贵阳附属医院血细胞分类检测的影响因素

2021年1月29日发(作者：冰点脱毛好吗)
白细胞分类检测的影响因素





【摘要】


目的


探讨影响血液细胞分析仪测 定白细胞分类的因素，
排除假性增高和假性降
低情况，必要时必须血片复核，准确地为临床提供 可靠的诊治依据。


方法


使用
Sysmex
KX-21
血液细胞分析仪及目视显微镜，
同时对
150
例标本进行 检查，
对比分析。
结果


操作
不顺利、标本采取后放置时 间、
温度及上机前标本混匀、
振荡时间、力度等均可影响血液细
胞分析仪正确对白细胞 的分类。
结论


血液细胞分析仪并不能完全代替目视显微镜进行白细
胞分类，
对出现疑有异常白细胞警告报警，
应分析原因，
目视显微镜下白细胞分类或 重新采
血。






【关键词】


血液细胞分析仪；白细胞分类；影响因素





【
Abstract
】


Objective

To discuss the factors that can effect the blood cells analyer to
measure the classification of leukcyte and remove the situation of the pseudo increasing and
decreasing and push a blood piece to examine and provide the clinical doctors with the reliable
indentification of diagnosis and treatment accurately.

Methods


With the Sysmex KX-21
blood cell analyer and the visual microscope,150 blood specimens were examinecl and had the
constrary analysis in one s

Being unsmooth on operation, setting aside the specimens
for a long time after collecting, the temeprature and the mixture of specimens, the duration and
power of osillation and so on are all effect the accurate classification of leukcyte in the blood cells
analyer.

Conclusions


The

blood cells analyer cannot compeletely replace the visual
microscope to examine the classification of leakcyte. When appearing the doubts and warning
reports on the unusual leakcyte, reasons should be analied and classification should be in the
visual microscope or blood specimen should be collected again.




【
Key words
】


blood cells analyzer; classification of leukocyte; the influential factors




外周血白细胞分类，
是白细胞分 析中一项十分重要的内容，
是临床诊断和鉴别诊断的重
要指标之一。近几年来，
随着< br>科学
技术的不断
发展
，各种型号血液细胞分析仪，在各级
医院
检验科已广泛应用，
特别是白细胞自动分类和异常白细胞警告提示，
改变了目视显微镜分类方法，
大大减轻了检验人员的劳动强度，
使工作效率明显提高。但是，
目前很多检 验人员因
对三分类血细胞分析仪性能缺乏足够的认识，
误认为血细胞分析仪分类结果，
完全可以代替
目视显微镜分类结果，而忽视某些结果需要复片的重要性。为此，本文将对日本
S ysmex
公
司生产的
KX-21
血细胞分析仪白细胞分类，
与目视 显微镜复片分类，
对异常白细胞检出率进
行对比分析。找出使用血细胞分析仪检测白细胞分类的 影响因素，现探讨如下。





1

材料与方法





1.1

仪器


血液细胞分析仪
(Sysmex KX-21)
，为日本
Sysmex
公司产品。





1.2

试剂


全部配套试剂和质控液。





1.3

方法


随机抽查门诊患者
150
例，静脉采血 ，
EDTA-K2
抗凝。室温放置
15min
后，
充分混匀，上机测 试。同时推血片一张，室温
自然
干燥，瑞氏染色，目视显微镜下进行白细
胞分类。将两 种方法对异常白细胞检出率进行对比分析。





2

结果





150
例标本 经血液细胞分析仪检测，白细胞分类结果，出现疑有异常白细胞警告报警有
20
例，报警率（阳 性率）
13.3%
。目视显微镜复片，发现有不同程度异常白细胞
12
例，阳 性
率
8.0%
。
20
例阳性标本，目视显微镜复片，其中有
8
例可见有不同程度异常白细胞（有幼稚
细胞
1
例，
杆状核粒细胞增 多
1
例，嗜酸粒细胞增多
2
例，嗜碱粒细胞增多
1
例，异常淋巴细胞
增多
3
例）
，占阳性标本的
40%
。130
例阴性标本（无警告）
，目视显微镜复片，有
2
例发现有
不同程度的异常白细胞，占阴性标本的
1.5%
。其中
1
例为已确诊急性淋巴 白血病在化疗中，
血液中白细胞总数偏低，血细胞分析仪分类淋巴细胞百分比增高，仪器无异常白细胞警 告，
显微镜复片，幼稚细胞
8%
。另
1
例为发热待查儿童，血液中白 细胞总数正常，血细胞分析仪
三分类百分比基本正常，
没有出现异常白细胞警告，
目视 显微镜复片，
异常淋巴细胞达
10%
。

