仁济医院试管孙蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验报告

2021年2月2日发(作者：试管鲜胚7b和9b质量怎么样)




生物化学实验报告





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学

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生物化学与分子生物学实验教学中心

实验名称

实验日期


合作者

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蛋白质含量测定——双缩脲试剂法

实验地点

指导老师

教师签名




批改日期


一、实验目的

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掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；

.
掌握双缩脲试剂的配制；

.
熟悉血清总蛋白的临床意义；

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了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。

二、实验原理

.
两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（
H2N-OC-NH-CO-NH2
），因分子内含有两个
邻接的肽键，在碱性溶液中可与
Cu2+
发生双缩脲反应，生成 紫红色络合物。

.
蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（
-CO-NH-< br>），同样能在碱性条件下与
Cu2+
发生双缩脲反应，
生成的紫红色络合物，< br>且在
540nm
处的吸光度与蛋白质的含量在
10
～
120g /L
范围内有良好的线性关系。


三、材料与方法：

.
实验材料：

3.1.1.
实验试剂：
①小牛血清；②
LNaOH
溶液；
③双缩脲试剂
:
硫酸酮、
酒石酸钾 钠、
碘化钾；④蛋白质标准液（
70g/L
）；⑤
%NaCl
；⑥蒸 馏水。

3.1.2.
实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管 ；⑥玻璃棒

；⑥
1100
分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。