犬精液常温保存的 11年文

2021年2月18日发(作者：抗体滴度)
《现代畜牧兽医》
2011.11..

1

犬精液常温保存的

稀释液配方筛选试验研究


潘寿文，刘

湖，马大君，丁晓麟，颜泽清

﹙公安部南京警犬研究所，江苏

南京
210012
﹚


摘

要


犬精液常温保存技术是实现犬人工 授精的重要环节，对大力推广犬人工授精具有重要意义。
本试验参考国内外相关报道，
选择了< br>4
种常温保存稀释液配方进行对比试验，通过对精子有效存活时间、
总
存活时间 、存活指数等项目测定，分析它们对公犬精液品质的影响。筛选出
C
号、
D
号 稀释液配方，
14-18
℃
恒温下精子
O
、
5
级保 存时间分别达
105
．
O
±
17
．
0h
和
114
．
0
±
12
．
0h
、
总存 活时间为
132
．
O
±
14
．
0h
和l50
．
0
±
16
．
0h
、生存指数为
71
、
2
±
l0
．
4h
和
74
、
6
±
l4
．
0h
，极显著优于对照组
(P．
01)
。结果表明，
C
号、
D
号稀释液均为适宜犬 精液常温保存理想的稀释液配方。

关键词


犬
;
精液
;
稀释液
;
配方


Canine semen preserved at ambient temperature
Dilution formula screening test research

PAN Shou
—
wen, LIU Hu, MA Da
—
jun, DING Xiao
—
lin, YAN Ze
—
qing
(Ministry
of
Public
Security
Nanjing
Police
Dog
Research
Institute
，
Nanjing
210012
，
China)

Abstract:

Canine
semen
of
normal
temperature
preservation
technology
is
the
important
link
of dogs with artificial insemination, to vigorously promote the artificial insemination has
important significance in dogs. This test refers to the domestic and foreign relevant reports,
selected 4 kinds of room temperature preservation of dilution formula comparison test, sperm
survival time, based on effective overall survival, survival index project determination,
analysis of their male semen quality influence. Screening out C, D dilution formula, 14-18
℃

constant temperature preservation of sperm 0.5 time respectively reached 105.O
±
17.0h, and
114.0
±
12.0h.
total
survival
time
for
132.O
±
14.0h,
and
l50.0
±
16.0h, live
index
for
the
71.2
±
l0
．
4h, and 74.6
±
l4
．
0h
，
significantly better than the control group ( P < O.01 ).
The results show that, C, D diluted solution for suitability of canine semen preserved at room
temperature desired dilution formula.
Key words:

Dog; Semen Diluted solution Formula


犬精液的稀释是犬进行人工授精的一个重要技术环节。
只 有经过稀释的精液才适于保
存、运输及输精
。在犬的人工授精技术中，犬精液常温保存又具有更 大的实际运用价值。
为了寻找一种使用方便、
效果较好的犬精液常温保存方法，
人们对 影响精液保存效果的诸多
----------------------------------- ----------------
作者简介：潘寿文
(1957
一
)，男，江苏人，副研究员，研究方向：警犬新品种选育研究。

[1]

1
《现代畜牧兽医》
2011.11..

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因素进行了广泛而深入的研究。
本试验通过比较不同稀释液对犬精液保存的效果，
以筛选犬精液常温保存最佳的稀释液配方。


1
材料与方法

1
．
1
试验材料

1
．
1
．
1
采精公犬的选择

选择公安部 南京警犬研究所繁育研究室的拉布拉多种公犬作为供试犬。供试犬必
须健康、性欲强、性情温顺，年龄在
2.5-4.5
岁之间。

在确定为精液提供犬前，采集
2-3次精液，每次精液精子活率均达
0.8
以上，精子
密度为中等以上，
pH
值为
6.0
～
7.0
之间，精液气味、色泽正常的犬为合格。

1
．
1
．
2
采精方法

手握法采精。

采精器械经过灭菌消毒备用。采精前首先用温生理盐水清洗公犬的阴茎 部，并用
热毛巾擦干。
采精时手戴上乳胶手套。
左手拿住小烧杯调整以合适的姿势准备 收集精液。
用
右手拇指和食指半握拳住阴茎包皮稍用力轻缓地上推止锁结后，
露出阴茎 。
即将锁结球握在
手掌内并给予适当有节奏的压力．
锁结头球迅速变硬，
阴茎 也会充分勃起。
数秒钟后即开始
射精。


