狐臭症状食品中糖的测定方法

2021年1月30日发(作者：男性支原体感染症状)
食品中糖的测定方法

对于糖的测定方法有很多，大致可分为三类

1.
物理法，（
1.
旋光法
,

2 .
折光法
,

3.
比重法
,
）

2.
物理化学法
,(1.
点位法
, 2
极普法
, 3.
光度法
, 4.
色谱法
)
3.
化学方法
,(1.
斐林氏法
. 2.
高锰酸钾法
. 3.
碘量法
. 4.
铁氰化钾法
. 5.
蒽铜比色法
. 6.
咔唑比色法
)
共计三大种，在测定其他碳水化合物时，往往是使其水解为糖再进行测定。

一
.

总糖的测定

食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为

还原性的单糖的蔗糖（水解后为
1
分子葡萄糖和
1
分子果糖），麦芽糖（水 解后为
2
分子葡萄糖）以及可能部分水解
的淀粉（水解后为
2
分子葡 萄糖）。还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基（
-CHO
）或酮基
(=C=O)
。

测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些 方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改
进法的应用范围最广。在这里我们主要给大家介绍铁氰化 钾法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。斐林氏容量法由于反应
复杂，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法准 确，但其操作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用。蒽铜比色法要求比
色时糖液浓度在一定范围内，但要 求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测
定前将淀粉，糊精去掉 ，这样就使操作复杂化，限制了其广泛应用。

（一）



铁氰化钾法

1.
原理：样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质 ，在碱性溶液中能将铁氰化钾还原，根据铁氰化钾的

浓度和检验滴定量可计算出含糖量。其反应为下：

C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4?(COOH)2 + 6K4［
Fe(CN)6
］
+ 4H2O
滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。

2
，试剂

1
）
1
％的次甲基兰指示剂

2)
盐酸（水解作用）

3
）
10
％和
3 0
％的
NaOH
溶液

4
）
1
％铁氰化钾（贮存特色瓶，临用前标定）

标定步骤

称蔗糖
1.0000g→定容
500ml→取此液
50ml→于
100ml
容量瓶→加
hcl5ml→摇匀→65
-
70℃水裕
15
分钟→取出冷却→
用
30
％
NaOH
中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取
10ml1
％铁氰化钾于锥形瓶中→加
10< br>％
NaOH2.5ml
加
12.5ml
的水加
玻璃珠颗粒→加 热至沸→保持一分钟→加次甲基兰
1
滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。

正式滴定比较滴定时少
0.5ml
糖液，煮沸
1
分钟，加指示剂一滴 ，再用糖液滴定至兰色褪去，计算铁氰化钾溶液的浓
度。

A=(W?V)/(1000×0.95)

A
：相当于
10ml
铁氰化钾溶液的转化糖的量（克）

V
：滴定时消耗的糖液的体积

W
：称取纯蔗糖的量

1000
：稀释比

0.95
：换算等数

3
．操作方法

稀释
10g→用
100ml
水作溶 液→于
250ml
容量瓶→加
20
％醋酸铅
10ml→至沉淀完为止 →加
10ml10
％NA2HPO4→至不在
产生沉淀为止→加水至刻度→过滤－取滤 液
50ml→于
100ml
容量瓶中→按铁氰化钾标定法进行转化，中和及滴定

计算糖含量

总
糖
（
以
转
化
糖
计
%
）
=
(A
×
1000)/(W?V)×
100






























A
：相当于
10ml
铁氰化钾溶液的转化糖的重量，

W
：样品的重量

V
：滴定时样液消耗的体积

4
．实验应注意

（
a
）达终点时，过量的转化糖将指示剂 次甲基兰还原为无色的隐色体，隐色体容量受空气中氧所氧化，很快又变

成指示剂的颜色。

（
b
）整个过程应在低温电炉上进行，滴定要速度，否则终点不明显

（
c
）糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深 浅与溶液中糖的浓度

成正比，单、双糖等糖类都直接于试剂发生作用，因此不需要水解。

（二）蒽铜的比色法

1.
原理：糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生 产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓

