心-
国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库
精液的保存与运输
精液保存的目的是为了延长精子的存活时间,便于运输。扩大精液的使用范
围,增加受配母畜头 数。
现行的精液保存方式有三种,常温
(15
~25℃)保存、低温
(0
~5℃)保存和冷
冻
(-196
~
-
79℃)保存。
(一)常温保存
常温保存的温度在
15
~25℃,温度允许有一定变动,所以又称为变温保存
或室温保存。
常温保存所需的设备简单 ,
便于普及推广,
特别适合猪的精液保存
(
表
5
—
4)
。
1
.原理
利用一定范围的 酸性环境抑制精子的活动,
以减少其能量消耗,
使精子保持
在可逆的静止状态而不丧失 受精能力。
一般将
pH
调整到
6.35
左右,
为使稀释液< br>的
pH
达到所需范围,通常采取三种方法。
(1)
向稀释液中充入二氧化碳,如伊利尼变温稀释液
(IVT)
。
(2)
利用精子本身在代谢中产酸,
自行调节
pH
,
如康奈尔大学 稀释液
(CUE)
。
(3)
向稀释液中加入有机酸,如乙酸稀释液
(CME)
。
2
.常温保存的稀释液
常温保存的稀释液除能降低
pH
,使精子代谢减慢外,还能给精子补充足够
的养分,
同时加入抗菌物质抑制细菌生长和繁殖。
另外,
还在稀释液中加人缓冲
物质,加入明胶以阻碍精子运动(表
4-5)
。
。
牛精液冷冻保存已十分普及,常温保存方式多不采用。马、绵羊 精液常温
保存效果较好。如果采用明胶稀释液,在
10
~
14
℃下呈 凝固状态保存,绵羊精
液可保存
48h
以上,马的精液可保存
120h
以上,精子活力接近
0.5
(表
4-6
)
。
猪 的精液常温保存效果好。在精液稀释后,按一个输精量分装到特定的瓶
(
管
)
中,封口,贴好标签后放入
17
冰箱内保存。
1
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表
4
一
5
猪精液常温保存稀释液
葡萄糖、
葡萄
成
分
葡
-
柠檬酸
蔗糖、
葡萄糖、
英国变
糖、
柠
-
葡萄
氨基乙酸
钠、
奶粉
柠檬酸
温稀释
碳酸氢
乙
-
糖液
卵黄液
乙二胺
液
钠液
液
钠、卵
卵黄
四乙酸
黄液
液
液
基础液:
二
水
柠
檬
酸
钠
(g)
—
O.5
—
—
5.O
—
—
—
—
—
100
—
—
—
5.0
—
3.0
—
—
—
100
O.3
—
—
5.0
—
—
O.1
—
—
100
—
—
—
—
6.O
—
—
5.0
—
100
2.0
—
O.18
碳酸氢钠
(g)
—
氯化钾
(g)
葡萄糖
(g)
蔗糖
(g)
—
6.0
—
0.21
O.21
0.05
0.04
O.3
—
—
—
—
0.3
100
—
—
4.29
5.1
—
—
—
—
氨基乙酸
(g)
—
乙
二
胺
四
乙
—
酸
(g)
奶粉
(g)
—
—
—
O.16
—
—
—
—
氨苯磺胺
(g)
100
蒸馏水
(m1)
稀释液:
基础液:
100
卵黄
(
容量%
)
—
lO
%安钠咖
(
容
—
量%
)
100
100
100
—
—
70
30
—
1 000
1 000
95
5.0
—
96
—
4.0
100
—
—
80
20
—
97
3.O
—
1 000
1 000
青霉素
(IU/m1)
1 000
1 000
链霉素
(
?
g/m1)
1 000
1 000
1 000
1 000
500
1 000
1 000
1 000
1 000
500
2
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注: 通人
C02
使
pH
达到
6
.
