什么是鼻咽癌地中海贫血基因检测试剂结果判读

2021年1月29日发(作者：999急救中心)
地中海贫血基因检测试剂结果判读

亚能生物技术（深圳）有限公司

1.
α
-
地中海贫血基因检测试剂结果判读

基因型

-
ααα（右缺失）

-
ααα（左缺失）

α
α
/
αα

α
α
/
αα


α
α
/
αα

αα
/--


-
α
-
α


-
α
-
α


-
α
-
α

标准型


实验室检查：出生时
Hb
Bart
’
s
可占
5%
～
15%
，几个月后消失，红细胞有轻度形态改变，可见
靶形红细胞，血红蛋 白稍降低或正常，
MCV
＜
79fl
，
MCH
＜
2 7pg
，红细胞脆性试验阳性。



遗传学：父母一方或双方为α地中海贫血。

一般不需要治疗。

-
α
--


-
α
--


α
α
/--
T
SEA

SEA
SEA
SEA
WS
QS
CS
临床表现型

临床相关

病理生理改变非常轻微，临床一般无症状。红细胞形态正常，出生时脐带血中
Hb Bart' s
含量为～
但
3
个月后即消失（少部分可见
MCV
＜
79fl
，
MCH
＜
27pg
，红细胞脆性试验阳性
)< br>。


静止型

遗传学：父母中至少一方为α地中海贫血。


左缺失涉及整个α
2
－珠蛋白基因缺失，要比右缺失贫血程度要严重。



轻型地贫无需特殊治疗。


尚能代偿性地合成相当数 量的α链，临床上亦无症状或有轻度贫血症状，肝脾无肿大。红细胞形
态有轻度改变，血液学检查可呈现 平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白的降低
(
如大小不等、中央
浅染、异形等；红纽胞渗透脆性降低；变性珠蛋白小体阳性；
HbA2
和
HbF
含量正常或稍低。患儿脐
血
Hb Bart's
含量为～，于生后
6
个月时完全消失。
)

慢性溶血性贫血，此型临床表现差异较大，出现贫血的时间和贫血轻重不一（少数患者血红蛋白可
HbH
病

低于
60g/L
或高于
100g/L
）。大多 在婴儿期以后逐渐出现贫血，疲乏无力，肝脾大，轻度黄疽；年
龄较大患者可出现类似重型β地贫的特殊 面容。合并呼吸道感染或服用氧化性药物，抗疟药物等可诱
（点突变：
HbCS
，HbQS
，
HbWS
等）

发急性溶血而加重贫血，甚至发生溶血危象。


实验室检查：红细胞渗透脆 性减低；变性珠蛋白小体阳性；
HbA2
及
HbF
含量正常。红细胞形态基< br>本同重型β地中海贫血所见，红细胞内可见包涵体。骨髓中红细胞系统增生极度活跃。血红蛋白电泳
出现
HbH
区带，
HbH
成分占
5%
～
30%(
个别患者
HbH
成分可小于
5%
或高达
40%)
， 也可出现少量
Hb
Bart
’
s
（出生时
Hb
Bart
’
s
可达
15%
以上）。随年龄增长，
HbH逐渐取代
Hb Bart's
，其含量约为

～。包涵体生成试验阳性。非缺失型血红蛋白
H
病可出现微量
Hb
Constant
Spring
。


遗传学：父母双方均为α地中海贫血。

--/--

Hb
Bart
’
s
胎儿水肿综
合症

胎儿常于
30
～
40
周时流产，死胎或娩出后半小时内死亡，胎儿呈重度贫血，黄疽，水肿，肝 脾肿
大，腹水，胸水。体腔积液，胎盘巨大且质脆。孕妇可有妊娠高血压综合征。


实验室检查：脐血血红蛋白明显降低，红细胞中心浅染、形态不一、大小不均，有核红细胞显著增
多，靶形红细胞增多。血红蛋白电泳：
Hb Bart
’
s
成分＞
70%
，少量
Hb Portland
，可出现微量
HbH
。无
HbA
、
HbA2
和HbF
。



