减肥健康食谱生物技术考试综合复习题(全面详细必考题)

2021年1月28日发(作者：圆癣图片)
1
、

生物技术的概念，它是如何发展起来的？

生物技术 （
Biotechnology
）
:
有时也称生物工程，是指人们以现代生命 科学为基础，结合其他基础科学的科学原理，采用先进的科学技术
手段，按照预先的设计改造生物体或加 工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。


2
、

农业生物技术包括哪些内容？

细胞工程

Cell
engineering



基因工程

Genetic
engineering
酶工程

Enzyme
engineering














发酵工程

Fermentation
engineering

蛋白质工程

Protein engineering




3
、

谈谈目前农业生物技术的应用情况？

农业生物技术应用包括三个方面：

一、植物组织培养（细胞工程）
Plant Tissue Culture (Cell engineering)
1
、
种
苗
脱
毒





茎尖培养可以得到无病毒苗木，已成为解决病毒病危害和品 种退化问题的一个重要途径。兰花、草莓、柑橘、土豆等；


脱毒方法：物理脱毒方法
:
热处理生物脱毒方法：茎尖培养；愈伤组织培养；微体嫁接离体培养；珠心组织培养；

化学脱毒方法：在组织培养过程中加入化学物质（三氮唑核苷等）综合脱毒方法：比如热处理与茎尖培养结合等 ；

2
、快速繁殖





操 作过程无菌培养物的建立；
1
茎芽的增殖
2
离体枝条的生根；
3植株的移栽；

3
细胞工程育种
:1
利用培养变异，筛选优良突 变体
2
利用远缘杂交幼胚培养，获得杂种植株，克服其杂交不亲和性
3
利用细 胞融合技术，克服远缘杂交不亲和性
4
倍性育种，缩短育种年限

4
、离体种质保存
:
利用组织培养法，低温保存（－
196
℃）或试管保存，为 保存和抢救濒临灭绝的生物带来希望。


5
、细胞培养生产有用物质（生物 制品）
:
利用细胞培养生产次生物质，如药物、色素、食品添加剂、酶、农药等。

（二）基因工程方面

1
、植物种子品质改良
2
、抗虫、抗 除草剂作物育种
3
、生物能源生产
4
、转基因植物生产疫苗或治疗蛋白
5
、利用秸杆喂养动物发展养殖
业
6
、遗传转化与酿酒工业
7、遗传转化与花卉工业（三）分子标记辅助育种

1
、常用培养基由哪些成分构成？

无机营养物、有机营养物、植物生长调节 物质、其他（凝固剂、其他附属物（活性炭、渗压剂、硝酸银、抗生素）
）

2
、
MS
培养基是如何配制的？注意事项有哪些？

（一）母液的配制





配制母液有两个好处
:
可减少每次配制称量药品的麻烦
;
减少极 微量药品在每次称量时造成的误差
,
一般需准备
5
种母液
:
A
）大量元素母液
:
++



可配成
10
倍母液
,
用时每配
1000ml
培养基取< br>100ml
母液。配制母液时应注意：分别称量；充分溶解；注意混合秩序：
Ca
应最后加
2-
2-
入，与
SO
4
和
HPO
4
错开，以免产生沉淀；混合时要缓慢，边搅拌边混合。

B
）微量元素母液









因含量低，一般配成
100
倍甚至
1000
倍 ，每配
1000ml
培养基取
10ml
或
1ml
，注意的原 则同大量元素。

C
）铁盐母液





必须单独配制，若与其它元素混合易造成沉淀。一般采用螯合铁，即硫酸亚铁与
EDTA
钠盐的混合物。一般扩大
200
倍，每配
1000ml
培养基取
5 ml
，
EDTA
钠盐需用温水溶解，然后与
FeSO
4
液混 合，在
75-80
℃之间让其螯合
1
小时。使用螯合铁的目的：避免沉淀；缓 慢不
断地供应铁。

D
）有机物母液

主要是维生素和氨基 酸类物质，这类物质不能配成混合母液，一定要分别配成单独的母液，浓度为每毫升含
0.1,1,10 mg,
使用时根据
需要量取。

E
）激素





每种激素必须单独配成母液，其浓度为
0.1,

0.5
或
1.0mg/ml,
多数激素难溶于水，配法如下：

?

IAA
、
IBA
、
GA
3
先 溶于少量酒精，再加水定溶至一定刻度
NAA
可溶于热水或少量酒精中，再加水定溶至一定刻度

?

2
，
4-D
不溶于水，可用
1 m ol/L
的
NaOH
溶解后再定容
KT
和
BA
先溶 于少量
1 mol/L HCl
中，再加水定容


?

