胡若兰肿瘤相关抗原CA125测定操作规程

2021年2月2日发(作者：爱情观测试)

杭州余杭邦尔医院检验科















































免疫室项目
SOP
文件

文
件
编
号
：
编制人：刘凤婷

YHBE< br>-
JYK
-
MYS
-
012
标准操作规程

审核人：钟剑

生效日期：
2018
年
1
月
1
日


版本号
/
修订号：
1/4

发布部门：检验科

肿瘤相关抗原
CA125
测定

批准人：张延亮

页码数：
46
-
49
页


肿瘤相关抗原
CA125
测定操作规程

1
检验申请


单独检验项目申请：肿瘤相关抗原
CA125< br>测定；组合项目申请：肿瘤标志物
检查。临床医生根据需要提出检验申请。

2
标本采集与处理

2.1

标本采集

2.1.1

常规静脉采血约
2ml
，不抗凝，置普通试管中。或 采用含分离胶的真空
采血管。也可采集血浆标本，用肝或
EDTA
抗凝。

2.1.2

检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3

急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4

标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收
并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5

下列标本为不合格标本

2.1.5.1

标本量不足：少于0.3ml
的全血标本，或少于
0.1ml
的血清或血浆。

2.1.5.2

对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3

无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4

其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2

标本保存

2.2.1

接收标本后在
60min
内将标本离心分离出血浆
,
避免溶血。离 心必须达
到
4000rpm
×
15min
，离心后的血清中不能含有 颗粒物或微量纤维蛋白。

2.2.2

标本保存时间：室温（
1 5
～
25
℃）下可稳定
8h
，普通冰箱中（
2
～< br>8
℃）
稳定
2d
，在
-20
℃最多可保存
4
周。避免反复冻融。

2.2.3

已完成测试的标本保持完整的 识别号，置
4
～
8
℃冰箱内保存
7d
。

2.3

标本采集的注意事项

2.3.1

采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。

3
方法原理
肿瘤相关抗原
CA125
测定采用双位点加心化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：


第一 步：将标本与包被着
CA125
抗体的超顺磁性磁珠和第二种
CA125
抗体
-
碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，
经过孵化，
样本内
CA125
与固定在磁珠上的
CA125
抗体结合，第二种的
CA125
抗体< br>-
碱性磷酸酶标记物与样本中
CA125
抗原
上的另一位点结合，产生双抗体夹心抗原复合物。
在反应管内孵化完成后，
结合
在磁珠上的复合物在磁 场内被吸住，洗去未结合的物质。


第二步：将化学发光物添加到反应管内，发光 底物（
AMPPD
）被碱性磷酸酶所
分解，
脱去一个磷酸基，
生成一 个不稳定的中间产物，
该中间产物通过分子内电
子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，
处 于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发
态返回基态时，
产生化学发光，
再通过光电倍 增管对反应中所产生的光子数进行
测量。所产生光子数与样本内的
CA125
浓度成正 比。

4
试剂及其他用品

4.1

试剂：
CA125
测定试剂包，
由深圳迈瑞公司出品。
未打开的试剂包保存于
2
～

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杭州余杭邦尔医院检验科















































免疫室项目
SOP
文件

文
件
编
号
：
编制人：刘凤婷

YHBE< br>-
JYK
-
MYS
-
012
标准操作规程

审核人：钟剑

生效日期：
2018
年
1
月
1
日


版本号
/
修订号：
1/4

发布部门：检验科

肿瘤相关抗原
CA125
测定

批准人：张延亮

页码数：
46
-
49
页

8
℃避光保存
18
个月。开启的试剂包载入系统中可使用
28d。

4.2

试剂盒组分

4.2.1

试剂
1
（
Ra
）组分

包被着抗
4.2.1

试剂
1
（
Ra
）组分

包被着抗
CA12 5
抗体（小鼠单抗，
IgG
）的超顺磁性微粒，悬浮于缓冲液，
含防腐剂。< br>

原料及含量：包被着抗
CA125
抗体（小鼠单抗，
Ig G
）的超顺磁性微粒，
0.3g/L;Tris
缓冲液，
50mmol/L, Proclin300,0.5g/L
；叠氮钠
,<1g/L
。

4.2.2

试剂
2
（
Rb
）


组分：抗
CA125
抗体（小鼠单抗，
IgG
）
-
碱性磷酸酶标记物稀释于缓冲
液，含防腐剂。

原料及含量：抗
CA125< br>抗体（小鼠单抗，
IgG
）
-
碱性磷酸酶标记物，
31g/L
；
磷酸缓冲液，
10mmol/l
；
Proclin300,0.5 g/L
；叠氮钠
,<1g/L
。

抗体（小鼠单抗
C192
，
IgG
）的超顺磁性微粒，悬浮于缓冲液，含防腐剂。


原料及含量：包被着抗糖类抗原
CA19-9
抗体（小鼠单抗
C192
，< br>IgG
）的超顺
磁性微粒，
>0.1g/L
；
Tris
缓冲液，
50mmol/L,Proclin300,0.5g/l,
叠氮钠
,<1 g/L
。

4.2.3
试剂包即开即用，临用时轻柔颠倒混匀数次，无须特殊准备。

4.3

其他试剂与用品

4.3.1

发光剂：用发光剂底物液。

4.3.2

清洗缓冲液等。

5
校准品与校准模式

5.1

校准品
:
采用
CA125
专用配套校 准液。校准品需在
2
～
8
℃贮存。

5.2
< br>校准类型和校准点数目：
非线性模式，
6
个校准点。
仪器根据校准曲线 卡片
数据
(6
参数对数拟合曲线
)
自动建立校准曲线。

5.3

校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔
28 d
后需要
重新校准。每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；
③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。

5.4

校准液重建方法：
冻干校准液，
用
1mL
蒸馏水复溶，
复溶后的校准液于
2< br>～
8
℃
保存最长不超过
5
周，或于
-20
℃ 最长保存
10
周。避免反复冻融。

6
质控品与室内质控规则

6.1

质控品采用
CA125
。

6.2

质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。

6.3

质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。

6.4

质控规则：采用
L-J
质控图，以±
3
s
为失控限。标准差由本室实验数据得
出。

6.5

如 出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时
纠正，并在确认重新回复到控制状 态后开始标本检测。


7
适用仪器

深圳迈瑞
CL-1200i
自动发光免疫分析仪。


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