2
．β
-
地中海贫血基因检测试剂结果判读

位点名称

检测的突变类型

Type of Thalassemia

IVS-
Ⅱ
-654

C
→
T

β

+
CD41-42

-TTCT

β

0
－
28

A
→
G

β

+
CD43

G
→
T

β

0
－
29

A
→
G

β

+
－
30

T
→
C

β
or unclear

0
CD14-15

+G

β

0
－
32

C
→
A

β

+
CD27-28

+C

β

0
CD71-72

+A

β

0
IVS-
Ⅰ
-1

G
→
A
、
G
→
T

β

0
β
E

GAG
→
AAG

β

+
IVS-
Ⅰ
-5

G
→
C

β

+
位点名称

检测的突变类型

Type of Thalassemia

CAP+1

A
→
C

β

+
CD17

A
→
T

β

0
Initiation codon

ATG
→
AGG

β

0
CD31

-C

β

0



临床表现型

基因型

β
/
β

β
/
β

+
0
临床表现

临床表现：临床无症状或轻度贫血，脾不大或轻度大 。病程经过良好，本病易被忽略，多在重型患
者家族调查时被发现。病理生理改变介于重型和轻型之间。


实验室检查：血红蛋白正常，
MCV
、
MCH
和红细胞脆性试验常降低，网织红细胞正常。
HbA2
＞
%
或正
轻型 β
-
地贫

（β
或β
地贫的杂
合子状态）

0
+
常，
HbF
正常或轻度增加（不超过
5%
）。


遗传学：父母至少一方为β地中海贫血。

β
/
β
（β
地贫的双
无，骨骼改变较轻，血红蛋白和红细胞数可维持在一定水平，一般不 必输血，偶尔就医。

重杂合子和某些基因
中间型β
-
地贫

型纯合子，或两种不
同基因型的双重杂合
子）

临床表现：多在2
～
5
岁时出现贫血，症状和体征较重型轻，可有“地中海贫血”面容。


实验室检查：外周血象和骨髓象的改变如重型红细胞渗透脆性减低
HbF
含 量约为～，
HbA2
含量正
常或增高。


遗传学：父母均为β地中海贫血。

临床表现：患儿出生时无症状，至
3～
12
个月开始发病，呈慢性进行性贫血，面色苍白，肝脾大，
发育不良。常有轻 度黄疽，症状随年龄增长而日益明显。由于髓代偿性增生导致骨骼变大，髓腔

增宽，先发生于掌骨，以后为长骨和肋骨；
1
岁后颅骨改变明显，表现为头颅变大， 额部隆起，颧
高，鼻梁塌陷，两眼距增宽，形成地中海贫血特殊面容。患儿常并发气管炎或肺炎。当并发 含铁血黄
β
/
β

重型β
-
地贫

β
/
β

β
/
β

+
0
+
+
0
0
+
+
+
多于幼童期出现症状，其 临床表现介于轻型和重型之间，中度贫血，脾脏轻或中度大，黄疽可有可
素沉着症时，因过多的铁沉着于 心肌和其它脏器如肝，胰腺，脑垂体等而引起该脏器损害的相应症
状，其中最严重的是心力衰竭，它是贫 血和铁沉着造成心肌损害的结果，是导致患儿死亡的重要原因
之一。本病如不治疗，多于
5岁前死亡。


实验室检查：血红蛋白＜
60g/L
，呈小细胞 低血色素性贫血，红细胞形态不一、大小不均，有靶形
红细胞（
10%
以上）和红细胞 碎片，网织红细胞增多，外周血出现较多有核红细胞。骨髓中红细胞系
统极度增生。首诊
HbF
达
30%
～
90%

遗传学：父母均为β地中海贫血


当β地贫复合α地贫时，患者不仅有β地 贫的缺陷同时又有α地贫基因的缺失，这使得α和β珠蛋白琏的不平衡状态有所改善，表现临床症状可以
较轻，实验室检查中凸显的是β地贫特征，因此临床上要重视这种复合地贫患者的检出，避免漏诊。另外患者为复 合地贫时，他无论与任何一种轻型
地贫者婚配均存在
1/4
生育重型地贫患儿的风险， 因此，当夫妇一方为α地贫另一方为β地贫时，β地贫的一方一定要检查α地贫基因，以排除复合
地贫的 存在。


当夫妇一方分别为α地贫，另一方为β地贫基因携带时，他们生育复合型地 贫患儿的风险为
1/4
，因此出生后子代的基因确诊对其今后的婚配指导
是很有必要的 。


地中海贫血患者多次输血后容易造成体内铁的过度沉积，并可损害心脏及肝肾功 能，临床上对多次输血患者需进行去铁治疗以减轻铁负荷。然而地
中海贫血患者并不是总伴体内铁负荷过 重，地中海贫血患儿也可能发生铁缺乏，尤其是婴幼儿及轻型β地中海贫血患儿。因此对地中海贫血患儿进行常规铁指标的测定，对伴铁缺乏者给予适当补铁治疗，可以提高
Hb
浓度，减缓贫血症状。


