微生物实验中的接种分离和培养操作步骤

2021年2月27日发(作者：量体温要多长时间)
。

微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤





















































微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤


一、目的要求

1
、掌握各种分离、接种方法。

2
、掌握无菌操作基本环节。

二、实验说明

微生物在自 然界中呈混杂状态存在，要获得所需菌种，必需从中把它们分
离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需 予以分纯。微生物分离和纯化
的方法很多，
但基本原理却是相似的，
即将待分离的样品 进行一定的稀释，
并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存在，然后使其长成一个个
纯种 单菌落。然而上述工作又离不开接种，即将一种微生物移到另一灭过
菌的培养基上的过程。

三、实验材料

1
、恒温培养箱。

2
、接种环、玻璃棒、吸管、酒精灯。

3
、培养基（上次实验配制的）
。

4
、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌。

四、方法步骤

-
可编辑修改
-
。

（一）接种的操作

1
、斜面接种（接金黄葡萄球菌）

（
1
）操作前，先用
75%
酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
< br>（
2
）将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间，使斜面和有菌种
的一面 向上，并处于水平位置。

（
3
）先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。

（
4
）左手拿接种环（如握钢笔一样）
，以火焰上先将环端烧红灭菌，然后
将有 可能伸入试管其余部位也过火灭菌。

（
5
）用右手的无名指、小指和手掌将 菌种管和待接斜面试管的棉花塞或
试管帽同时拔出，然后让试管口缓缓过火灭菌（切勿烧过烫）
。

（
6
）将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的
培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管
内抽出接种环。

（
7
）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向
上作“
Z
”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条
线来作斜面接 种，以便观察菌种的生长特点。
。

（
7
）迅速将沾有菌种的接种环 伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向
上作“
Z
”形来回密集划线。有时也可用接种 针仅在培养基的中央拉一条
线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。

（
8
）接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。

（
9
）将接种环烧红灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。

2
、液体接种

-
可编辑修改
-
。
< br>（
1
）由斜面培养基接入液体培养基，此法用于观察细菌的生长特性和生
化反应 的测定，操作方法与前相同，但使试管口向上斜，以免培养液流出
接入菌体后，使接种环和管内壁磨擦几 下以利洗下环上菌体。接种后塞好
棉塞将试管在手掌中轻轻敲打，使菌体充分分散。

（
2
）由液体培养基接种液体培养基，菌种是液体时，接处除用接种环外
尚用无菌吸管 或滴管。接





















































种时只需在火焰旁拔出棉塞
,
将管口通过 火焰
,
用
无菌吸管吸取菌液注入培养液内
,
摇匀即可。

3
、平板接种

将菌在平板上划线和涂布。

（
1
）划线接种

见分离划线法。

（
2
）涂布接种

用无菌吸管吸取菌液注入平板后，用灭菌的玻棒在平板表
面作均匀涂布。

4
、穿刺接种

把菌种接种到固体深层培养基中，此法用于嫌气性细菌接种或 为鉴定细菌
时观察生理性能用。

（
1
）操作方法与上述相同，但所用的接种针应挺直。

（
2
）将接种针自培养基中心刺入，直刺到接近管底，但勿穿透，然后尚
原穿刺途径慢慢拔出。< br>
-
可编辑修改
-