上海甲状腺专科医院生物实验总结 实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理

2021年2月2日发(作者：肾亏的表现)
生物实验总结

实验一

观察
DNA
和
RNA
在细胞中的分布

实验原理：
DNA
绿色，
RNA
红色

分布： 真核
生物
DNA
主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的
DNA
；
RNA
主要分布在细胞质中。

实
验结果
:
细胞核呈绿色
,
细胞质呈红色
.

二

物质鉴定

还原糖

+
斐林试剂

砖红色沉淀

脂

肪

+
苏丹
III
橘黄色

脂

肪

+
苏丹
IV
红色

蛋白质

+
双缩脲试剂

紫色反应

1
、
还原糖的检测

（
1
）
材料的选取：
还原糖含量高，
白色或近于白色，
如苹果，
梨，
白萝卜。

（
2
）试剂：斐林试剂（甲液：
0.1g/mL
的
NaOH
溶液，乙液：
0.05g/mL
的
CuSO4
溶液）
，现配
现用。

（
3
）步骤：取样液
2mL
于试管中→
加入刚配的斐林试剂
1mL
（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀
后再加 入）
→
水浴加热
2min
左右
→
观察颜色变化
（白 色
→
浅蓝色
→
砖红色）

★模拟尿糖的检测

1
、
取样：
正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2
、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3
、 结果：
（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正 常人的
尿液。

4
、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂 发生反应产生砖红色沉淀，而正常人
尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

2
、脂肪的检测

（
1
）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如
花生的子叶。

（
2
）步骤：

制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央

↓
染色（滴 苏
丹Ⅲ染液
2
～
3
滴切片上
→2
～
3mi n
后吸去染液
→
滴体积分数
50%
的酒精洗去浮色
→
吸去多余的酒精）

↓
制
作装片（滴
1
～
2< br>滴清水于材料切片上
→
盖上盖玻片）

↓
镜检鉴定（显微镜 对光
→
低倍镜观察
→
高倍镜观
察染成橘黄色的脂肪颗粒）

3
、蛋白质的检测

（
1
）试剂：双缩脲试剂（
A
液：
0.1g/mL
的
NaOH
溶液，
B
液：0.01g/mL
的
CuSO4
溶液）

（
2
）步骤：试管中加样液
2mL→
加双缩脲试剂
A
液
1mL
， 摇匀
→
加双缩
尿试剂
B
液
4
滴，摇匀
→< br>观察颜色变化
(
紫色
)
考点提示：

（
1
）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

葡
萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

（
2 )
还原性糖植物组织取材条
件？

含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（
3)
研磨中为何要
加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？
加石英砂是为了使研磨更充分。
不加石英砂会使组织样液中还原
性糖减少，使鉴定时溶液颜 色变化不明显。

（
4
）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何 要
现混现用？

混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。

（
5)
还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色
变化的顺序为？

浅蓝色

棕色

砖红色

（
6
）花生种子切片为何要薄？

只有很薄的切片，才能透光，而用
于显微镜的观察。

（
7
）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因
一般是什么？

切片的厚薄不均匀。

（
8
）脂肪鉴定中乙醇作用？

洗去浮色。

（
9
）双缩脲试剂
A
、
B< br>两
液是否混合后用？先加
A
液的目的怎样通过对比看颜色变化？
不能混合；先加
A
液的目的是使溶液呈碱
性；先留出一些大豆组织样液做对比。< br>

实验三

观察叶绿体和细胞质流动

1
、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片

2
、
原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色
,
球形或椭球形。

用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝
绿色
,
细胞质接近无色。< br>
知识概要：

取材

制片

低倍观察

高倍观察

考点提示：

（
1 )
为什么可直接取用藓
类的小叶，
而不能直接取用菠菜叶？

因为藓类的小叶很薄，
只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构
成。

（
2
）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？

表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶
肉细胞含较多的叶绿体。

（
3)
怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？

进行光照、
提高水温、
切伤部分叶片；
25
℃左右。

（
4
）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？

叶
脉附近的细胞。

（
5
）若视野中某细胞中细胞质的流动 方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际
流动方向是怎样的？

仍为顺时针。

（
6
）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少 数植物的细胞质才
流动？

否，活细胞的细胞质都是流动的。

（< br>7
）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮
度应如何调节？

视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。

（
8
）在强光照射下，叶
绿体的向光面有何变化？叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。


四

观察有丝分裂

1
、材料：洋葱根尖（葱，蒜）

2
、步骤：
（一）洋葱根尖的培养

（二）装片的制作
< br>制
作流程：解离
→
漂洗
→
染色
→
制片

1.
解离
:
药液
:
质量分数为
15%< br>的盐酸
,
体积分数为
95%
的酒精
(1 : 1
混
合液
).
时间
:
3~5min .
目的
:
使组织中的细胞相互分离开来
.
2.
漂洗
:
用清水漂洗约
3min.
目的
:
洗去药液
,
防止解离过度
,
并有利于染色
. 3.
染色
:
用质量浓度为
0.01g / mL
或
0.02g / mL
的龙胆紫溶液
(
或醋酸洋红液
)
染色
3~ 5min
目的
:
使染色体着色
,
利于观察
. 4.
制片
:
将根尖放在载玻片上
,
加一滴清水
,
并用 镊子把根尖弄
碎
,
盖上盖玻片
,
在盖玻片上再加一片载玻片
.
然后用拇指轻轻地按压载玻片
.
目的
:
使细胞分散开来
,
有利于
观察
.
（三）
观察