3
．地中海贫血治疗


轻型地贫无需特殊治疗。中间型和重型地贫应采取下列一种或数种方法给予治疗。

1 .
一般治疗：注意休息和营养，积极预防感染。适当补充叶酸和维生素
E
。


2.
输血和去铁治疗，此法在目前仍是重要治疗方法之一。


3.
使用铁鳌合剂。


4.
脾切除，脾切除对血红蛋白< br>H
病和中间型β地贫的疗效较好，对重型β地贫效果差。脾切除可致免疫功能减弱，应在
5
～
6
岁以后施行并严格掌握
适应症。


5.
造血干细胞移植，是目前能根治重型β地贫的方法。如有
HLA
相配的造血干 细胞供者，应作为治疗重型β地贫的首选方法。


【预防】

< br>开展人群普查和遗传咨询，作好婚前指导以避免地贫基因携带者之间联姻，对预防本病有重要意义。


地贫产前诊断指征：
1.
曾生育过重型或中间型α或β地贫患儿的夫妇 。
2.
夫妇双方均为α地贫携带者；夫妇一方为α地贫携带者，配偶为β地贫复
合α地 贫携带者。
3.
夫妇双方均为β地贫携带者。《
2006
广东省卫生厅地中海 贫血产前诊断技术规范》


采用基因分析法进行产前诊断，可在妊娠早期对重型β和 α地贫胎儿作出诊断并及时中止妊娠，以避免胎儿水肿综合征的发生和重型β地贫患者出
生是目前预防本 病行之有效的方法。


附件
1
：

地中海贫血产前诊断技术规范





地中海贫 血
(
以下简称地贫
)
是一种由珠蛋白基因缺失或突变导致肽链合成障碍而引起 的溶血性贫血，是我省发病率最高的人类单基因遗传病
之一。为规范我省地贫产前诊断技术的应用，特制 定本技术规范。





一、地贫产前筛查





（一）基本要求。




1
、开展地贫产前筛查技术服务的医疗保健机构（以下简称产前筛查机构）应符合 《广东省开展产前筛查技术服务的基本条件》；




2
、地贫产前筛查机构应与具有产前诊断技术服务资质的医疗保健机构（以下简称产前诊断机构）建立工作联系， 并纳入产前诊断质量控制体
系。产前诊断机构应对产前筛查机构进行技术指导和质量管理。





（二）技术规范。




1
、地贫产前初筛。




在地贫高发地区，凡未做过地贫筛查的孕妇应建议其进行地贫筛查。地贫的初步筛查应推广使用血液红细胞指 数
(MCV
，
MCH)
等适宜技术。对
红细胞指数下降的，应书面建 议进一步做地贫产前筛查，并按规定转诊。





不具 备红细胞指数检查条件的医疗保健机构，应书面建议当事人到有条件的医疗保健机构进行该项目检查，或采用其他 方法进行筛查。




2
、地贫产前筛查。





对产前检查和血液红细胞指数初筛发现的地贫可疑孕妇，应 采用血红蛋白（
Hb
）电泳技术或
/
和高效液相色谱
(HPLC)< br>技术作进一步筛查，对检
测结果为
HbA2
降低或临界值的，则再作血清铁测定 。





临床医生根据检测结果，进行地贫、异常Hb
和缺铁性贫血的鉴别诊断，并提供地贫相关的产前咨询及必要的转诊服务。




3
、产前筛查报告。





产前筛查报告包括实验室检测结果和遗传咨询指导意见两部分。实验室检测结果应包括产前筛 查所选用的试验名称、参考范围、测定结果。
遗传咨询指导应包括是否存在α
-
或β< br>-
地贫的可能性及相应的进一步检查建议等。





实验室检测结果应由经培训的专业技术人员或实验室主管复核后，才能签发。产前筛查报告应 当由副高以上职称的产前筛查技术培训合格的
执业医师复核后，才能签发。产前筛查报告由
2< br>名以上经培训的执业医师签发。




4
、产前筛查后高风险对象的处理原则。





（
1
）对产前筛查结果为高风险的孕妇，产前咨询医生应及时给予遗传咨询指导；是否实施产 前诊断，应严格遵循知情选择原则。





（
2
）医疗保健机构不得擅自为产前筛查结果为高风险的孕妇作终止妊娠的处理。





（
3
）对产前筛查结果为高风险的孕妇应进行随访。




5
、产前筛查质量控制体系。





（
1
）人员及实验室条件：从事地贫产前筛查技术服务的人员和实验室应符 合《广东省开展产前筛查技术服务的基本条件》；





（
2
）试剂规格及使用：使用的筛查试剂应为国家或地方政府医用试剂主管部门准许的临床生 化检验用正式产品
(
含国产和进口试剂产品
)
。购
置试剂要记录如下 信息：购买日期，批号，数量，有效期，验收人，保存条件，存放地点等
;





