岩泽兰生化考研重点知识总结

2021年1月28日发(作者：脚后跟麻是怎么回事)
.
生化考研重点知识总结

第一章

单糖

①
多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数
：
6
②
唾液淀粉酶激活剂
：
Cl

③
几个典型非还原糖
：
蔗糖、糖原、淀粉

④
形成
N-
糖肽键的单糖或衍生物是
：


第二章

油脂

①
几个非饱和脂肪酸双键数：

⑴油酸：
1

⑵亚油酸：
2

⑶亚麻酸：
3
②
人不能自身合成的必须脂肪酸
：

亚油酸、亚麻酸

③
四种脂类转运脂蛋白
：

⑴
CM
：
乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯

⑵
VLDL
：
极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘


油酯

⑶
LDL
：
低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇


⑷
HDL
：
高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇


第三章

氨基酸与蛋白质

①
几种主要氨基酸及三字母缩写

⑴两特殊：
Pro
、
Gly
⑵芳香：
酪（
Tyr
）色（
Trp/Try
，吸光最强
）苯（
Phe
）

⑶八种必需氨基酸：
甲携来一本亮色书，
Met/Val/Lys/Ile/Phe/ Leu/Trp/Thr

⑷侧链为羟基氨基酸：
苏（
Thr
）丝（
Ser
）酪（
Tyr
）

⑸酸性氨基酸：
天（Asp
）谷（
Glu
）
※对应两酰胺：
Asn
、
Gln

⑹碱性氨基酸：
赖（
Lys
）精（
Arg
）组（
His
）

⑺其它：
丙氨酸（
Ala
）

-
;.
.
②
PI
⑴
PI
的计算：
PI=
（
PK1 +PK2
）
/2=(PK1+PKR
COOH
)/2=(PK2+PKRNH2
)/2
⑵
PH
的计算：
PH=PK1+Lg
（
R/R
）
=PK2+Lg
（
R
/R
）

⑶
PH =7
的水中溶蛋白，
PH=6
，则该蛋白
PI<6
：
蛋白溶后
PH
下降为
6
，表明蛋白的
COOH< br>+
-
-
电离出
H
，则产生了
R
，
P H=6>PI
时有
R

③
蛋白二级结构

⑴α螺 旋：
Sn=3.6
13
，存在
Pro
时不形成α螺旋，右手螺旋
⑵β折叠：
同
/
反向，肽键中
H
与
O
成氢键，轴距
0.35nm
⑶β转角：
转角处为
Gly

④
超二级结构：
无规卷曲、结构域

⑤
三级结构：
作用力（
二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力
）

⑥
蛋白结构分析

⑴
N
端分析法：
FDNB
（
Sanger
）、
PITC
（
Edman
）、
DNS-Cl
（丹磺酰氯）、氨肽酶法

⑵
C
端分析法：
羧肽酶法、无水肼解法

※羧肽酶
A
：
不能水解
C
端为
Lys
、
Arg
、
Pro
的
肽键；
羧肽酶
B
：
能水解
C端为
Lys
、
Arg
的肽
键；
C
端倒数第二位 是
Pro
时，
A
、
B
都不能水
解

⑶打开二硫键：
还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）

⑷专一切断：
胰蛋白酶（
Lys
、
Arg- COOH
肽键）；
CNBr
（
Met- COOH
肽键）；胰凝乳蛋白酶
（）；

⑦
显色反应
⑴
Follin
酚：
蓝色，酚基（
Tyr
）、吲哚基（
Trp
），组分（
CuSO
4
+
磷钼酸）

⑵Millon
：
红色，酚基（
Tyr
），组分（
HgNO
3
+Hg
（
NO
3
）
2
）

⑶ 坂口反应：
红色，胍基（
Arg
），组分（α萘酚，
NaClO
）< br>
⑷黄色反应：
黄色，芳香氨基酸，组分（浓
HNO
3
）
< br>⑸双缩脲反应：
紫红色，肽键，多肽，组分（
NaOH+CuSO
4
）

⑹乙醛酸反应：
紫色，吲哚基（
Trp
）

⑧
几种重要氨基酸

⑴提供活性甲基的：
S-
腺苷
Met
⑵形成
N-
糖肽键的：
Asp
⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸：Gly
、
Ala
、
Pro
、
HO- Pro
、
HO-Lys
+
-
;.
.
⑨
蛋白分离纯化技术：
透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；
PI
法、盐析、有机溶 剂
法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析