1
．
1
．
3
精液处理

采精后，立即对精液进行常规检查。

记录其所采精液的精液量、活力、密度、、pH
值、气味、色泽、畸形率、顶体完好率
等。

精子活力采用五级评分法。

1
．
2
稀释液的筛选与配制

1
．
2
．
1
稀释液的筛选

参考国内外相关报道
方。具体配方见表
1
。


表
l
犬精液稀释液配方
(
未包括添加的抗生素
)
[2] [3] [4]
，试验选择了
5
种稀释液配方。分别为
A< br>、
B
、
C
、
D
、
E
配
成< br>
分

果糖
/g
葡萄糖
/g
蔗糖
/g
棉籽糖
/g
Tris/ g
柠檬酸钠
/g
磷酸二氢钠
/g
磷酸二氢钾
/g
乙酸钠

鲜卵黄
/
体积比

纯化水
/mL


配

方

A






2
0.2

3
100
B
2.0



2.4
1.36



20
100
C

3.0



1.45


0.25
20
100
D


17


1



25
100
E



4.20

1.80



20.0
100
2
《现代畜牧兽医》
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3

1
．
2
．
2
稀释液的配制

按配方要求准 确称量各成分药品放在消毒过的干燥量杯内，用蒸馏水稀释至
100ml
；

对溶解后的溶液用滤纸过滤，然后将其密封，采用高压蒸汽灭菌后将溶液冷却备
用；

使用前将新鲜鸡蛋洗净后用
75
％酒精消毒，待酒精挥发后破壳。用注射器刺破卵黄膜吸取卵黄，流入量杯，用消毒后的
4
层纱布过滤后，按比例加入消毒冷却后的上述溶剂
中；

将配好含有卵黄的溶液搅拌混匀、测定其
pH
值后，密封保存备用；

使用时按比例加入抗生素：
使用时按比例加入抗生素：
林肯霉素
200
?g ／
ml
，
庆大霉素
100
?g
／
ml
。< br>
1
．
3
精液的稀释及保存

1
．
3
．
1
稀释比例

稀释比例
l
：
2
1
．
3
．
2
试验方法

把试验分为
5
组，采精液分成
5
等份，分别按试验方案作
5
种稀释处理；
稀释后分装于灭菌的试管内，置于
18-20
?
C
的恒温箱内 保存，每隔
4 h
检测
1
次，记
录各类数据。

按计划时间检测各项指标，直至全部精子死亡为止。

1
．
4
数据处理

采用生物统计方法中的方差分析法。


2
结果与分析

2
．
1
不同稀释液对犬精子活力的影响

不同稀释液对犬精子活力及保存时间的影响，结果见 表
2
。由表
2
可见，精子
0.5
级存活
时间、生存 指数值均以
D
号稀释液配方效果最好，

分别达到
114
．
0
±
12.2
、
74
、
6
±
l4
．
0
。
与
A
、
B
号配方比较差异显著(P<0
．
O1)
；与
C
、
E
组配方效果比 较无明显差异
(p>O
．
05)
。各
配方之间精子
0.5< br>级的存活时间、生存指数的较详见表
2
。


表
2
不同稀释液稀释精液的保存效果
h
稀释液

精子
0.5
级

成活时间

生成指数

A
40.5
±
10.5
42.4
±
4.0

B
55.0
±
2.0
47.9
±
9.1
C
D
E
105
．
O
±
17
．
0
114
．
0
±
12.2
93.5
±
11.5
71
、
2
±
l0
．
4
74
、
6
±
l4
．
0


70.3
±
7.9



2.2

不同稀释液对犬精子总成活时间的影响

由表
3
可知，
犬的 精子在稀释液中液态
18-20
?
C
的恒温保存的情况下，
精子成活 时间随着
时间的增加而减少，总成活时间以
D
号稀释液配方最长，达到
l50
．
0
±
16
．
0
。与
A
、
B
号配方
比较差异显著
(P<0
．
O1)
；与
C
、
E
组配方比较无明显差异
(p>O
．
05)
。 说明犬精液的输精应
尽早进行，
防止由于时间过长而造成精子活力下降，
导致母犬的受 孕率或产仔数减少。
不同
稀释液对犬精子总成活时间的影响详见表
3
。

表
3
不同稀释液稀释精液的精子总成活时间
h
稀释液


A
B
C
D
E
3