隆胸女人细菌革兰氏染色法标准流程

2021年1月27日发(作者：北大男科)
细菌革兰氏染色法

1.

目的

为镜检细菌形态结构提供样本

2.

范围

适用于实验室常见细菌的抹片制备及染色

3.

采样对接人

服务专家针对病死猪进行解剖根据临床症状采集相应的病料。

4.

设备和材料

无菌剪刀、无菌手术刀、无菌试管、无菌生理盐 水、无菌平皿、
三角烧瓶、酒精灯、接种环、打火机、
75%
酒精棉球、一次性手套、
营养琼脂培养基、
5
％石炭酸液；；碘片；

碘化钾；
95
％酒精；

碱性复红粉末；显微镜；试管架；酒精灯；

接种环；药匙；

称量
纸；电子称；待试菌；灭菌蒸馏水；

吸水纸；香柏油；灭菌玻片、
100ul-1000ul
移液器、
100ul-10 00ul
移液吸头、打火机、擦镜纸、
计时器

5
、采样及送样操作

采集
：病料新鲜度→无菌操作采样→有目的进 行采样→保证组织
完整性→独立存放到封口袋中并做好标记。

?
运输
：采集好病料放入保温箱（泡沫纸箱
+
冰袋）中，冷藏即可，
不可冷冻。

样品的标识


要求有样品编号、样品名称、样品来源、样品数量、初步 诊结果
抽样日期及周龄、检测项目等内容。

6
、

细菌分离

在无菌操作条件下，将待测病料（含有典型临床症状部分）
用平板 划线分离法接种于普通营养琼脂培养基或特殊培养基上
（血琼脂、
SS
琼脂、麦康凯琼 脂、
BP
琼脂等），于
37
℃±
1
℃恒
温培养箱中 培养
18-24h
后备用。

7
、

操作步骤

7.1
细菌抹片的制备

1
、玻片准备
：载玻片应清晰透明，洁净而无油渍，滴上水后，
能均匀展开，附着性好。如有残余油迹，可按 下列方法处理：

2
、

滴上
95
％酒精
2
～
3
滴，用洁净纱布揩擦，然后在酒精灯
上轻轻脱过几次。

3
、

若上述方法未能去除油渍可再滴
1
～
2
滴冰醋酸，用纱布擦
净，再在酒精灯上轻轻通过。

4
、抹片
：所用材料不同，抹片方法亦有差异

5
、

液体材料（如液体培养物、血液、渗出液、乳液）可直接用
灭 菌接种环取一环材料与玻片的中央均匀涂成适当大小的薄层。

6
、

不是液体材料（如菌落、脓、粪便等）则应先用灭菌接种环
取少量生理盐水或蒸馏水，置与玻片中央， 然后再用灭菌接种环取
少量材料，在液滴中混合，均匀涂布成适当大小的薄层。

7
、

组织脏器材料，先用镊子夹持局部，然后以灭菌或洁净剪刀
取 一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印或涂成一薄片。

8
、

如有多个样品同时须要制成抹片，只要染色方法相同，亦可
以在同一张玻片上有序的排好，做多点涂抹， 或者先用蜡笔在玻片
上划分成若干小方格，每方格涂抹一种样品，需要保留的样本片，
应贴好标 签，注明菌名、材料、染色方法和制片日期等

9
、

上述涂片应让其自然干燥。

10
、

固定：有两类固定方法

火焰固定
：将干燥好的抹片，使涂抹面向上，以其背面在酒

精灯上来回通过数次，略作加热（但不能太热，以不烫手背为
度）进行固定。


化学固定
：血液、组织、脏器等抹片要作吉姆萨染色时，不

用火焰固定，而应用甲醇固定，可将已干燥的抹片侵入甲醇中

2
～
3
分钟，取出晾干：或在玻片上滴加数滴甲醇使其作用
2
～
3
分
钟后，自然挥发干燥，抹片如作瑞氏染色，则不必先作固定。染料
中含有甲醇，可以达到固定的目的。

7.2
染色具体操作：