※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：
机理

△分子运动速度决定因素：
大小、电荷量、形状

※蛋白离子交换层析与洗脱：

※凝胶电泳三效应：
电荷、分子筛、浓度效应

⑩
蛋白含量测定

⑴测
N
：
凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光

⑵测
M
：
沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、
SDS-PAGE
※凯氏定氮：
HNO
2
反应，生成的
N
2
中氨基酸 占
1/2
⑾
其它

⑴分离二硫基的肽段可用：
SDS- PAGE
⑵几个主要氨基酸的
PI
值：

⑶几种重要蛋白：

⑷镰刀贫血病：
Glu
→
Val
，第
6
位

⑸与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：
Cys
（半胱氨酸）


第四章

酶学

①
酶活化中心组成：
结合部位、催化部位

②
计算：
活力单位（
IU
、
Kat
）、比活力（
IU/mg
）、转 化数
/
转化周期、米氏方程

③
各可逆抑制作用的动力学特点：
Km
、
Vmax
※几个 抑制作用：
竞争抑制（
丙二酸对琥珀酸脱氢酶
）；有有机磷（
与丝氨酸羟基共 价不
可逆
）；
CO
、
CN
（
作用于
Cyt aa
3
）；不可逆抑制（
重金属、有机砷、
CN
化物、硫化物、CO
）

④
酶促反应初速度与
[E]
、
T
有关

⑤
以“三点结合”模型作用的酶：
甘油激酶

⑥
酶的专一性

⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：

⑵ 以
O2
为直接氢受体的氧化酶：
VC
氧化酶、细胞色素氧化酶

⑦
别构酶

⑴两独立功能部位：
活性中心、变构中心

;.
.
⑵动力学曲线：
S
型，
其它为双曲线

⑶具有效应：
协同效应、变构效应

※典型代表
—
血红蛋白：
协同效应、波尔效应、变构效应

⑧
酶分离纯化

⑴要求：
纯化倍数高、回收率高

※纯化倍数
=
比活力
/
纯化前总比活力


回收率
=
活力单位数
/
纯化前活力单位数

⑵方法：
同蛋白质

⑨
竞争性抑制剂：
增
[S]
可减弱抑制作用

⑩< br>患尿黑酸症的病人是由于：
缺少尿黑酸氧化酶（
尿黑酸氧化酶遗传缺陷
）


第五章

核酸

①
反向互补配对：
ACG-CGT
（
U
）

②
N-
苷键：
Ψ（
C1
‘
-C5
），嘌呤（N9-C1
‘
），嘧啶（
N1-C1
’
）

③
SnRNA
：
核仁不均一
RNA
，功能（
促进转录、
）

④
核酸分离技术

⑵

凝胶电泳：
三效应、分子运动速度决定因素

见蛋白质

⑵
离子交换层析：
阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：
U
→
G
→
C
→
A

阴离子交换层析，核 苷酸脱下顺序：
C
→
A
→
U
→
G
⑶

亲和层析：
可用亲和层析法分离的核酸：
mRNA
（< br>PolyA
尾
）

⑤
DNA
测序三法：
加减 法（
Sanger
、
1975
），化学断裂法，双脱氧终止法（
Sa nger
、
1977
、
原理
）

⑥
不能形成两性离子的核苷酸是
UMP
：
原因

⑦
cNMP
⑴最重要的
cNMP
：
cAMP
、
cGMP
⑵
cAMP
：
第二信使

⑷
cAMP
分子内有：
环化的磷酸二酯键

cAMP
与
cGMP
：
生物作用并不是完全相反


第六章

分子生物学与基因工程

;.
.
①
基因组学

⑴启动子组成
3
部分：
识别部位（< br>-35
、
CG/CAAT
），结合部位（
-10
、
T ATA
），转录起始点

⑵高度重复序列：
卫星
DNA
、小 卫星
DNA
、微卫星
DNA
⑶原核生物基因重叠类型：

⑷基因家族按特点分三类：
简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家
族

基因家族按组成分三类：

②
DNA
复制

⑴
DNA
复制方式：
线性
（眼型），
环状
【θ（大肠杆菌）、滚环（病毒质粒）、
D
型（线粒

体、叶绿体）】

⑵
DNA
复制需引物：
转录不需引物

※原核
DNA
聚合酶功能：
损伤修复、校正、合成
DNA
③
基因工程酶

⑴
RNase:
RNaseA(
嘧 啶
3
’→
5
’
)
、
RNaseT1
（G
的
3
’→
5
’）、
RNaseT2
（
A
的
3
’→
5
’）

