盆腔积液的治疗方法-花都区人民医院
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医学论文连接酶链反应(
LCR
)与聚合酶链反应(PCR
)检测解脲支原体的比较
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连接酶链反应(
LCR
)与聚合酶链反应(
PCR
)检测解脲支原体的比较
【摘要】
目的:
LCR
与
PCR
在检测解脲支原体
(
UU
)
泌尿生殖感染中的临床意义与差 别,
方法:用
LCR
法与
PCR
法对
232
份临床 病历进行检测
UU
,其中
201
份来源于男性尿道拭
子和女性宫颈拭 子,对两种检测方法的检测结果进行了分析。结果:
LCR
检测法检测
232
份标本,
UU
阳性率为
29%
(
69/232
)
,
PCR
法检测
232
份标本,阳性率为
23%
(
5 5/232
)
。
LCR
与
PCR
检测有明显差异(
P
〈
0.05
〉
,结论:
LCR
用于临床男性尿 道拭子和女性宫颈
拭子在诊断泌尿生殖感染中有极其重要意义。
【关键词】
支原体,解尿;基因,扩增;连接酶链反应;聚合酶链反应
解脲支原体(
UU
)是人类的一种重要病原微生物,是感染泌尿 生殖道,口腔,直肠和眼结
膜表面的专性细胞内寄生物。
UU
既可导致性传播疾病,又 可引起女性盆腔炎,肾盂肾炎等
疾病,对女性不孕不育及通过血液感染新生儿也有必然的联系。目前UU
的检测有金标法,
酶联免疫法
,培养法等。随着科技的发展,PCR
法用基因扩增法进行检测
UU
,是扩增产
物经核酸探针特异检测技 术。
LCR
法是依赖靶核酸序列的寡核苷酸探针的连接技术。 我们对临床
232
例标本用
PCR
和
LCR
进行
UU
的检测,在此对检测结果进行一些比较分析。
1
材料和方法
1.1
标本来源
全 部标本来源于本院
2010
年
12
月
—
2011
年
3
月泌尿生殖门诊
232
例患者,
有不同程度的泌尿生殖感染症状, 临床怀疑为
UU
感染。
1.2
试剂及仪器
PCR
法试剂采用上海万达生物工程有限公司的
PCR
液相杂交试剂盒。
LCR
法试剂采用的是美国
Abbot
公司提供的
UU
诊断试剂盒。
PCR
与
LCR
的扩增仪均为
A bboot
LCx Thermal Cycler ,
测定仪为
Abboot LCx@R Analyzer .
2
方法
2.1
标本采集
按照常规方法采集男性尿道和女性宫颈拭子放 置于含
1.5
毫升标本保存液的
试剂管中立即送检,
2.2 LCR
检测
严格按照美国
Abbot
公司提供的
UU
诊断试剂盒说明进行操作,扩增条件:
温度
90
度,加热
300
秒进行循环。循环参数:变性:
97
度,
30
秒
。退火
55
度,
30
秒,
延伸
62
度60
秒,
40
次循环。
2.3
PCR
检测
严格按照上海万达生物工程有限公司的
PCR
液相杂交试剂盒的说明进行操
作,扩增条件:温度
95
度,加热
450
秒进行循环,循环参数:变性:
97
度,
60
秒
,退火
60
度,
90
秒,延伸
65
度
80
秒,< br>60
次循环
2.4
认证实验
根据扩大金标准,
LCR
阳性为阳性,
PCR
阴性,
PCR阳性时,应补充用直
接荧光抗体实验确认。
3
结果
用
LCR
检测的患者标本中,阳性标本率为
29%
。
PCR
检测的标本中阳性率为
23%
,测
定结果见表:
(X2=30.5 P
注意
部分标本同时做了直接荧光抗体实验确认
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