35
。
表
4
—
6
马、绵羊精液常温保存稀释液
成
分
绵
羊
马
RH
明胶
明胶、羊奶
明胶、
蔗糖
葡
液
基础液:
液
萄
马
奶
糖、甘油卵
液
黄液
—
7
7
一
—
一
—
—
100
97
2.5
0.5
l 000
—
—
—
—
—
—
—
100
—
99.2
—
0.8
1 000
二
水
柠
檬
酸
钠
3
(g)
蔗糖
(g)
葡萄糖
(g)
—
一
—
—
—
8
—
—
0.15
—
—
—
—
10
100
7
—
磺胺甲基嘧啶钠
0.1
(g)
10
后莫氨磺酰
(g)
—
明胶
(g)
羊奶
(ml)
马奶
(ml)
蒸馏水
(ml)
稀释液:
—
100
100
—
—
—
—
100
100
90
—
—
5
5
基础液
(
容量%
)
—
甘油
(
容量%
)
1 000
1 000
1 000
卵黄
(ml)
1 000
1 000
1 000
1 000
1 000
青霉素
(IU
/
ml)
双氢链霉素
(
μ
g
/
m1)
3
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(二)低温保存
低温保存是将稀释后的精液置于
0
℃~5℃的环境 中保存。各种家畜的精液
都可进行低温保存,绵羊精液低温保存在
1d
左右,马的精液 不过几天。马、绵
羊由于精液本身特性季节配种的影响以及这方面研究工作不足等原因,
采用低 温
保存效果尚不理想。
由于猪精液常温保存的效果更好,
故一般都不采用低温保存。< br>
1
.原理
低温保存主要是向稀释液中添加抗 冷物质,
防止精子发生冷休克,
通过缓慢
降低温度,使精子的代谢活动减慢,当温度降 至
0℃~5℃时,精子几乎处于休
眠状态,
物质代谢和能量消耗均降到较低水平,废物累积减少,
且此温度下不利
微生物的繁殖,
可达到保存目的。
当温度 回升后,
精子又逐渐恢复正常代谢机能
并不丧失受精能力。
2
.低温保存的稀释液
低温保存常在马、绵羊的精液保存中应用,稀释 液配方如表
5
—
5
。
表
5
—
5
马、绵羊精液低温保存的稀释液
绵
羊
马
成分
葡萄糖、
柠檬酸钠、
奶粉、
葡萄糖、
柠檬酸
奶粉、
马奶、
氨基乙酸
葡萄糖、
酒石酸钾
钠、
卵黄液
卵黄液
液
卵黄液
钠、
卵黄液
卵黄液
2.8
O.8
—
—
—
—
100
2.7
—
0.36
—
—
—
100
—
—
—
—
—
10
100
—
7
—
—
—
10
100
—
5.76
—
0.67
—
—
100
—
—
—
—
100
—
—
4
基础液:
二
水
柠
檬
酸
钠
(g)
葡萄糖
(g)
氨基乙酸
(g)
酒石酸钾钠
(g)
马奶
(m1)
奶粉
(g)
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蒸馏水
稀
释
液
:
(
容
量%
)
基础液:
卵
黄
(
容
量%
)
80
20.O
100
—
1 000
1 000
90
10.0
1 000
1 000
92.O
8.0
1 000
1 000
95.O
5.O
1 000
1 000
95.O
5.0
1 000
1 000
青
霉
素
(IU
1 000
/
ml)
链
霉
素
(
?
g
/
m1)
3
.方法
1 000
应采取逐步降温的方法,并使用含有卵黄的稀释液,以防冷休克发生。
首先将稀释后 的精液按照一个输精量
(
羊
10
~
20
个输精量
)
分装到试管中,
封口,再包以数层脱脂棉或纱布,最外层用塑料袋扎好,防止水分渗入。把包装
好的精液放到
0℃~5℃的低温环境中,经
1
~
2
h精液即降至
0℃~5℃。在保存
过程中,
要维持温度的恒定,
防止升温。
在特殊情况下或运输,
可用广口保温瓶,
在保温瓶中加入占容积
80
%的冰块,把包装好的精液放到冰块上,盖好。注意
定期添加冰源,
如无冰源,
可采用 化学制冷法,
在冷水中加入一定量的氯化铵或
尿素,可使水温达到
2
~4℃。
(三)精液冷冻保存
精液冷冻保存是利用液氮
(-
196℃)作冷源,
将精液处理后冷冻起来,
达到长
期保存的目的。精液冷冻保存是人工授精技术的重大进步,
使输精不受时间、
地
域和种畜生命的限 制,从而加快了家畜品种的育成和改良速度。
5
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