玉米素先溶于少量
95%
酒精中，再加水定容。

二）培养基的配制

–

分别按配方逐个加入各种母液，包括无机物 、有机物、生长调节物质和其他的特殊补加物。
--
加蒸馏水直至培养基的最
终容积。
--
充分混合之后，用
0.1mol/L
Na0H
和
0.1mol/L
HCl
调节培养基的
pH< br>。一般来说，植物组织培养适合的
pH
值
为
5.8
，当
pH
高于
6
时，培养基将会变硬，低于
5
时，琼脂就不能很好地凝 固（考虑到灭菌后会降低
0.2-0.3
，可以适
当调高
0.2
）< br>。
--
倒出
2
/
3
体积的溶液，加入凝固剂后加热沸 腾；再倒入剩下的
1
/
3
体积的溶液来回颠倒混匀（液体培养
基则不 用加入凝固剂）
；
---
把培养基分装到所选用的培养容器中，每个
150m l
三角瓶约装
40-50ml
。
---
封口
-
灭菌
:
对于不
能用高压灭菌的药品来讲，经过滤灭菌后的药液等到高压灭菌的培养基冷却到 大约
60
℃时，在超净工作台加入到培养
基中，摇匀。

3
、培养基中如何添加抗生素？具体如何操作？

1
、植物组织培养室由哪些部分构成，各有何功能？

一、植物组织培养实验 室的构成
:1
、培养基室
(
培养基制备，灭菌等
) 2
、接 种室（接种、无菌操作等）
3
、培养室（组织、细胞的光照培养、
暗培养、悬浮培养等 ）

（
1
）清洗和贮存玻璃器皿、塑料器皿和其它实验器皿；
（2
）培养基的配制、灭菌和贮存；
（
3
）植物材料的无菌操作；
（
4
）可控温度、光
照、湿度的条件，以便对材料进行体外培养；
（
5
）培养物生长发育过程的显微观察


2
、植物离体培养包含的哪 些仪器设备？简述高温高压灭菌锅和超净工作台的使用步骤？

超净工作台使用方法（放置在清洁干净的房间）

1
、打开电源，调节风速（ 中速即可）
，打开紫外灯杀菌
20-30
分钟；

2
、关闭紫外灯，打开日光灯，使用
70%
酒精擦拭台面；

3
、点燃酒精灯，放置在中央前方处，操作时在酒精灯附近进行；

4
、按照实际情况放置物品（右手边放置镊子、手术刀片等常用器械）
，不必要物品不要放入；

5
、操作时，手臂和手掌用
70%
酒精消毒，主要不要被酒精灯点燃；

6
、外焰灼烧操作器械，待冷却后使用；

7
、操作动作要轻，不要再打开的无菌物品上操作；

8
、操作完后，待材料完全清理后关闭酒精灯，擦拭台面，关闭电源；

(
一
)
洗涤设备








一般应有一个洗涤室
,
专供洗涤及洗净培养瓶的储藏
.
(
二
)
灭菌设备






















































高温高压灭菌




















物理灭菌







干热灭菌



































射线照射灭菌



































过滤灭菌


1.
灭菌种类




































熏蒸灭菌




















化学灭菌



































消毒液灭菌

（三）化学实验设备








主要用于培养基的配制、分装与灭菌，化学试剂的配制，蒸 溜水的生产，接种材料的准备、生化分析等

(
四
)
无菌操作设备








首先应具备一个无菌操作室
,
保持清洁
,
装有紫外灯。室内设备：放 物台、超净工作台、各种接种工具

（五）培养设备








































自动控温控光系统


























培养室








培养架








































摇床









材料培养设备









































调温培养箱


























培养箱









调温调湿培养箱









































光照培养箱

（六）细胞学观察设备



各种显微镜

3、几种常用培养基的主要成分？哪些成分是不能通过高温高压灭菌的？不同类型培养基的主要特点是什么？< br>
主要成分：无机营养物、有机营养成分、植物生长调节物质、其他（如凝固剂）

下列物品不能高温高压灭菌，否则会破坏结构而失去活性：

多糖；
秋水仙素
（
Colchicine
）
；
玉米素
（
Zeati n
）
；
赤霉素
（
GA
）
；
VB1
、
VB12
、
Vc
、
泛酸；
抗生素
（
An tibiotics
）
；
植物提取物
（
Plant extracts
）
；
酶（
Enzymes
）

