颐神颗粒II型糖尿病模型的建立

2021年1月30日发(作者：剃阴毛)























一、概述


糖尿病是一组由于遗传 和环境因素相互作用，胰岛素相对或绝对缺乏以及靶组织对胰岛
素敏感性降低（胰岛素抵抗）引起的碳水 化合物、脂肪及蛋白质代谢紊乱的综合征，是一种
持续高血糖为特征的、慢性、全身性代谢性疾病。起病 后若未得到有效治疗，随着病程的延
长，可出现广泛的微血管及大血管病变，出现神经、泌尿、循环等多 系统的病理改变。目前
糖尿病的分型采取的是
1999
年经世界卫生组织
(W HO)
咨询委员会认可的分型方法：（
1
）
1
型糖尿病：
胰 岛
β
细胞破坏，
通常导致胰岛素绝对缺乏。
包括自身免疫性
（急性型 、
迟发型）
及特发性。这类糖尿病患者必须用胰岛素治疗，过去又称胰岛素依赖型糖尿病。（< br>2
）
2
型
糖尿病：胰岛素抵抗为主伴胰岛素相对缺乏，或胰岛素分泌不 足为主伴有胰岛素抵抗。这类
患者一般不需用胰岛素治疗，
仅用饮食调节加用口服降糖药物即可 控制血糖，过去又称为非
胰岛素依赖型糖尿病。（
3
）其他特殊类型：由胰腺内、外原 因和其他疾病、药物引起的继
发性糖尿病；（
4
）妊娠糖尿病。我国糖尿病患者中1
型糖尿病约占糖尿病的
5.6%
。
2
型糖

尿病约占糖尿病的
93.7%
。其他类型糖尿病仅占
0.7%[1]
。


上世纪
80
年代以来，全球和我国的糖尿病患者人数显著增加，
2003
年全球糖尿病病人
超过
1.94
亿。有研究者预测到
2010
年全世界的糖尿病患者将达
22
亿
1
千万。其潜在的最< br>大增长人群在亚洲，约占总增长的
65%
以上
[2]
。中国糖尿病患病 率近年上升近
3
倍以上，
20
岁以上人群中糖尿病患者由
1980< br>年的
1.0%
上升到
1996
年的
3.2%
，患病人 数占全球糖
尿病病人的约
1/5
。研制用于糖尿病防治的药物一直是新药开发中的热点 和难点之一。由于

II
型糖尿病模型的建立

糖尿病诊断分型的病 理生理不同，
在进行药效学研究时应根据适应症的不同选择不同的药效

学试验方案。

二、相关药效学试验基本内容

1
、动物选择：选用健康成年动物，常用小鼠或大鼠，也可选用兔、犬及猴等。

2
、动物模型

（
1
）化学试剂诱发的高血糖动物模型：常 用四氧嘧啶或链脲霉素（
STZ
），二者均可选择
性的破坏胰岛
β
细 胞，诱发动物高血糖，属于胰岛素低下型高血糖动物模型。

（
2
）正常动物 ：某些有刺激胰岛素分泌的降血糖药物，对正常动物可以表现出降血糖作用，
但对于化学试剂诱发的高血 糖动物模型无明显作用。

（
3
）自发性糖尿病动物：可分为二型：低血清胰 岛素型，如
BB
大鼠，
NOD
小鼠及中国地
鼠；高血清胰岛素型，如
obese/SHR
、
SHR/N-cp
大鼠，
ob/ob
、
db/db
、
KK
小鼠等。

（
4
）肾上腺素性高血糖模型：可根据情况选用。

3
、观察指标

（
1
）血糖值测定：实验前动物禁食（自由 饮水）
3-8
小时，然后给药，给药后
1-3
小时取血
测定血清葡萄 糖值。给药一般可采用一次性或连续数日给药。

（
2
）糖耐量试验：试验时 动物先禁食取血（为零时），然后给药，
1
小时后腹腔注射葡萄
糖（
2g/k g
）或口服葡萄糖（
2.5g/kg
）。淀粉（
3-5g/kg
）或 蔗糖等双糖（
2.5g/kg
），测定
给糖后
0
、
0.5< br>、
1
、
2
小时的血糖值或计算血糖曲线下面积。

（
3
）血清胰岛素测定：用放免法，具有刺激胰岛素分泌的药物，可选用正常动物或自发性
糖尿病动物进行血清胰岛素水平的测定。

三、药效学试验注意点

1
、关于模型制备

（
1
）四氧嘧啶诱导的高血糖动物模型


模型制备 的成功与否受很多因素影响，如动物选择、给药剂量、途径等。一般大鼠对四
氧嘧啶较为敏感，
犬则不敏感，
豚鼠则抵抗。
造型剂量犬
50-70mg/kg
，
静注 ；
大鼠
40mg/kg
，
静注，给药速度宜快。相同剂量下，腹腔注射成功率 较低，而皮下注射需要增加
4-5
倍量。
禁食是影响造型结果的另一因素，如大鼠禁食
48
小时，
20mg/kg
静注可使大多模型成功。
另外需注意的是 ，
四氧嘧啶水溶液不稳定，
pH3.0
时室温稳定；
pH7.0
时要 保存在
4
度以下。
大鼠、小鼠部分动物，大约
30
天可自发性缓解至 正常；造型给药几小时内，有些动物，尤
其家兔，有低血糖反应，甚至死亡，可静注葡萄糖急救。造型时 四氧嘧啶应新鲜配制，分组
时各组动物的平均血糖值相差不宜大于
20mg/dl
，血 糖值升高不符合要求的动物应剔除。

（
2
）链脲霉素（
STZ
）诱导的高血糖动物模型


STZ
水溶液不稳定，
对小鼠的生物半衰期仅有
5min< br>左右，
需要快速静脉注射。
造型剂量
犬
50mg/kg
，静注 ，可引起糖尿病，动物死亡率较高；如
15mg/kg
，连续
3
天也可。大鼠
60-80mg/kg
，
iv
或
ip
，小鼠
100 -200mg/kg
，
iv
或
ip
。
STZ
诱导的 高血糖动物模型一般不自
发缓解。
需要注意的是，
给药时常把
STZ
溶解于
0.1mol/L
的柠檬酸缓冲液中，
临用前配制。
注射后
7 2h
血糖可稳定升高，有三多症状。血糖在
11.1mmol/L
以上可作为成功模型 选用。
造型时
STZ
应新鲜配制，
分组时各组动物的平均血糖值相差不宜大于
20mg/dl
，
血糖值升高
不符合要求的动物应剔除。

（
3
）其它高血糖动物模型


可选用狗或家兔胰腺 切除致糖尿病模型。
自发性糖尿病动物低血清胰岛素型可选用
BB
大
鼠，NOD
小鼠及中国地鼠；高血清胰岛素型可选用
ob/ob
小鼠、
db/ db
小鼠、
KK
小鼠等，