度成正比，可比色定量。

2.
试剂

（
1
）



硫酸锌溶液：溶解
500g
化学纯硫酸锌于
500ml
水中

（
2
）



亚铁氰化钾溶液：溶解
1 0.6g
化学纯亚铁氰化钾于
100ml
水中

（
3
）


0.2
％蒽铜试剂：溶解蒽铜0.2g
于
100ml95
％硫酸中，置棕色瓶中冷暗处保存

（
4
）


0.1
％葡萄糖液：准确称干燥葡萄糖
0.1000g
定容
100ml
3.
操作方法

（
1
）



标准曲线绘制

（
2
）


100ml
容量瓶编号



沸水浴加热
6
分钟， 取出冷却→用
1cm
比色杯→610nm
测定吸光度→作出以吸光度为横坐标，糖液浓 度为纵坐标的准

曲线

（
3
）样品测定

称
10g
样品→于
100ml
热水加入
500ml
容量瓶 中－加硫酸锌
5ml→沸水浴
5
分钟→取出再摇动下加亚铁氰化钾
5ml，
→
冷却→定容
500ml→过滤→吸滤液
25ml→于
250 ml
容量瓶→定容
250ml→取稀释液
1ml
，于比色管中→加
1 0ml
蒽铜试
剂→摇匀→水浴加热
6
分钟→冷却→比色

试验注意

1
，样液必须清澈透明，加热后不应有蛋白质沉淀

2
，样品颜色较深时，可用活性炭脱色后再进行测定

3
，此法与所用的硫酸浓度和加热时间有关

4
，所取糖液浓度在
1-2.5mg/100ml
之间

二
.

还原糖的测定方法

还原糖包括葡萄糖、果糖、麦 芽糖，在葡萄糖分子中含有淤青的醛茎，在果糖分子中含有淤青的酮茎，在乳糖中和

麦芽糖中 含有淤青的半缩羧茎，因此都有还原性。在测定还原糖时一般测定总糖时所有将糖类水解为转化糖再测定

的方法都可用来测定还原糖。

（一）斐林氏容量法

1.
此法的原理、试剂、方法与总糖的测定方法相同。只是样品溶液不必以过转化，而是直接取滤液进行滴定，滤液进
行滴定，滤液中的还原糖含量以在
0.2-0.5%
为好，又能通过增减样品量或改变 稀释倍数来调节。
10
毫升费林氏
A
、
B
液混合时理论上相 当还原糖量如下：

葡萄糖（无水）果糖或转化糖尿病


0.0500
克

乳糖尿病
















0.0678
克

麦芽糖


















0.0807
克



2
试剂

（
1
）



斐林氏
A
液，称
69.8g cp
硫酸铜于
100ml
水中，过滤备用

（
2
）



斐林氏
B
液，称

浓流锌钠和
100gcp NaOH
于
1000ml
水中，过滤备用

3
方法

称取样品
10-20g
：制备与转化同铁氰化钾法。将样液倒入滴管中，吸取
A,B
液准备预滴定

预滴定：

吸
A
、
B
液各
5ml→从滴管中加
15ml
样液→加热至沸→继续滴加样液→至兰色 变潜→加
3
滴次甲基兰→在
1
分钟内滴定
到终点

达到终点时，稍微过量的转化糖，将兰色的次甲基兰染色体还原为无色的隐色体，而显出氧化亚铜的红色，去碱性 条
件下加热糖的产物是复杂的。

去碱性中断裂是由于碱度不同，加热时间不同，生产 不等的碎片，这种碎片给后面滴定带来误差，而且，这种碎片与
糖没有化合量的关系，所以，
L anecrol-Eynon Method
作出数据检索表

正式滴定：

吸
A,B
液各
5ml→于三角瓶→加比预定量少
0.5-1.0ml
样液→2
分钟内要求沸腾
1
分钟→加
3
滴指示剂→用样液滴 定兰
色消失

总沸腾时间为
3
分钟，即滴定在
3
分钟完成。

计算：

还原糖＝( F?V2)/(W?V1)×100

F
：转还糖回数，即与
10ml
斐林氏试液相当的转化糖毫克数，

V1
：样品试液总体积

V2
：样品试液滴定量

W
：样品重量

在测量乳糖制品时，若蔗糖与乳糖的含量比超过
3< br>：
1
时，则应与滴定量中加上相关表中（课本中表
9-8
）校正值后在
进行计算

我们举例如下：

如果标准果糖溶液度为每
10 0ml
溶液含糖
262.5mg
。对于
10ml
斐林试液从
9-5
可以查得果糖液滴定应为
20ml
。如果不
是
20ml
，可先算出
A,B
液

