生殖系统感染-
人工授精操作标准文件
人工授精
一、采精
(一)采精前的准备
1
、采精室准备
提前打开空调保证 温度在
25~30
℃,打开紫外线保证有效浓
度消毒。清洗卫生干燥干净。注意紫外线 有杀精作用,注意精液防护。
2
、采精用具及稀释液准备
一次性 采精袋和专用滤纸套在采精杯上,将采精
杯、
玻棒、
载玻片预热至
37
℃。
将盛有稀释剂的食品袋放入
37
℃水浴锅进行预
热。
3
、
采精员准备
将双手用洁净水清洗干净,
再用
37
℃的
0.7%
盐水冲洗干净。
采精过程中,避免身上带有较浓的刺激气味 。
4
、公猪准备
将待采精公猪赶至采精栏,戴一次性手套,用< br>0.1
%
KMnO
4
溶液
清洗其腹部及包皮,注意
0 .1
%
KMnO
4
有刺激性以免刺激公猪阴茎,再用清水清
洗,冬季 用温水清洗,洗后用干毛巾擦干,挤出包皮积尿,按摩公猪的包皮部。
如果包皮被毛过长,
在采 精之前先剪去公猪包皮上的被毛,
防止干扰采精及细菌
污染。
5
、
注意事项
采精用具均在
37
℃预热,
经常修剪包皮外的阴毛,
冬季公猪外
阴用
37
℃温水清洗搽净。
(二)采精操作
1
、操作步骤
将公猪赶至采 精室,让公猪亲近、嗅闻假母猪台,增强其性欲。用发情母猪
的尿或阴道分泌物涂在假台畜上,
同时模仿母猪叫声,
也可以用其他公猪的尿或
口水涂在假母猪上,诱发公猪爬跨。
< br>上述方法都不奏效时,可赶来一头发情母猪,让公猪空爬几次,在公猪很兴
奋时赶走发情母猪。此 时采精员应注意自己的安全。
待公猪爬上假台猪后,用温暖清洁的手
(< br>可将手套脱掉
)
握紧伸出的龟头,
顺公猪前冲时将阴茎的“
S
”状弯曲拉直,握紧阴茎螺旋部的第一和第二摺,在
公猪前冲时允许阴茎自然伸展,
不必强拉。
充分伸展后,阴茎将停止推进,
达到
强直、
“锁定”状态,开始射精。射精过 程中不要松手,否则压力减轻将导致射
精中断。
第一时段的胶体、
清亮精液 不收集,
第二时段为不透明、
乳白色精液,
此时,
开始收集浓份精液,
直至公猪射精完毕时才放手,
注意在收集精液过程中防止包
皮部液体等进入采精杯。
注意在收集精液过程中防止包皮部液体或其他如雨水等
进入采精杯。
采精完后,先将 精液杯上的过滤纸去掉,盖住采精瓶,通过化验室的窗口交
给化验员立即进行精液处理。将公猪赶回原栏 。
采精完毕立即登记《公猪采精登记表》。
下班之前彻底清洗采精栏。
2
、注意事项
不要强行拉出阴茎,以免拉伤。
压力是公猪采精成功的关键。
注意在采精过程中不要碰阴茎体,否则阴茎将迅速缩回。
采精时,保持相对稳定和安静。
调教成功的公猪需要连续采精
3
次 ,每天一次,以巩固其记忆,形成条件反
射。
调教时,不能让两头或以上公猪同时在一起,以免引起公猪打架等。
采精栏必须设有安全角。
采精频率:成年公猪每周二次,青年公猪每周一次
(1
岁左右
)
。
二、精液品质检查
(一)精液稀释实验室的准备
确保化验室干燥干净,一尘不染,温度适宜(
22~24
℃)
,空气新鲜,相对湿
度
70%
。
每次操作完 ,
化验室要清理干净,
并开启紫外线灯密闭消毒
1~2
小时,
打开门 窗,通风换气。
(二)精液外观检查
1
、颜色检查
< br>正常精液颜色是乳白色或浅灰色,若精液红色(混有血液)、
黄绿色(有脓或炎症)、褐色(被污 染)等均为不正常。
2
、气味检查
正常精液略带特殊微腥味,若有其它气味均为不正常精液。
3
、射精量
正常射精量为
150
~
500ml< br>,成年公猪的射精量应不低于
200ml
。
精液量的多少因品种、
品系 、
年龄、
采精间隔、
气候和饲养管理水平等不同而不
同。
(三)精液密度检查
指每毫升精液中所含的精子总数,
单位为亿
/ ml
。
正常公猪的精子密度为
2.0
~
3.0
亿/毫升,有 的高达
5.0
亿个精子
/
毫升。检查精液密度的方法有以下几种:
1
、目测法:在
16*10
低倍显微镜下观察。密:精子运动时,精子之间间 距
小于
1
个精子(
3
亿
/ml
)
;中:精 子之间间距等于
1
个精子(
2
亿
/ml
)
;低:精
子之间间距大于等于
2
个精子(
1
亿
/ml
)。
2
、白血球计数器计数法:将原精稀释
20
倍,将精液缓慢 沿计数器板与盖玻
片边缘空隙,让精液缓慢渗入计数室内。用以下公式计算:精子总数
/ml= 5
个中
方格的精子数
*10
6
,此方法虽然准确,但是费时费工。< br>
3
、分光光度计:只需将一滴精液加入分光光度计中,就可以很快得到所需
的 原精液精子密度和精子总数。此方法采用较多,且相对准确。
