探究盐水对菠萝中菠萝蛋白酶活性的影响

2021年2月7日发(作者：金匮肾气丸价格)

探究盐水对菠萝中菠萝蛋白酶活性的影响


















































一．实验目的

1.
了解并解释食用菠萝前用食盐水浸泡的原理

2.
掌握从菠萝中提取菠萝蛋白酶的方法

3.
掌握测量菠萝蛋白酶活性的方法

二．实验原理

菠萝蛋白酶是一种具有消炎，抗水肿作用的疏基酶，能分解蛋白质、酯和酞胺。

菠萝 蛋白酶一般从菠萝汁或菠萝废皮中提取，为浅黄色无定形粉末，分子量
33000
，微有异臭，微溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿，乙醚，等电点
9.55
。

本实验先从新鲜的菠萝汁中使用有机酸
（单宁）
沉淀法提取出菠萝蛋白酶，
然后通过考 马斯
亮蓝法测定酶制品中菠萝蛋白酶的总量，
最后菠萝蛋白酶将酪蛋白水解产生酪氨酸，
通过在
275nm
波长下测定吸光度的变化，可以测得菠萝蛋白酶的活力。

三．实验器材与试剂

1
、实验材料



新鲜菠萝
(
自备
)
、
0.1mg/ml
牛血清蛋白

2
、实验试剂

柠檬酸钠




维生素
单宁





溶液

氯化钠溶液





酪蛋白溶液





氢氧化钠溶液

磷酸缓冲液（溶解磷酸二 氢钾，加氢氧化钾调
PH
至
7.0
）

激活剂（
P H7.0
，
0.05mol/L
磷酸缓冲液，内含
15mmol/L
硫代硫酸钠和
6mmol/LEDTA-2Na,
现配现用）

研钵；

离心机；

紫外可见分光光度计（
1cm
石英比色皿）
；

恒温水浴锅（
37
℃）
；

试管、试管架；

烧杯、容量瓶；

移液管；

四．实验步骤

（一）预处理菠萝


取新鲜菠萝按下表处理










1
编号

菠萝

1mol/ L NaCl

0.5mol/L NaCl
0.1mol/L NaCl
蒸馏水







100g





100ml












2




100g





100ml








3





100g







100ml






4




100g







100ml
30min
30min
30min
30min
处理时间










（二）从菠萝中提取菠萝蛋白酶


1.
将处理过后的菠萝切成小块，和适量柠檬酸钠一起放入研钵研成匀浆。

2
． 过滤后
2000r/min
，离心
7min
。取上清液