1
、
先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，
排列紧密
,
有的细胞正在分裂。

2
、
换高倍镜下观察：
分裂中期
→
分裂前、
后、
末期
→
分裂间期。
（
注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）
。
其中，
处于分裂间期的细胞数目最多。

考点提示：

（
1)
培养根尖时，
为何要经常换水？

增加水中的氧气，
防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。

（
2
）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？

应选用旧洋
葱，
因为新洋葱尚在休眠，
不易生根。

（
3
）
为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为何？

因
为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午
10
时到下午
2
时；因为此时细胞分裂活跃。

（
4
）解离和压片
的目的分别是什 么？压片时为何要再加一块载玻片？

解离是为了使细胞相互分离开来，
压片是为了使 细胞
相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（
5
）若所观察的组织细胞大多是
破碎而不完整的，
其原因是什么？

压片时用力过大。

（
6)
解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？

分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。

（
7)
为何要漂洗？

洗去盐酸便于染色。

（
8)
细胞中染色最
深的结构是什么？

染色最深的结构是染色质或染色体。

（
9
）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是
什么？

因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有
的细胞 处于分裂状态；
不能用高倍镜找分生区，
因为高倍镜所观察的实际范围很小，
难以发现 分生区。

（
10
）
为何要找分生区？分生区的特点是什么？用高倍 物镜找分生区吗？为什么？

染液浓度过大或染色时间过
长。

（
11
）
分生区细胞中，
什么时期的细胞最多？为什么？

间期；
因为在细胞周期中，
间期时间最长。

（
12
）
所观察的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？

不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。

（
13
）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？

不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。

（
14
）若观
察时不能看到染色体，其原因是什么？

没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染
色时间过短。


五

比较酶和
Fe3+
的催化效率

考点提示：

（
1
）为何要选新鲜的肝脏？因为在不新鲜的肝脏中， 过氧化氢
酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（
2
）该实验中所用 试管应选较粗的还是较细的？为什么？应选用较
粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响 卫生香的复燃。

（
3
）为何要选动物的肝脏组织
来做实验，其他动 植物的组织的研磨液能替代吗？因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组
织也含有少量的过 氧化氢酶，所以能够替代。

（
4
）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一 个催化催化
效果好？为什么？研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（
5
）滴入肝脏研磨液
和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？不可共 用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效
果。


六

色素的提取和分离

1
、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水 乙醇
——
提取色素

各色素
在层析液中的溶解度不同
,随层析液在滤纸上扩散速度不同
——
分离色素

2
、
步骤：

（
1
）
提取色素

研磨

（
2
）
制备滤纸条

（
3
）
画滤液细线：
均匀，
直，
细，
重复若干次

（
4
）
分离色素：
不能让滤液细线触及层析液

（
5
）
观察和记录
:
结果滤纸条上从上到下依次为
:
橙黄色
(
胡萝卜素
)
、
黄色
(
叶黄素
)
、
蓝绿色
(
叶绿素
a)
、
黄绿色
(
叶
绿素
b).
考点提示：

（
1
） 对叶片的要求？为何要去掉叶柄和粗的时脉？绿色、最好是深绿色。因为叶柄
和叶脉中所含色素很少。< br>
（
2
）二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？

为了使研磨充分。不加
二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。

（
3
）丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？

溶解
色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。

（
4
）碳酸钙的作用？不
加碳酸钙对实验有何影响？

保护 色素，
防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。
不加碳酸钙，滤液会变成
黄绿色或褐色 。

（
5
）研磨为何要迅速？要充分？过滤时为何用布不用滤纸？

研磨迅速，是为了防止丙酮
大量挥发；
只有充分研磨，
才能使大量色素溶解到 丙酮中来。
色素不能通过滤纸，
但能通过尼龙布。

（
6
）
滤纸条为何要剪去两角？

防止两侧层析液扩散过快。

（
7
）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？

因为钢笔水
或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。

（
8
）

滤液细线为何要直？为何要重画几次？

防
止色素带的重叠；增加色素量，使色素带的颜色更深一些。

（
9
）

滤液细线为何不能触到层析液？

防止
色素溶解到层析液中。

（
10
）滤纸条上色素为何会分离？

由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因