6108- K
血细胞分析仪标准
操作程序标准操作程序
(PLA301-LJK-ZY- YQ-06)
。
3.
检验结果的输入
(
1
)打开电脑,启动“检验程序”,输入用户名及口令后,进入检验程序。
(
2
)单击“检验”菜单,选择“检验结果录入
修改”,进行检验结 果的录入及修改。
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