(四)精液活力检查
1
、精子活力:指原精液精子的运动能力,用镜检视野中呈直线运动的精子
数占精子总 数的百分比来表示。
2
、精液密度评级:目前国内常用
10
级表示 。取
1
滴原精液于干净的载玻片
上,
用盖玻片盖上,
使充满精液且无 气泡,
分别记录其活动的情况,
分别记录各
级活动精子占总精子数的百分率:
100%
的精子都是直线运动的为
1.0
级;
80%
的
精子 都是直线运动的为
0.8
级,依次类推。此外,也可以使用精子活力检测仪进
行精子活 力的检测和评级。活力超过
0.7
才能使用。
3
、精子活力与授精 能力关系密切,与母猪繁殖呈正相关。精子活力是精液
检查的主要指标。
(五)精子形态检查
1
、在载玻片上取稀释
1
倍的精液与
10%
福尔马林各
1
滴混合均匀,盖上盖
玻片在
40*16
倍显微镜下观察精子形态。
2
、畸形精子的检查方法:正常精子形似蝌蚪, 凡精子形态为卷尾、双尾、
折尾、无尾、大头、双头、精子丛、原生质均为畸形精子。畸形精子比率超过
18%
的不能使用。
它们一般不能作直线运动,
受精能力差,
但不影 响精子的密度。
(六)公猪精液检查原则
1
、精液检查完需立即 填写精液质量记录,包括活力、密度、畸形率、稀释
份数、储存期精液活力。
2
、所有的后备公猪必须在精液品质检查合格后方可投入使用。
3
、精检不合格的公猪绝对不可以使用。
4
、首次精检不合格的公猪,
7
天后复检。
5
、 复检不合格的公猪,
10
天后采精,作废,再隔
4
天后采精检查。
6
、仍不合格者,
10
天后再采精,作废,再隔
4
天后作第四次检查
。
7
、经过连续五周四次精检,一直 不合格的公猪建议作淘汰处理,若中途检
查合格,视精液品质状况酌情使用。
三、精液的稀释、分装、保存与运输
(一)稀释液的准备
1
、精液稀释液具备条件
具有缓冲能力,具有能量,有与精液相似的渗透压 ,适宜于精子的
pH
值,
抑制细菌生长,长效稀释液有抑制精子活动的性能,保证其保 存效果。
2
、精液稀释液的配置
在专用稀释剂杯中倒入
1000ml
双蒸水,
加入稀释粉
(如:
韩国东晋
“
HAM ORNY
”
牌)
50g
(一袋)。将稀释剂杯放在磁力搅拌器上搅拌
1h
。
如有杂质需要用滤纸过滤。采精时,稀释液放在水浴锅内进行预热备使用。< br>水浴锅的温度以不得超过
42
℃,最好是
37
℃
(二)精液稀释
1
、根据外观及化验室检查,确定原精液密度(亿
/ml
),确保每份稀释精液
中含有效精子
40
亿。
2
、精液稀释的计算
精液稀释倍数
=
每份稀释精液中含有效精子数
(
40
亿
/
份)
< br>原精液精子密度(亿
/ml
)
*
原精液精子活力(
%
)
*
被稀释精液量(
ml
)
稀释精液总量(
ml
)
=
每份稀释精液剂量(
80-100ml
)
*
精 液稀释倍数
加入稀释液剂量(
ml
)
=
稀释精液总量(< br>ml
)
-
采集原精液剂量(
ml
)
3、
调整稀释剂温度,
使与原精温度相差不超过
1
℃,
过冷过热都 会造成精液
品质的下降。
4
、稀释时将稀释液缓缓沿玻棒引流到精液中,不 能将稀释液直接倒入精液
中,避免引起精子死亡。
5
、先将精液以
1
:
1
比例稀释,然后重复检查密度和活力,
5
分钟后,再稀
释
2
倍,重复检查密度和活力,
5
分钟后,将稀释液全部混入精液中。每稀 释完
一次,都要缓慢地将采精袋的精液与稀释液充分混匀。
6
、
稀释精液时,严禁说话。
(三)精液的分装
1
、包装要求
(
1
)精液包装一般固定在
80m l/
份,
100ml/
份,以便输精使用。
(
2
)
包装前检查输精瓶和输精袋的质量和消毒情况,
不合格的瓶一律弃用。
(
3
)包装后要将输精瓶或输精袋内的空气挤净,减少空气对精液的影响,
同时可以防止 精液运输时震荡,损伤精子。
2
、包装方法
手工包装。用温度计 或玻棒缓慢将精液引入输精瓶中。包装好的精液在
输精瓶上贴好标签,要对每头公猪精液进行对应编码、 品种、采精日期、时
间等加以区分。
(四)精液的保存
1
、保存前的处理
稀释精液的温度从
33~35
℃缓慢降 到
17
℃(约
1-2
小时),或用
4
层毛巾包
裹, 直接放在
17
℃的恒温冰箱中。
2
、保存温度为
17℃,每隔
12
小时就将精液缓慢摇匀一次,防止精液沉淀。
3
、保存注意,瓶装或袋装精液平放在恒温箱中,以免精液和稀释液分层。
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