⑵
DNA
连接酶所需能量：
原核
ATP
、真核
NAD+
⑶转移水解
DNA-RNA
中的
RNA
的酶：
RNaseH
、逆转录酶（有
RNaseH
活性）

⑷牛脾磷酸二酯酶水解
RNA
所得产物：
5
’磷酸切开，产生
3
’单磷酸核苷

⑸蛇毒磷酸二酯酶水解
RNA
所得产物：
3
’
-OH
切开，产生
5
’单磷酸核苷

⑹核酸合成酶：
DDDP
（ 依赖
DNA
的
DNA
聚合酶）、
RDDP
（依赖
R NA
的
DNA
聚合酶）、
DDRP
（依赖
DNA
的
RNA
聚合酶）

⑺
RNAPol2
：
RNAPo lB
，合成
hnRNA
，分布在核质中

⑻
RNA
用强碱水解产生：
2
’
-
核苷酸、
3
’
-
核苷酸混合物

⑼限制内切酶切 割特点：
4-8bp
、
6bp
主要，成黏性、平齐末端，成回文序列，甲基化 难切

④
tRNA
结构

⑴含稀有碱基最多：
D< br>（二氢尿嘧啶）、ψ（假尿嘧啶）、
I
（次黄嘌呤）

⑵四环四臂五区 ：
D
臂、
T
ψ
C
臂、氨基酸臂（受体臂）、反密码子臂
⑶二级：
三叶草

⑷三级：
倒
L
⑤
基因表达

⑴
DNA
重组过程中
DNA
连接四方式：
粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加

;.
.
DNA
接头连接法

⑵转位：
三类转位因子【（插入序列
I S
）、转座子（
Tn
）、可转座噬菌体】，转位后遗传

效应（突变、产生新基因、染色体畸变）

⑶转录：
转录
5
’端常见起始核苷酸是
G
、
A
，原核终止子在终止位点前有
Poly U
⑷翻译：
参与肽链延伸的因子（
EF-Tu
、
EF-TS
、移位酶
/G
因子），肽基转移酶催化组分
（
23SrRNA
）， 蛋白合成时生成肽键的能量来自
高能酯键水解

⑸转录抑制剂：
利福平、利迪 链霉素、放线素
D
、α
-
鹅膏蕈碱

⑹翻译抑制剂：
抗生素
（
氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素
）
※机理< br>

干扰素
（
使起始因子
eIF 2
磷酸化失活
），
毒素
（
抑制真核肽链延长
）

⑥
基因工程

⑴基因工程载体：
必备条件
（
自主复 制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位

点少、
M
大可携带大片基因
）


常用载体
（
质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体
改造而来
）

⑵
DNA
文库：
含某种生物体全部被转录成
mRNA
的所有 基因序列

⑦
密码子

⑴起始密码子：
原核
（AUG
、
GUG
、
UUG
，对应
fMet
）< br>真核
（
AUG
，对应
Met
）

※起始tRNA
：
tRNA
、
tRNA
Met
fMet

⑵终止密码子：
UAA
、
UAG
、
UGA
⑶无义密码子：
UAA
、
UAG
、
UGA
⑷线粒体中三种特殊密码子：
UGA-
色氨酸

⑸原核
RF1
识别的密码子：
UAA
、
UAX
※
RF2
识别的密码子：
UAA
、
UGA
⑹密码子性质：
不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性

※摆动 性：
A-
U
，
U-
A
、
G
，
C-
G
，
G-
C
、
U
，
I-
A
、
U
、
C
⑧
其它

⑴
SnRNA功能：
RNA
成熟加工、与染色质结合、调节基因活性

⑵多拷贝基因有：
组蛋白基因、

⑶
3
种印迹法对应检测对 象：
S-DNA
、
N-RNA
、
W-Pro
⑸
T m
的影响三因素：
C
三
G
、盐浓度（
Na
）、DNA
均一性（均一→窄）

Tm=
（
C+G
）
%
×
0.41+69.3

+
;.