东铁营医院实验三 观察DNA和RNA在细胞中的分布

2021年2月2日发(作者：肝炎的早期症状)
观察
DNA
和
RNA
在细胞中的分布

学习指导



核酸存在于所有生物的细胞中，
它是生 物体内与生物的生长、
发育、
遗
传、变异有关的一类十分重要的化合物。核酸包括脱氧 核糖核酸（简称
DNA
）和
核糖核酸（简称
RNA
）。
< br>在真核细胞内，
DNA
主要分布在细胞核中，占细胞中
DNA
总量的< br>98%
以上。
DNA
呈双螺旋长链状态，与蛋白质结合，这个复合物称为染色质 。在线粒体、叶
绿体内也含有少量的环状
DNA
。

RNA
主要存在于细胞质中，约占细胞中
RNA
总量的
90%
。细胞内的
R NA
主要
有三种。其中分子量最小的是转移
RNA
（
tRNA
）。
tRNA
的主要功能是在蛋白质合
成中起携带活化的氨基酸的作用。另一种为核 糖体
RNA
（
rRNA
）。
rRNA
与蛋白质
结合 而构成核糖体。
核糖体是合成蛋白质的细胞器。
第三种是信使
RNA
（
mRNA
）
。
mRNA
携带着遗传信息，在蛋白质合成中起着决定氨基酸顺 序的模板作用。

实验报告

【实验目的】

1
．
尝试使用吡罗红、
甲基绿混合染色剂显示细胞中
DNA
和
RNA分布的方法。


2
．说出
DNA
主要分布在细胞核中 ，
RNA
主要分布在细胞质中。

【实验原理】

甲基绿和 吡罗红两种染色剂对
DNA
和
RNA
的亲和力不同，
甲基绿使
DNA
呈现
绿色，
吡罗红使
RNA
呈现红色。
利用甲基绿 和吡罗红混合染色剂将细胞染色，
可
以显示
DNA
和
RNA
在细胞中的分布。
盐酸能够改变细胞膜的通透性，
加速染色剂
进入细胞，同时使染色体 中的
DNA
与蛋白质分离，有利于
DNA
和染色剂结合。

【材料器具】

1
．材料：人的口腔上皮细胞，洋葱表皮细胞。
< br>2
．用具：大小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片，铁架台，
石棉网，火 柴，酒精灯，吸水纸，显微镜。


3
．试剂及配制方法：

(1
）试剂

质量分数为
0
．
9%
的NaCl
溶液，质量分数为
8%
的盐酸，乙酸钠，
乙酸，
蒸馏水 ，
吡罗红甲基绿混装粉。
如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装
粉，可以分别购买甲 基绿和吡罗红
G
，然后按
A
液的第二种方法配制。


（
2
）染色剂的配制


①染色剂
A
液的两种配制方法


第一种方法：取吡罗红甲基绿粉
1 g
，加入到
100 mL
蒸馏水中溶解，然后
用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。


第二种方法：取甲基绿
2 g
溶于
98 mL
蒸馏水中，取吡罗红
G 5 g
溶于
95
mL
蒸馏水中。取
6 mL
甲基绿溶液和
2 mL
吡罗红溶液加入到
16 mL
蒸馏水中，
即为
A
液，放入棕色瓶中备用。


②染色剂
B
液的配制方法
B
液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。< br>先取乙酸钠
16
．
4 g
，用蒸馏水溶解至
1 000 mL
备用；再取乙酸
12 mL
，用蒸馏
水稀释至
1 000 mL
备用。取配好的乙酸钠溶液
30 mL
和稀释的乙酸
20 mL
，加
蒸馏水
50 mL
，配成
pH
为
4
．
8
的
B
液（缓冲液）。


③染色剂的配制染 色剂是由
A
液、
B
液混合配制而成的。取
A
液
20 mL
和
B
液
80
mL
混合，就是实验中所用的吡罗红甲基 绿染色剂。应该注意的是该试剂应
现用现配。

【实验过程】

1.
取口腔上皮细胞

（
1
）在洁净的载玻片上，滴一滴质 量分数为
0.9%
的
NaCl
溶液。

（
2
）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有
碎屑的一端，
放在载玻 片的液滴中涂抹几下。
取人的口腔上皮细胞时，
用牙签的
钝头稍稍用力刮取，
既可避免划伤黏膜，
又可刮取到形态完整、
自然脱落之前的
细胞

（
3
）
点燃酒精灯，
将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
烘干时要注意 观察，
当涂片将要干时即可。

2.
水解

（
1
）在小烧杯中加入
30
mL
质量分数为
8%
的盐酸，将烘干的载玻片放入小
烧杯中。往小烧杯中倒入盐酸时，动作要轻要慢，防止盐酸溅在 皮肤上。

（
2
）在大烧杯中加入
30
℃温水。

（
3
）将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温
5 min
。（如下图所
示）


3.
冲洗涂片
用滴管吸取蒸馏水，
让蒸馏水从倾斜的载玻片上缓缓流过涂层，
反复冲两三
次
，约
10
秒左右。

4.
染色

（
1
）用吸水纸吸去载玻片上的水分。

（
2
）将吡罗红甲基绿染色剂滴
2
滴在载玻片上，染色
5 min
。