镰刀型细胞贫血症基因的检测方法

2021年3月1日发(作者：类风湿怎么办)
湖北当阳一中

沈满弟

限制性内切酶分析法是利用限制性
内切酶和特异性
DNA
探针来检测是否存在基因变异。

当待
测
DNA
序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的
改变，其特异的限制性酶切片

段的状态在电泳迁移率上也
会随之改变，借此可作出分析诊断。

如：（
2005
湖北
3
）
镰刀型细胞贫血症的病因是血红 蛋白基因的碱基序列发生
了改变。

检测这种碱基序列改变必须使用的酶是

A.
解旋酶


连接酶

C.
限制性内切酶


聚合酶

解析：根据
碱基互补配对原则可采用
DNA
分子杂交原理或
DNA
探针
的方法。
采用加热等

一定的技术手段将患者的
DNA
分子片
段与正常人的
DNA
分子片段单链放在一起，
互补的碱基

序
列就会结合在一起，形成杂 合双链区；碱基序列改变的部位
则仍然是两条游离的单链。
解

旋酶的作用是
DNA
分子在复
制或转录时将
DNA
双链解开，在本题中加热也可以解开达
到目的，

所以不是必须的酶；
DNA
连接酶和限制性内切酶
都是基因工程的工具酶，一种限制性内切酶

只能识别一种
特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割
DNA
分子的基
本骨架上脱氧核糖和

磷酸之间的磷酸二酯键，
DNA
连接酶
的作用和它正好相反，
是将限制酶切开的缺口缝合起来。

而
RNA
聚合酶则是在基因转录过程中促进核糖核苷酸形成
mRNA
分子的酶，本题就是采用限

制性内切酶分析法解题
的。
必须使用的 酶就是限制性内切酶，
故选
C
。

根据

DNA
分
子杂交原理知，将患者的

DNA
分子片段与正常人的

DNA
分子片段单链放在

一起，互补的碱基序列就会结合在一起，
形成杂合双链区；碱基序列改变的部位则仍然是两

条游离
的单链，有无双链便是区 别，为什么又要用限制性内切酶将
其切开再杂交呢？回答这

个问题我们先看看。

2008
天津
30-
Ⅰ下图为人
β
-
珠蛋白基因与其
mRNA
杂交的示意图，
①
-
⑦表示基因的不

同功能区。

从本题看出基因的单链的编
码区与其转录的成熟的
mRNA
之间可以杂交形成杂合链，
但

是它们两者之间不仅不是完全互补，相反有两 个内含子
对应的单链部分
——
③⑤所含有的上

百个核苷酸，
mRNA
根本没有对应互补的部分，这就说明它们之间相差很大也能
够杂交，只

不过 结果有突起部分而已，那镰刀型细胞贫血
症基因和正常基因只有一个碱基发生突变，难

道用正常基
因转录的
mRNA
就不能与只突变一个碱基的基因杂交形成
杂合链吗？应该是肯定

可以
,
如果这样来检测，那镰刀型细
胞贫血症基因和正常基因的检测结果是相同的，就找不

到
区别，无法鉴别。

所以必须采用限制性内切酶分析法来检
测才有效，具体是先找到一种限制性内切酶，切

开控制镰
刀型细胞贫血症基因的对应部位的正常基因，这样就形成两
短段，也同同一种 酶来

切镰刀型细胞贫血症基因，因为镰
刀型细胞贫血症基因发生了一个碱基的突变， 这样相同的

限制性内切酶就无法切开，就还是完整的一长段，在用以上