常用药食品·微生物学实验思考题答案

2021年1月30日发(作者：乙肝疫苗致死8人)
食
品
微
生
物
学
技
术
思
考
题
答
案

1.
如何区别高倍镜和油镜？

答：
（
1
）油镜更接近标本片（
2
）油镜与标本间的介质是香柏油（
3
）油镜刻有“
oil
”
或“
Hi
”字样，也刻有 一圈红线或黑线为标记。

2
．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作？

答 ：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节
器的错误操作会使镜头大 幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找
到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器 了。

3.
用油镜观察时应注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？

答：
（
1
）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时， 先低倍
再高倍，用完要擦掉油。
（
2
）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注 视镜头与玻片的距
离。
使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。
（
3
）
从目镜内观察，
把孔径光阑开到最大，
使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野 内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物
象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微 镜的分辨率。

4.
在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能 是目镜或物镜上的
杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上？< br>

答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。

5
．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象？


答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的
结合力，易 于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。温度过高会使
细胞收缩变形，时间过长会导 致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。

6.
为什么要培养
18-24h
的细菌菌体进行革兰氏染色？


答
:
此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄 太老，由于菌
体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。

7
．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么？

答： 具体操作步骤为（
1
）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。
（
2
）干燥、固
定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过
3-4
次，温度不宜过高。
（
3
）染色，用结晶紫进行初染< br>1min,
然后水洗。用碘液进行媒
染，用碘液覆盖染色部位
1min,
水洗。在涂有细菌的部位连续滴加
95%
乙醇，约
30s
，水
洗脱 色。用番红溶液复染
1min,
水洗。
（
4
）干燥，自然干燥或用吸 水纸吸干，也可以用电
吹风吹干。
（
5
）镜检。

关键环节是酒精脱色。

8
．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态？


答：放线 菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制
片。采用插片法可观察到放线菌 自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的
形态。

9.
在显微镜下，如何区分基内菌丝和气生菌丝？


答：一 般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、
发亮，可看到隔膜，继而断裂 成球状或杆状小体。

10.
放线菌与细菌的菌落最显着的差异是什么？


答：放线菌的菌落与细菌菌落最显着的差异是放线菌菌落干燥，不透明、表面呈致< br>密的丝绒状，上有一薄层彩色的干粉。菌落和培养基的连接紧密，难以挑取，菌落的正
反面颜色常 不一致，并常有辐射状皱褶。

11.
酵母细胞和大肠杆菌在大小、形态上有何不同？如何鉴别
?

答：
（
1
）酵母细胞大小一般为（
1-5
）
um*
（
5-30
）
um,
而大肠杆菌为（）
um*
（）
um,
酵母细胞比大肠杆菌大得多。
（
2
）酵母细胞通常呈球形、卵 圆形、腊肠形、椭圆形或
藕形等。
而大肠杆菌呈短杆或长杆状，
且大肠杆菌周身鞭毛，
能运动，
酵母细胞无鞭毛，
不能游动。
（
3
）可通过观察来 鉴别，酵母细胞在高倍镜下即可清楚，
，而大肠杆菌须在油
镜下才能清楚观察得到。
（
4
）酵母细胞没有核膜而大肠杆菌有，酵母菌的菌落一般有酒
气而大肠杆菌的菌落没有 。

12.
假丝酵母的假菌丝是怎样形成的？有没有横隔？


答：其假菌丝是各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状，在分隔处缢缩，是由酵
母不停地出芽 生殖所形成的。没有横隔。

13.
为何要用乳酸—石炭酸溶液作霉菌水浸片？


答：霉菌菌丝较粗大，细胞易细缩变形，且孢子易飞散，所以制标片时常用乳酸石
炭酸溶液，用此染 液做霉菌制片的特点是细菌不变形，具有杀菌、防腐作用。用水浸片
不易干燥，能保持较长时间，能防止 孢子四处飞散，染液具有一定的染色作用，染液的
颜色能增大反差。

14.
比较霉菌菌丝与假丝酵母菌丝的区别。



答：假丝酵母是指能形成假菌丝，不产生子囊孢子的酵母。假菌丝没有横隔，各细
胞间仅以狭小的面积相 连，呈藕节状，在分隔处缢缩。霉菌的菌丝大多有横隔，整个菌
丝的直径粗细一致，且分枝与主干的直径 一致，呈竹节状的细胞串。假菌丝与真菌丝明
显不同之处在于其两细胞有一细腰，而不像真正菌丝横隔处 两细胞宽度一致。

15
．三种霉菌在菌落基本特征有何不同？如何鉴定？


答：毛霉菌落呈绒毛状、棉花状，其菌落与培养基连接紧密，不易挑起。菌落的正< br>反面颜色、构造及边缘与中心的颜色构造常常不一致。曲霉菌落的定型为圆形，直径在
2-3cm
，边缘整齐，菌丝比毛霉短，呈致密的绒毛状。曲霉菌落的正反面颜色不一样。而
青霉菌落呈青 蓝色，表面粗糙。可根据霉菌表面的颜色、致密程度、大小进行鉴定。

16.
制备培养基的一般程序是什么？

答：一般程序是称量→配调→调节< br>PH
值→过滤分装→加塞→包扎标记→灭菌。

17.
灭菌在微生物学实验中有何重要意义？

答：
经过灭菌后，< br>才能保持无菌状态，
防止培养基被污染，
以及杂菌影响实验结果。

18.
紫外线为何有杀菌作用？经紫外线照射的部分为何会出现异常菌落？



答：因为紫外线是一种高能量的光，紫外线中的一段
C
频摧毁对人体有害的 细菌或
病毒有极大的效用。通过紫外线对细胞、病毒等微生物的照射，以破坏其生命中枢
DNA
的结构，使构成该微生物的蛋白质无法形成，使其立即死亡或丧失繁殖能力。之所以出
现异常菌 落，
是因为紫外线可以破坏菌体的
DNA
，
致使
DNA
断裂 或突变，
而
DNA
是菌体的
遗传物质，破坏后细菌不能正常分裂繁殖。

19.
实验中为什么要选用大肠杆菌、金黄色葡萄杆菌和枯草芽孢杆菌作为实验菌？

答：首先从微生物形态上分类：大肠杆菌为杆菌，而另外两种为球菌、杆菌。实验
主要为了区分 杆菌、
球菌、
芽孢的不同形态受到的影响。
其次，
这三种菌的耐受力不同，< br>研究不同的耐受力更有意义。而且大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢是非常常见的
菌种。
20.
微生物的生化反应能用于鉴定细菌，其原理是什么？

答：其原 理是由于不同的微生物具有不同的酶系，其新陈代谢类型不同，所以它们
能利用的底物和各种物质利用后 产生的代谢产物不同。同时它们利用分解同种物质的能