校正等数。然后进行计算

再如标 准糖溶液浓度为每
100ml
溶液含糖
199.3ml
，对于
10m l
A,B
液

从
9-4
中查到，糖液滴定量应为
25.00ml
，若有
出入可校正。如果要求不高，可省略校正步骤但要求
1
％得

测定误差，则省略校正。另外有时候并未根据检索表计算
样含糖量，但对
A,B
液进行标定，以使确定相当得

还原糖量。这种误差为
0.5
％。下面我们讲标定量
A,B
液

准确准确称取烘干冷却得
A. R
蔗糖
1.5g→用水溶解称取
250ml
容量瓶中→定容→吸
50 ml
于
100ml
定量瓶中→加
HCL5ml→再
65-70摄氏度水裕
15
分钟→冷却→用
30
％
NaOH
中和→ 定容

准确吸
A,B
液

各
5ml
于三角 瓶中→加水约
50ml
玻璃珠三粒→加热至沸→保持
1
分钟→加指示剂
1
滴→再煮
1
分钟→
立即用糖液滴定至兰色褪去，红色出现即为终点

正式滴定，先加入比预滴定时少
0.5ml
左右得糖液煮沸
1
分 钟→加指示剂
1
滴→再煮沸
1
分钟→继续滴至终点

计算：
A
＝W*V/500×0.95

A
：相当于10ml
斐林氏
A
、
B
液的转化糖的量

W
：称取蔗糖的质量

V
：滴定蔗糖的量

500
：稀释比

0.95
：换算等数

最后计算：

总糖（还原糖测定时样品溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体 积相近，通过测定了解样品浓度是否合适，
浓度过大或过小应该加以调整，使测定时消耗样品溶液量在< br>10
毫升左右；二是通过测定可知道此溶液的大概消耗量，
以便在正式的滴定时，预先加 入比实际用量少
1
毫升左右的样液，只留下
1ml
左右的样液在续滴定时加入 ，以便保证
在
1
分钟内完成续滴定工作，提交预测定的准确度。

2 .
此实验影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度，煮沸时间和滴定速度一般煮沸时间短消 耗糖多，反
之，消耗糖液少，滴定速度过快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。另外溶液碱度愈高，二价 铜的还原愈快，因此必
须严格控制反应的体积）以转化糖计
%=
（
A*100 0/W*V
）
*100
A
：同上

W
：制取样品的量

V
：滴定是时样品消耗量

1000
：是稀释倍数（
100/50*500
）

1.< br>预测定的目的：对样品溶液中还原糖浓度有一定要要求（
0.1%
左右），，使反应体系 碱度一致。热源一般采用
800W
电炉，反应液在
2
秒内沸腾。

（二）
KMNO4
（高锰酸钾法）

1
．
原理，< br>还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜，
在酸性条件下，
氧化亚铜能使硫酸铁还原为 硫酸亚铁，
再用
KMNO4
溶液滴定硫酸亚铁，即可标出还原糖的量。

2.
操作方法

（
1
）样品处理

a.
乳糖：包括乳制品以及含蛋白质的冷食类

称样
2-5g
（液体样< br>25~50ml
）→于
250ml
容量瓶→加水
50ml→加
A
液
10ml+1N NaOH 4ml →定容→静置
30
秒→过滤→
弃去初液→可测还原糖及蔗糖用。

b.
低酒度饮料：麦精露、各类汽酒等饮料。

先暴气除
CO2→取
100ml→于蒸发皿中→用
1 N NaOH
中和→沸水浴蒸至原体积四分之→转入
250ml
容量瓶→加
50ml
水→ 摇匀→（加
A
液
10ml→加
1 N NaOH 4ml
）→加水至刻度→静置
30
秒→过滤。

c.
含多量淀粉的食品：婴儿食品、糕干粉、宝宝乐、代乳粉、饼干、面包、糕点等

称样
10-
20g→250ml
容量瓶→加水
200ml→45
度水浴加 热
1
小时→不停摇动→冷后加水至刻度→静置→吸出清夜
200ml
于另一容 量瓶（
250ml
）→加
A
液
10ml+1N NaOH 4ml→静置
30
秒→过滤。

d.
汽水、果露、国产七种可乐及可口可乐

处理
CO2→吸样液
100 ml→于
250ml
容量瓶→加水至刻度→可测还原糖及蔗糖。

（
2
）测定方法

取
50ml
处理的样液→于400ml
烧杯→加
A
、
B
液各
25ml→加热在4min
左右沸腾→再煮
2min→趁热抽滤→用
60℃水洗
烧杯和沉淀 →直到洗液不成碱性→将抽滤的纸
（或者石棉）
及
Cu2O→转入原来烧杯→用
25ml
硫酸铁溶液冲洗抽滤瓶→