3

讨论





通过以上结果分析，
可以 看出门诊患者，
全血做血液细胞分析，白细胞分类结果，
异常
白细胞警告较高，假阴性 率虽然较低，但也应该引起检验人员的重视。





根 据几年来的工作体会认为，
出现上述问题的主要原因，
一是血液细胞分析仪对白细胞
分 类不同于常规的涂片染色分类
［
1
］
，常规分类除细胞大小外，还要根据细胞 染色反应，核
的形态及染色质的着色情况，
胞质的着色及颗粒才能确定为某种细胞。
三 分类血细胞分析仪
法，
是根据白细胞直方图分类法，
只能反映经溶血剂处理后某种体积 的颗粒，
即某种大小细
胞的多少，
而不能反映某种特殊细胞的变化，
对少见的 正常白细胞和异常细胞不能准确识别，
不难看出电阻法白细胞分类只不过是较粗的筛选方法［
1
］
。另外，手指采血，
由于采血过程
中因操作缓慢、穿刺不顺、组织液混入、 混匀不及时等，均会引起白细胞形态变化。对血细
胞分析仪分类会产生明显影响，
而出现异常白 细胞假报警，
为此，
根据
文献
介绍和大量实验
证明［
2］
，
使用末梢血在血细胞分析仪上进行检测，影响因素较多，有些参数不能得出准确
结果，其重复性及稳定性都不及静脉血标本，应提倡静脉血。





血细胞的检测结果，尤其是血小板（
PLT
）的结果，直接反映试剂的质量 。原则上强调
使用与仪器检测原理相匹配的试剂
［
3
］
。
溶 血剂是血液细胞分析仪试剂中的主要试剂，
能将
红细胞溶解，并能使白细胞的体积发生
规律
性变化。实际工作中发现，
若溶血不完全，
由于
红细胞碎片冲洗不彻底将 引起白细胞计数（
WBC
）假性增高。此外，稀释液的渗透压、离
子强度等亦可影响检 测结果。特别注意的是，
试剂应避免污染，否则，
杂质微粒会使本底增
高，导致最后计 数结果偏高，影响白细胞分类结果的准确性。





抗 凝剂的种类对检测结果影响较大，国际化学标准化委员会（
ICSH
）推荐用
EDTA
二
钾抗凝。另外，
血液和抗凝剂比例也会影响检测质量。血液比例过高时，由于抗凝剂 相对不
足，
血浆中出现微血块的可能性增加。
微凝块可能堵塞仪器影响检测结果，从而无法得出正
确的结果［
4
］
。





在正常情况下，
血液细胞分析仪对血细胞体积的识别有明显的体积界限：
WBC35-450fl
。
根据
Coulter
原理，仪器只识别颗 粒大小而不能识别颗粒的性质。当其体积异常高于或低于
仪器设定的阈值时，
往往会造成误判。 除以上原因外，标本采取后放置时间、温度及上机前
标本混匀、
振荡时间、
力度等均可 影响血细胞分析仪对白细胞分类的准确识别，
如采血后标
本放置时间小于
5min，室温低于
10
℃
，标本混匀不当等，可使白细胞三分类不全及异常白细
胞假报警率增高［
5
］
。




综上所述，
目视显微镜法分类，
应是目前一种重要的检测手段。
血液细胞分析仪法 分类，
是当今
科学
技术
发展
的趋势，其优点是速度快，省时少力，重 复性及稳定性较高，
但易受很
多因素的影响。为此，国内专家多次提出［
2
］
，在各种参数及图形均正常的情况下，结合临
床表现可以做筛选手段。
要坚决反对当前 有些单位使用血细胞分析仪后，
就一律不再做镜下
复检和分类的错误倾向。最好每次标本都先涂 一张血片，以备必要时复检。





【
参考
文献】





1

丛玉隆，王淑娟
.
今日临床检验学
.
北京：
中国
科学技术出版社，
1997
，
60-61.




2

全国血液学自动化分析质量控制研讨会纪要
.
中华 医学检验杂志，
1995
，
18
（
2
）
：
125.




3

朱芸
.
不同血液分析仪试剂使用的比较
.
河北医药，
2000
，
22（
11
）
：
854-855.




4

刘健
.
抗凝剂对血小板及其参数检测结果的影响分 析
.
国际医药卫生导报，
2004
，
10
（
8）
：
64-65.




5

Robert V. Pierre:Peripheral blood film Lab Med
，
2002
，
22
：
279-297.
转贴于

中国论文下载中心










白细胞
分类
是在进行血液显微 镜检察时，将白细胞分类计数的一种医学检测法。血液中的
白细胞共有五种，即中性粒细胞、嗜酸性粒细 胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。它
们各有其生理功能。
长期接触铅、
汞、< br>苯、
放射线等可引起白细胞总数及白细胞分类的改变。
在环境医学研究中白细胞分类是一 项重要的指标。



专业知识介绍



1
单位：百分
比（常用
1.0
表示
100%
）



2
正常值：



（
1
）嗜中性粒细胞（
N
）
：



成人：
0.40
到
0.75


儿童：
0.30
到
0.65


（
2< br>）嗜酸性粒细胞（
E
）
：
0.005
到
0.05


（
3
）嗜
碱性粒细胞（
B
）
：
0
到
0.01


（
4
）淋巴细胞（
L
）
：



成人：
0.20
到
0.45


儿童：
0.30
到
0.56


（
5
）单核细胞（
M
）
：



成人：
0.02
到
0.06


儿童：
0.02
到
0.08






血细胞分析仪的普及使得目前血细胞分析水平大大提高，
它较传统的显微 镜计数分类更加准
确、快捷、
方便，
但目前较为普及的电阻抗法仪器仍存在某些局限性 ，在实际工作中常常会
受到一些异常因素的干扰，我们总结了日常工作中常见的异常因素干扰现象及其处 理对策。


