毒饮料女性泌尿生殖道解脲支原体基因分型的研究

2021年1月29日发(作者：灵芝孢子粉的功效)
女性泌尿生殖道解脲支原体基因分型的研究


女性泌尿生殖道解脲支原体基因分型的研究


解脲支原体
( ureap lasma urealyticum, uu)
是引起泌尿生


殖道炎症
(ngu)
及男 女不孕不育的主要病原体
,
也是性传播


的常见病原体。目前临床中常见对宫颈分泌物检测出解脲支


原体的妇女投以大量抗生素
,
结果是解脲支原体反复出现阳


性
,
称之为“解脲支原体耐药”,因此下生殖道内查到解脲支


原体者
,
是否皆须诊治
,
一直尚未完全定论。现在对特定血清


型的
uu
具有致病性
,
这种条件致病病原体进一步分群分型


是判断感染与携带的关键。
故解脲支原体的基因分型研究成为国内外研究热< br>点
,
现将其研究进展综述如下
:
1
解脲支原体概述

uu
是从人体中分离的能自身繁殖的
13
种支原体之一
,

属硬壁菌门柔膜体纲支原体目支原体科脲原体属。
1954
年


由
shepard
首先从非淋球菌性
ngu
患者的尿道中分离出来< br>,

称为
t
株
( tiny strain)
。
uu
介于病毒和细菌之间
,
是在人工


培养基上能繁殖的最小的原核细胞型微生物
,
无细胞壁
,
能自


我复制
,
呈球杆状
,
大小为
125
～
250
毫微米
,
分子量


4. 5 ×108 ,具高度多形性
,
是人类泌尿生殖道的一种常见寄生


微 生物。
1992
年
kong
认为
uu
具有保守的氨基末端和 具有


多重重复基因的羧基末端
,uu
的重复顺序短
(
女性泌尿生殖道解脲支
原体基因分型的研究第
2
页

清型
2
、
5
、
8
、
9;
亚群
2
为血清型
4
、
10
、
12
、
13;

亚群
3
为血清型
7
、
11
。
20xx年在
fanrong
等的研究中
,
为进


一步阐明不同血清型的关系
,
他们把
uu
的
10
个血清型的

mba
基因
5′端和
up
、
uu
的所有血清型基因的部分重复区域


进行排序,uu
的
10
个血清型被分为
5
个
mba
基因 型
,mba

基因型
a
包括血清型
2, 5, 8;mba
基因型
b
包括血清型
10;
mba
基因型
c
包括血清型
4
、
12
、
13,mba基因型
d
包括血清


型
9;mba
基因型
e
包括血清型
7
、
11
。在每一种
mba
基因


型成员间没有排列顺序的差异。在
robertson [ 14 ]
的研究中血


清型
3
标准株被作为
u p
的典型株
,uu
的典型株是血清型
8
。


在极个别情况下
,
极少数
uu
菌株的特性不符合任何一个生


物种群
,
例如血清型
3
标准株吸附红细胞的能力、 还有膜外板


层、磷脂酶
a
、磷脂酶
c
、细菌敏感性都没有确立与那一个生


物种群有关。多克隆的抗血清对一或多个抗原决定簇引起的


细胞生长抑制与人类的生物一群有关
,
但与任何生物二群的


抗原荧光分析决定子无关。

4
解脲支原体基因分型方法

4. 1
抗原检测法

4. 1. 1
免疫荧光试验


这是最早使用的检测抗原方法
,
在固体培养的菌落上加




























































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来源网络整理，仅供学习参考


入特异的荧光标记的一抗或二抗
,
在荧光显微镜下观察结果。


该法简便易行可以对生长在同一培养基表面的混合血清型株


进行 鉴定
,
主要用于
uu
临床标本的血清分型
,
其缺点是结果< br>

不易区分荧光染色的菌落和未染色的菌落
,
受主观因素的影


响较大
,
且需要特殊的荧光显微镜不易普及使用。

4. 1. 2
免疫酶试验


这种检测抗原方法与免疫荧光相似
,
也可以用于检测同


一培养基上的不同血清型。该法用酶标记抗体代替荧光抗


体
,
可以在普通显微镜下观察结果。

4. 1. 3
免疫结合试验


这种检测抗原方法的关键一步是采用硝酸纤维素膜作为


载体,
利用该膜对蛋白质较好的吸附力
,
并与免疫酶方法相结


合完成对支原体表面抗原的检测。该法易进行大量临床标本


的支原体鉴定及同一固体培养基上混合株型鉴定
,
可以对固


体培养基上生长不良的菌落进行鉴定
,
具有较高的特异性
,
敏


感性与培养法相当
,
在分型研究中交叉反应的发生率较高。

4. 1. 4
免疫印迹技术


这种检测抗原方法的基本原理是蛋白质首先被高分辨力


十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳
( sds2page)
分离
,
蛋


白质的各分离区带被固定于凝胶的网络结构中
,
然后经电转


染技术将蛋白质转移至硝酸纤维素膜上
,
与敏感而特异的固


相免疫测定相结合
,
利用各种标记试剂灵敏而简便的测出各


种特异性反应。

4. 2
抗体的测定

4. 2. 1
代谢抑制试验


原理是
uu
在 液体培养集中反应
,
可分解尿素产生氨
,
培


养基的
ph
值升高
,
通过颜色指示剂显示。如果将特异的抗


体加入液体培养集中
,uu
的生长会受到抑制
,
从 而间接抑制


了颜色变化。该法有较高敏感性和特异性
,
被广泛用于
uu

的分型和
uu
抗体的检测
,
但交叉反应的发生率较高。

4. 2. 2
酶联免疫吸附试验


这种检测抗原方法是以溶解的
uu
膜蛋白为抗原
,
抗原


与检测的血清中特异的抗体结合后
,
再与酶标记的抗人
igg
(
或
igm)
抗体反应通过酶与底物的反应呈现的颜色来定性定量判断结果。
该
法具有高特异性高敏感性较好的可重复性
,

广泛用于
uu
的血清学研究。

4. 3
分子生物学方法

4. 3. 1
脱氧核糖核酸探针


这种检测抗原方法可直接快速
(1
～
2
天
)
检测泌尿生殖


道标本
,
特异性高
,
可以和培养法结合用于
uu
的检测。

4. 3. 2
聚合酶链式反应法


聚合酶链式反应法
( pcr)
是目前最常用的
uu
检测和分


型方法
,
该法具有的优点是
:
高敏感性、高效率、高特异、高速


度、简便。在
uu
检测中常用的用于基因扩增的序列有以下




























































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