4
、常用的灭菌消毒方法有哪些？主要用在哪些方面？





接种前必须使材料完全无菌，这是取得植物组织培养成功的根本保证。取材应注意的事项：
< br>1.
从健壮株上取材
,
不要有伤口
2.
严格防治病虫
3.
要在晴天取，最好中午或下午取材
,
不要在雨天、阴天或露水未干时取材料

4.
最好避开选用田间材料，选用无菌苗
5.
若非要用田间材料，最好将 材料种在大棚里
(
无雨水的地方
)
或生长箱里
.
1
、

植物脱毒方法有哪些
?
无病毒苗的繁殖

（一）无病毒苗的繁殖方法
1
、嫁接繁殖
2
、扦插繁殖
3< br>、压条繁殖
4
、匍匐茎繁殖
5
、微型薯块繁殖

2
、植物脱毒效果的检测方法有哪些？


一、直接检查法




二、指示植物法




三、抗血清鉴定法


四、电镜检测法




1
、

植物的体细胞胚胎发生的理论基础是什么？

体细胞胚胎发生：




指从体细胞进行的类胚结构的生 产。体细胞胚是一个二极结构，不物理地附着于原组织，每一个体细胞胚称为胚
状体，它可以同合子胚一 样发育成植株。

2
、什么是细胞全能性？何谓脱分化？何谓再分化？

植物细胞具有全能性
(totipotency)
，也就是说，

植 物体细胞或性细胞，在人为控制的培养条件下都具有再生成新个体的潜能，因而在适宜
的条件下可以被诱 导生长分化形成完整植株。

3
、影响愈伤组织诱导的影响因素有哪些？

4
、体细胞发生和器官发生的区别？

5
、何谓悬浮培养？它有哪些特点和用途？

悬浮培养
(suspension culture)
一般是指把一些小块生长旺盛的 愈伤组织放入液体培养基中，进行振荡培养，使愈伤组织块变成良好分散性
的细胞和小的细胞聚集体的一 种培养方法。

特点：愈伤组织通过悬浮培养能产生大量的比较均一的细胞，而且细胞增殖速度快。

悬浮培养的用途

1.

提供一个相对一致的细胞群体（供生化研究、胚胎发生研究、胚的同步化研究等）
；

2.

能快速吸收外源物质，检查药效；

3.

研究次生代谢、酶诱导、基因表达、抗生素的降解的良好实验体系；

4.

多数悬浮细胞缺乏叶绿体、色素，对酶和次生物质的分离及纯化十分有利；

5.

细胞增殖速度快，适于进行大规模培养；

6.

分离原生质体的良好细胞来源，常用于原生质体的分离；

4
、

体细胞胚胎发生的概念？

体细胞胚胎发生：





在离体组织或细胞培养形成胚状体的过程中，体细胞分裂增殖并顺序通过原胚期， 球形胚期，心形胚期，鱼雷形胚期和子叶期五个
时期，进而形成完整的植株，与整体植物中受精卵的发育 过程极为相似的过程。


5
、

体细胞胚胎发生的方式有哪些？





胚状体产生的方式可以分为以下五种：

1.

胚状体起源于外植体表面已分化的细胞；

2.

在外植体的已分化 的组织中
,
由少数薄壁细胞转变成迅速分裂的细胞
,
形成拟分生组织的细胞团 和小块愈伤组织
,
由这些小块愈伤
组织形成胚状体；

3.

在外植体切口表面形成大量愈伤组织
,
然后从愈伤组织的表面产生胚状体；

4.

在悬浮培养时
,
游离细胞可以生长和分裂产生细胞团
,
这些细胞团长大变成胚性细胞复合体
,
胚性细胞复合体的表面细胞可产生胚
状体；

5.

在个别情况下
,
由单个游离细胞发育成胚状体；

6
、

如何调控体细胞胚胎发生？常用的有哪些方法？

7
、

细胞全能性如何理解？什么条件下植物细胞表现出全能性？植物组织培养的应用包括哪些方面？

细胞全能性：
单个细胞具备发育成为一个完整个体的能力

条件：处于离体状态，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下

应用：
（
1
）快速繁殖和规模化生产

（
2
）培养无病毒植株（
3
）制成人工种子

8
、

愈伤组织概念？愈伤组织形成经历那几个时期？外植体如何选择？什么 是继代？继代的理由？什么是悬浮培养？悬浮培养的特点和
用途？

愈伤组织（
Callus
，
Calli
，
Calluses
）
：原意 指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组织培养中指在人工培养基上由外
植体长出来的一 团无序生长的薄壁细胞。

从单个细胞或外植体上脱分化形成典型的愈伤组织，大致经历三个时 期：起动期、分裂期和形成期；

愈伤组织培养一段时间后必须转移到新鲜培养基上以保持培养 物的继续正常生长，更换一次培养基称一代继代培养

悬浮培养
(suspension
culture)
一般是指把一些小块生 长旺盛的愈伤组织放入液体培养基中，进行振荡培养，使愈伤组织块变成良好
分散性的细胞和小的细胞聚 集体的一种培养方法。

特点：愈伤组织通过悬浮培养能产生大量的比较均一的细胞，而且细胞增殖速度快。

（一）悬浮培养的用途

1.

