-石运莹
全国临床检验操作规程(第
3
版)
精液检查
一.标本收集
1.
在
3
个月内检查
2
次 至数次,
二次之间间隔应
>7
天,
但不超过
3
周。
2.
采样前至少禁欲
3
天,但不超过
7
天。
3.
采样后
1h
内送到检验科。
4.
用清洁干燥 广口塑料或玻璃小瓶收集精液,不宜采
用避孕套内的精液。某些塑料容器具有杀精子作用,
但是 否合适应事先做实验。
5.
应将射精精液全部送检。
6.
传送时温度应在
20~40
℃。
7.
容器必 须注明患者姓名和(或)识别号(标本号或
条码)
,标本采集日期和时间。
8.
和所有体液一样,精液也必须按照潜在生物危害物
质处理,因为精液内可能含有肝炎病毒、 人类免疫缺
陷(病毒)和疱疹病毒等。
二.一般性状检查
一般性状检查包括记录精液量、颜色、透明度、粘稠
度和是否液化。
1.
外观
正常精液呈灰白色或乳白色,不透明。
棕色或 红色提示出血。黄色可能服用某种药物。精子
浓度低时精液略显透明。
正常精液是一种均匀黏稠的液体,
射精后立即凝
固,
30
min
后开始液化。若液化时间超过
60
min
考
虑为异 常,应记录这种情况。正常精液可含有不液化
的胶冻状颗粒。
2.
量
用刻度量筒或移液管测定。正常一次全部
射精精液量约
2~5 ml
。
精液量过多或过少是不育的原
因之一。
3.
黏稠度
在精液全部液化后,
用
Paste ur
滴管吸
入精液,
然后让精液依靠重力滴落,
并观察拉丝长度。
正 常精液呈水样,形成不连续小滴。黏稠度异常时,
形成丝状或线状液滴(长度大于
2
cm
)
。也可使用玻
璃棒或注射器测定黏稠度。
4.
酸碱度
用精密试带检查。正常人
pH
为< br>7.2~8.0
,平均
7.8
。
三.精子存活率
精子存活率(
motility
)用活精子比例来反映。
1.
伊红染色法
【试剂】
5 g/L
伊红
Y
染色液:伊红
Y 0.5 g
,加生理盐水
至
100 ml
。
【操作】
(
1
)
在载玻片上加新鲜精液和伊红溶液各
1
滴,混匀后,加上盖玻片,
30
s
后在高
倍镜下观察,活精子不着色。死精子染
成红色。
(
2
)
计数
200
个精子,计算未着色(活精子)
的百分率。
2.
伊红
-
苯胺黑染色法
【试剂】
(
1
)
10 g/L
伊红
Y
染色液:伊红
1 g
,
加蒸馏水
至
100 ml
。
(
2
)
100 g/L
苯胺黑染色液:苯胺黑
10 g
,加蒸
馏水至
100 ml
。
【操作】
(
1
)
取小试管,加新鲜精液和伊红溶液各
1
滴,混匀。
(
2
)
30 s
后,加苯胺黑溶液
3
滴,混匀。
(
3
)
30 s
后,在载玻片上,加精液
-伊红
-
苯胺
黑混合液
1
滴,制成涂片,待干。
(
4
)
油镜下观察,活精子为白色,死精子染
成红色,背 景呈黑色,计数
200
个精子,
计算未着色活精子的百分率。
3.
精子低渗膨胀试验(
HOS
)
【试剂】
膨胀液:枸橼酸钠
0.735
g
,果糖
1.351
g
,加蒸
馏水至
100 ml
。分装,
- 20
℃冷冻保存,使用前
解冻,并充分混匀。
【操作】
(
1
)
取小试管,加
1
ml
膨胀液,
37
℃预温
5
min
。
(
2
)
加
0.1 ml
液化精液,轻轻搅匀,在
37
℃
孵育至少
30 min
。
(
3
)
在相差显微镜下观察精子,膨 胀精子为
尾部形状发生变化的精子,即活精子。
计数
200
个精子,计算膨胀 精子的百分
率。
【参考区间】
在排精
30~60 mi n
内,
约有
70%
以上精子应为活
动精子。
精子低渗膨胀试 验应有
60%
以上精子出
现尾部膨胀。
【附注】
(
1
)
如室温低于
10
℃时,应将标本先放入
37
℃温育
5~10 min
后镜检。
(
2
)
某些标本试验前就有尾 部卷曲的精子,
在
HOS
试验前,
计算未处理标本中尾部
卷曲精子的 百分数,
实际
HOS
试验结果
百分率就等于测定值减去未处理标本中
尾部卷曲精子百分率。
(
3
)
HOS
也是精子尾部膜功能试验。
四.精子活力
WHO
推荐一种无需复杂设备而能进行简单精子
活力(
activity
)分级的方 法。
【操作】
取
10
μ
l
标本涂片 ,连续观察至少
5
个视野,
对
200
个精子进行分级,
首先 计数
a
级和
b
级精
子,随后在同一视野内计数
c
级 和
d
级精子。
【结果判断】
根据下述标准把精子活力分 为
a
、
b
、
c
、
d
四级。
a
级:快速前向运动:
37
℃时速度≥
25
μ
m/s
,
或
20
℃时速度≥
20
μ
m/s
(
25
μ
m
大约相当于
精子< br>5
个头部的长度,或半个尾部的长度)
。
b
级:慢速或者呆滞的前向运动。
c
级:非前向运动(<
5
μ
m/s
)
。
d
级:不动。
【参考区间】
正常精液采集后
60 min
内,
a
级
+b
级精子 达
50%
以上。
五.精子计数
【试剂】
-石运莹
-石运莹
-石运莹
-石运莹
-石运莹
-石运莹
-石运莹
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