1
、有核红细胞对白细胞计数及分类的影响


典型常用的血细胞分析仪不能完全区分有核红细胞，
当外周血中出现有核红细胞，
白细 胞计
数会出现严重干扰，
表现为白细胞总数假性增高，
具体会反映在白细胞直方图上，
而在分类
淋巴细胞比例会大大增高。
处理有核红细胞干扰最经典的检验地带网方法是涂 片染色显微镜
计数
100
个有核细胞中的有核红细胞数，乘以白细胞总数
(X 109
／
L)
，即为有核红细胞数
(x109
／
L)
，白细胞总数减有核红细胞数即为校正后实际白细胞总数
(x109
／
L)
，再用显微镜
分类排除机器分类干扰，
但其计数的准确性仍然受到技术人员的主观因素影响较大 ，
美国贝
克曼、
亚培和日本东亚公司已陆续推出了一种利用荧光染色与特殊溶血技术相 结合的方法自
动计数
NRBC
的机器，更能有效排除
NRBC
对白细 胞计数及分类的干扰。


2
、红细胞冷凝集对红细胞计数及相关参数的影响


由于个体差异 ，某些人红细胞膜存在一种冷抗体
(
冷凝素
IgM)
在
300C以下反应活跃，
260C
即可发生冷凝集，我们在
13
常工作中通常室温 在
100C
左右易出现红细胞冷凝集现象。血
液冷凝集对检测红细胞数目及其各项参数 造成很大影响，
当红细胞凝集时，
就导致多个红细
胞堆积而一并通过计数小孔，而引致

RBC
、
HCT
的计数减少，直接导致
MCV
、
MCHC
、
RDW
等参数的升高，由于血细胞分析仪在检测血细胞时分两个通 道进行，血色素、白细胞
是经溶解红细胞后从另一通道检测，
血小板与红细胞同一通道，
但血小板的体积比红细胞小
得多，
因此，
血液冷凝集时对它们的检测结果影响不大。
较好的处理方法是血液标本与检测
试剂双重加温，
15
分钟后检测可消除冷凝 集影响。


3
、肝病病人，红细胞抗溶血对血红蛋白
(HB)、白细胞计数及分类的影响


目前，
国内使用的绝大多数自动血细胞分 析仪是容量阻抗法，
一个血细胞流经微孔时，
电极
问的阻抗升高，
一个信号传 到电路上，
阻抗大小与细胞大小一致，
每个大小细胞的信号以检
验地带网直方图形式被 储存分析。白细胞
(WBC)
计数和分类
(DC)
采用特殊溶血素将红细胞< br>(RBC)
溶解并使白细胞膜紧裹在胞核周围，根据淋巴细胞群
(L
Y)35< br>—
90fl
，单核细胞群
(MC)90
—
160 fl
，粒细胞
(GR)160
—
450 fl
大小不同进行三群细胞 分类计数。当红细胞溶解不
全时，
WBC
和
DC
血红蛋白及相关参数 减低
RBC
被误认为
L
Y
，
WBC
、
L< br>Y
％及
L
Y
绝对值
增高，
GR
％假性降低，
GR
绝对值无影响。
其处理对策是参照全国临床检验操作规程进行血
红蛋白测 定和
RBC
、
WBC
计数和分类。


4
、
EDTA-2K
致血小板依赖性凝集使血小板
(PLT)
假性减低以及对相 关参数的影响


因
EDTA
—
2K
致血小板依赖 性凝聚而引起机检血小板计数结果假性偏低，血小板平均体积
(mpv)
明显增高，
血 小板压积
(PCT)
无明显改变，
血小板分布宽度轻度右移，
分布左侧起点升
高
[5]
。血小板计数假性减低可有多种原因，包括采血不畅、未及时混匀、病人本身 有血小
板抗体存在等。当
PLT
不明原因减低，并有血小板直方图异常提示，不仅要及 时进行手工
计数，还要重视涂片观察是否有
PLT
凝集。


5
、小红细胞致干扰血小板
(PLT)
计数


血 小板计数是血液检查的一个主要指标，
由于体积小，
易黏附的特性，
在电阻法血细胞分 析
仪上与一些非血小板颗粒如小红细胞及碎片等颗粒难以区别，
血小板与红细胞在同一通道计< br>数，当
MCV<70fl
，
RDW>14
．
5
％，红 细胞和血小板直方图明显异常，即红细胞直方图出
现两个峰，
血小板直方图尾部明显抬高，证明是小红细胞干扰，
其处理对策是手工计数血小
板并涂片染色观察红细胞形态。