提供一个相对一致的细胞群体（供生化研究、胚胎发生研究、胚的同步化研究等）
；

2.

能快速吸收外源物质，检查药效；

3.

研究次生代谢、酶诱导、基因表达、抗生素的降解的良好实验体系；

4.

多数悬浮细胞缺乏叶绿体、色素，对酶和次生物质的分离及纯化十分有利；

5.

细胞增殖速度快，适于进行大规模培养；

6.

分离原生质体的良好细胞来源，常用于原生质体的分离；

9
、

器官发生的四种方式？影响器官发生的因素有哪些？

可以把愈伤组织分化出芽、根器 官概括为以下几种方式：单极分化、双极双极、先芽后根、先根后芽

影响因素：
化学因素
:
：生长素促进根分化，分裂素促进芽分化。

2
、物理因素：

光：多数植物需要一个稳定的光周期，多数培养条件是14-16h
光照，
8-10h
黑暗。





温度：不同植物不一样，需要摸索，如烟草和棉花就不一样。

第六章原生质体培养与体细胞杂交

1
、何谓原生质体？原生质体培养有哪些用途？原生质体培养有什么意义？

原生质体（
Protoplast
）
:
指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露 细胞。

原生质体可以用于下面几种研究：

（
1
）用作细 胞杂交服务于作物改良（
2
）用作遗传转化的对象（
3
）研究细胞壁的发生过 程（
4
）筛选突变体（
5
）膜的结构、运输、激素
接受位点等的研究 （
6
）用于分离细胞器和大分子（
7
）种质资源保存

原生质体培养的意义：

（
1
）
、为细胞融合奠定基础（克 服有性杂交不能进行细胞质交流的不足。
）
(2)
、是遗传工程的理想受体（能够直接 摄取外源
DNA
，细胞
器甚至微生物。
）
(3)
、理论研究 （细胞壁再生、细胞膜离子转运、病毒侵染。
）

2
、原生质体分离的方法有哪些？各有什么特点？

分离方法：机械法分离、酶法分离

机械法分离：高度液泡化的细胞；缺点：操作极费力；产量极低；应用的材料受限制；

酶法分离：酶法可在短时间内获得大量原生质体，缺点是：不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的 毒害作用。

3
、以酶法分离原生质体包括哪些步骤？有哪些影响因素？（以烟草叶片为例）

?

第一步：预处理即对烟草植株限制供水。

?

?

?

?

第二步：取幼叶常规表面消毒后在无菌条件下剥去外

表皮切成
4cm
的小块。

第三步：制作混合酶液（纤维素酶
2%
和果胶酶
0.5 %
）并加入的
0.7 mol
甘露醇和
0.1 m mol CaCl
2.
PH5.6
。

第四步：将小块烟叶放入混合酶液
25
℃处理
8~10
小时

第五步：过滤、离心、洗涤（
0.7 mol
甘露醇液含
0.1 m mol CaCl
2

）
。如此
2~3
次、得原生质体。

影响因素：
（
1
）
、材料

选择生长旺盛的植物体幼嫩部分。

（
2
）
、

酶的种类和浓度：纤维素酶（
Cellulase
）
Onozuka R- 10
果胶酶（
Pectolyase
）
Y-23
半纤维素酶（
Hemicellulase
）

对幼叶来说，酶浓度较低：
0.5
％
-1
％纤维素酶，果胶酶
(0.2
％
-0.5
％
);
酶量少。

对愈伤组织、悬浮细胞：纤维素酶、果胶酶的浓度要提高到
1
％或
2
％。酶量大。酶液
PH
值：
5.4-5.8（
3
）
、

酶液渗透压：浓度一般为
0.4-0.8 mol/L
（
4
）
、材料预处理
(
暗处理，预培养和低温 处理
)
（
5
）
、酶解的条件：光：一般黑暗下静止进行；温度：25
℃，兼顾原生
质体及酶活性；时间：几小时到几十小时，太长不利于原生质体的活性， 一般
<24
小时（
6
）
、其它

酶液中加入葡聚糖硫酸钾、
CaCl
2
等盐类，

保护细胞膜、提高原生质体稳定性和活力