（
3
）质量控制
:
产前筛查机构应 建立以室间质控检测为主要内容的综合质量考评制度。并接受与其建立工作联系的产前诊断机构的技术指导
和质量控制。





二、地贫产前诊断





（一）基本要求。




1
、开展地贫诊断技术服务的医疗保健机构应符合《广东省开展产前诊断技术服务 的基本条件》
;




2
、分子诊断实验室应 配有高、中、初级职称技术人员各
1
名或以上，技术人员应接受过规范的技术培训并取得技术合 格证。





（二）技术规范。




1
、主要技术操作及其技术规范。





实施单位可根据自身条件采取以下相应技术：




(1)DNA
提取：人基因组
DNA
从胎儿的羊水细胞、血细胞 或绒毛膜组织，或从胎儿双亲和先证者的外周血（一般每人采集
2-4 ml
）细胞中提
取。所获得的
DNA
样品用于被测家庭的产前诊断，家系分析是产前诊断必须遵循的原则。每 份
DNA
样品需严格记录，保证测试用量和备份保存。




(2)
α
-
地贫的诊断：缺失型α
-
地贫（主 要有
--SEA
、
-
α和
-
α三种类型）的分子诊断，推荐 采用基于
PCR
的直接扩增缺失基因断裂点的方
法；对于非缺失型α
-
地贫（主要有
Hb Constant Spring [
α
2
，
CD 142 TAA
→
CAA]
，
Hb Quong Sze[
α
2
，
CD 125 CTG
→
CCG]
等六种类型）的分子诊
断，推荐采用反向点杂交
(RDB)
技术。在进行胎儿水肿综合 征高风险胎儿的产前诊断时，如有必要，可采用其它分子诊断技术进一步确诊。此外，还
可采用以下二种 非分子诊断的其他技术：（
A
）用胎儿脐带血
Hb
电泳分析检测
Hb Bart
’
s
和
Hb H
含量辅助诊断；（
B
）用 胎儿超声诊断测定心胸比
值等跟踪辅助诊断。




( 3)
β
-
地贫的诊断：基因点突变引起β
-
地贫的分子诊断，推荐采 用
RDB
技术。该技术可以诊断在中国人群中目前已发现的绝大部分基因突
变，其中包 括下列基因频率排在前列的十种β
-
地贫突变：
CDs 41-42 (-TCTT)
，
IVS-2-654 (C>T)
，
TATA box -28 (A>G)
，
CD17 (A>T)
，
CDs71-72
(+A)
，
CD26(G>A)
，
IVS-1-5 (G>C)
，
TATA box -29 (A>G)
，
CD43 (G> T)
和
CDs27-28(+C)
。对于有条件的实验室，也可采用其它具有严格质量 控制体
系的分子诊断技术进行β
-
地贫的分子诊断。






(4)
静止型地贫的分子产前筛查：静止型α
-< br>地贫基因（
-
α和
-
α）也是本地区常见的α
-
地贫 类型，
-
α和
-
α这二种静止型地贫基因与东南亚
型缺失—
SEA
基因组合可导致严重影响个体生存质量的
HbH
病。
HbH
病 高风险家庭的遗传咨询和诊断是不可忽视。由于在成人血样中缺乏可靠的针对
-
α和
-
α这二种静止型地贫的表型检测指标，需采用基于
PCR
的
DNA
分 子诊断技术进行产前筛查。




(5)
其他类型血红 蛋白病的诊断
:
目前已知的本地区其他类型血红蛋白病主要为中国型β
-
地贫 和东南亚型
HPFH
，二者均为β
-
珠蛋白基因大
片段缺失所致，推 荐采用基于
PCR
的直接扩增缺失基因断裂点的方法对其进行分子诊断。二种常见导致地贫的异 常
Hb
（
Hb Q
和
Hb E
）基因的分子诊
断方 法与上述α
-
或β
-
地贫的常规方法相同，必要时，可采用
DNA< br>序列分析技术检测样品的基因突变。今后在有导致α
-
或β
-
地贫的新 突变发现时，
可根据技术研究进展增补适宜的诊断技术。




2
、地贫产前诊断指征和时机。




(1)
地贫产前诊断指征：