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吴玉琴血清总胆固醇测定操作规程

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-02-12 22:18

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2021年2月12日发(作者:包皮手术后勃起怎么办)
血清总胆固醇测定操作规程

A1

2
原理
< br>血清中的胆固醇酯
(CE)
被胆固醇酯水解酶
(CEH)
水解成游离胆 固醇
(Chol)

后者被胆固醇氧化酶
(CHOD)
氧化成△4
—胆甾烯酮,并产生过氧化氢,再经过氧
化物酶
(POD)
催化
4
—氨基安替比林与酚
(
三者合称
PAP)

生成红色醌 亚胺色素
(T
rinder
反应
)
。醌亚胺的最大吸收在
5 00nm
左右,吸光度与标本中总胆固醇呈正
比。反应式如下:

胆固醇酯
+H2O CEH
胆固醇
+
游离脂肪酸

胆固醇
+02 CHOD

4-
胆甾烯酮十
H202
2H202+4
-氨基安替比林
+

POD
昆亚胺
+4H2O
A1

3
标本采集与处理

对于血脂分析,特别需要强调“分析前”各个环节的质量管理。

A1

3

1
受检者
(
体检对象或病人
)
的准备:除总胆固醇不一定用空腹血外,
测定甘油三酯、
脂蛋白与载脂蛋白 的病人必须空腹
12h

不饮酒
24h
后采集血样。
对于体 检对象抽血前应有
2
周时间保持平时的饮食习惯,
近期内体重稳定,
无急性病、外伤、手术等意外情况。妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或终止哺
乳后
3个月检验才能反映其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物,
如降
血脂药、 避孕药、噻嗪类利尿剂、
β
受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降
糖药、
胰岛素及其他激素制剂等,
检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天
或数周,
否则 应记录用药情况。
对体检对象及做前瞻性观察者,
还应注意采血的
季节,
因为 血脂水平有季节性变动,
为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱
体检对象在抽血前
24h
内不作剧烈运动。

A1

3

2
静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响
水分在血管内外的分布,
因此影响血脂水平。
例如站立
5 min
可使血脂浓度提高
5
%,
15 min
提高
16%,故在采血前至少应
***5min
。一般从肘静脉取血,使用
止血带的时间不 超过
1 min
,穿刺成功后立即松开止血带。静脉阻滞
5min
可使
甘油三酯增高
10
%~
15
%。

A1. 3

3
抗凝剂:我国多用血清作血脂检验。如用血浆,多主张用
EDTAN a
2(1mg

mL)
抗凝。抗凝血浆中的总胆固醇和甘油三酯水平比血清中 约低
3
%,
ED
TA
用量越多,血浆水平偏低越明显。但肝素抗凝不 影响血浆中水平。

A1

3

4
标本处理:血 标本应尽快送实验室。室温下放置
30min

45min

离心分 离血清或血浆,
置洁净试管加盖保存。
在室温中放置不超过
3 h

4C
保存
可稳定
4
天。置
-70'C
可长期保存,但不可反 复冻融。

A1

4
试剂

A1

4. 1
酶试剂:本科使用
XX
公司
XX
产品号试剂盒,为干粉试剂。临用
前用水复溶即可使用。
每瓶干粉用水
XX ml
复溶。
复溶后试剂内各主要成分如下:

磷酸盐缓冲液
pH7.7 0

4mol/L
假单胞菌胆固醇酯水解酶


800 U/L
奴卡氏菌胆固醇氧化酶


400U/L
辣根过氧化物酶


1000U/L
胆酸钠
3mmol/L
4
—氨基安替比林
0.5mmol/L

3.5mmol/L
聚氧乙烯表面活性剂
3g/L

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