金黄色葡萄球菌生物危害评估报告

2021年2月6日发(作者：碧凯药业)
金黄色葡萄球菌生物危害评估报告

一、金黄色葡萄球菌的传播与致病



金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都 可找到。
因而，
食品受其污染的机会很多。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题 ，
在美国由金
黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的
33%，
加拿大则更多，
占
45%
，
我国每年发生的此类中毒事件也非 常多。



金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于 春夏季；中毒食品种类多，
如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中 毒事件也有报
道；上呼吸道感染患者鼻腔带菌率
83%
，所以人畜化脓性感染部位常成 为污染源。



一般说，
金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品 ：
食品加工人员、
炊事员或销售人员带菌，
造成食品污染；
食品在加工前本身 带菌，
或在加工过程中受到了污染，
产生了肠毒素，
引起
食物中毒；
熟食制品包装不严，
运输过程受到污染；
奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，
对肉 体其他部位的污染。



而肠毒素形成条件包括：存放温度，在
3 7
℃内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通
风不良氧分压低易形成肠毒素；
食物 种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食
物，肠毒素易生成。



金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、< br>伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。



葡萄 球菌性菌血症可发生于任何与血管内导管或其他异物有关的局限性葡萄球菌脓肿或感
染
,
它是严重烧伤病人死亡的常见原因。持续性发热常见
,
而且可伴有休克。



葡萄球菌性心内膜炎特别好发于静脉注射给药者和装有人工心脏瓣膜的病人。
突然出 现心脏
杂音
,
脓毒性栓子和其他经典体征便可作出可疑诊断
,
确诊需 依据超声心动图和血培养。



葡萄球菌性骨髓炎主要见于儿童
,
可引起寒战
,
发热和受累骨疼痛
,
继之出现红肿。
关节周围 感
染常引起关节积液
,
提示为化脓性关节炎而不是骨髓炎。白细胞计数常＞
1 5000/
μ
l
并且血培
养常阳性。
X
线变化在
1 0~14
日内不明显
,
骨质疏松和骨皮质反应甚至更长时间仍不能测出
,而放射性核素骨扫描则常能较早出现异常。



现在葡萄球菌性小肠结 肠炎很罕见
,
但若住院病人出现发热
,
肠梗阻
,
腹痛和腹胀
,
低血压或腹
泻
,
特别是新近作过腹部手术或接受过抗生素者
,
可提示本病。若粪便镜检发现大片的嗜中性
白细胞和革兰氏阳性球菌
,
则 可能作出诊断
,
但必须排除产毒性艰难梭状芽胞杆菌感染
,
这是
抗生 素相关性结肠炎最常见的原因。



金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决 于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.
溶血毒素：外毒素，
分
α
、
β
、
γ
、
δ
四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血 和坏死；
b.
杀白细
胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；
c.
血浆 凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶
使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，
阻碍吞噬细胞的吞噬作用。
葡萄球菌形
成的感染易局部化与此酶有关；
d.
脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶
能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球 菌；
e.
肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种
引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为
A
、
B
、
C
、
D
、
E
及
F
五种血清型。肠毒素可耐受
100
°
C
煮沸
30
分钟而不被破坏。
它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外，
金黄色葡萄< br>球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。







二、金黄色葡萄球菌的生物学特性


< br>典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径
0.8
μ
m
左右，显微镜下呈单个 、成双以及排列成葡萄
串状。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属，无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染 色阳性衰
老、
死亡和被白细胞吞噬后的菌体革兰染色呈阴性。
金黄色葡萄球菌营养要求 不高，
在普通
培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度
35~37
℃、最适生长
pH7.4~7.6
。



金黄色葡萄球菌 有高度的耐盐性，可在
10-15%NaCl
肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、
乳 糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，
VP
反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水
解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。



金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力 ，
对磺胺类药物敏感性低，
但对青霉素、
红霉素等高度敏
感。



三、金黄色葡萄球菌的检测与诊断



1.
标本采集

采自不同感染部位的各种标本，包括血液、脑脊液、穿刺液； 痰液、脓液、创
伤分泌物、尿液、粪便和呕吐物等。



2.
直接涂片镜检

直接涂片检查在正常情况下呈无菌状态的体液标本如血液 、脑脊液、穿刺
液等，若有检出革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜，直径
0. 5-1
μ
m
的球
菌。即具有重要的临床价值。



3.
分离培养

可以选用普通营养琼脂平板、血平板和高盐甘露醇平板，血平 板用葡萄糖肉汤
增菌培养基。该菌在普通肉汤中呈均匀迅速混浊生长；若接种于琼脂平板上
35
℃过夜后可
形成直径约
2~3mm
的厚菌落、湿润有光泽、呈金黄色不透明圆 形凸起。若接种于血平板，
菌落周围可形成明显的透明的
β
—溶血环。
在高甘 露醇平板上金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色
菌落，以此可与其他凝固酶阴性的葡萄球菌相鉴别。



4.
鉴别实验



（
1< br>）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的，与其致病力有关的一种侵
袭性酶，< br>其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。
血浆
凝固酶 分为结合型和游离型。
前者结合在细菌的细胞壁上，
能直接作用于血浆中的纤维蛋白
原 ，
使之转化为纤维蛋白，
环绕菌体而形成凝块。
而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌 到
菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但可以激活血浆凝血酶原，
使之转化成凝血酶，
后者
再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两
种。



玻片法
:
将待试菌落乳化于玻片上的盐水中，< br>经
10~20S
证实无自凝后，
用接种环取人或兔血
浆一环，与乳化菌 液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。



试管法
:
吸取
0.5mL
兔血浆与
0.5mL
金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤
24
小时培养物充分混匀，
置
37
℃培养，每隔半小时观察一次，连 续观察
6
小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置
时，内容物不流动，判为阳性。


（
2
）耐热核酸酶试验：将
24
小时肉 汤培养物沸水浴处理
15min
，用接种环划线刺种于甲苯
胺兰
-DNA平板，
35
℃培养
24
小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验 金黄色葡
萄球菌为阳性。



（
3
）甘露醇发酵实验

金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。



（
4
）
Staphaurex
胶乳凝集实验

是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、
简便的商品化直接凝集< br>试验。其基本原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和
IgG
抗体的聚苯乙烯胶乳，然后 用
接种环挑取待鉴定菌株的新鲜培养物加入混匀，若出现凝集块现象即为阳性。



5.
生化鉴定

如上述，注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别 要点：
PYR
（吡咯烷酮
-
β
-
萘基酰胺试验阴性；
VP
试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。



6.
免疫学方法

用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。



7.
分子生物学方法

包括
PFGE
脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。



四、金黄色葡萄球菌的防治及生物安全防护



一、细菌的防治



金黄色葡萄球菌的控制主要包括：


1
）
防止金黄色葡萄球菌污染食品，
防止带菌人群对各种食物的污 染：
定期对生产加工人员
进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）
、 上呼吸道感染（如鼻窦炎、化
脓性肺炎、
口腔疾病等）
的人员要暂时停止其工作或调换 岗位。
防止金黄色葡萄球菌对奶及
其制品的污染：
如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，< br>不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；
奶挤出
后，要迅速冷至
-10
℃以下 ，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意
低温保存。
对肉制品加工厂，患 局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他
适当方式处理后进行加工生产。



2
）
防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成

应在 低温和通风良好的条件下贮藏食物，
以防肠毒素
形成；
在气温高的春夏季，
食 物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过
6
小时，
并且食用前要彻
底加热。