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精子活力测定

作者:陕西保健网
来源:http://www.xapfxb.com/yuer
更新日期:2021-01-27 00:51

怎么劝架-某天女孩喝醉了

2021年1月27日发(作者:米景贤)
实验三



精液品质的感观检查精子活率、

密度检查



一、实验目的


掌握检查精子密度、活率的方法;熟悉感观检查精液品质的方法。



二、实验材料


1.
精液


选用牛、羊、猪、马、犬、兔任意一种动物的新鲜精液。

2.
药械用品


显微镜、显微镜保温箱(或显微镜恒温台)
、载玻片、 盖玻片、搪瓷盘、
温度计、滴管、擦镜纸、纱布、蒸馏水、
3%

0.9%< br>氯化钠溶液、
2%
煤酚皂溶液、
1/3000
新洁尔灭溶液、
75%
酒精。

3.
其他


精子密度挂图及有关图表。


三、实验内容


(一)精液的感观检查

观察测定下列各项结果并记入登记表内。

1.
测定射精量


将采得的精液倒入有刻度的试管或集精杯中, 测量其容量。各家畜的
射精量平均为:马
70

30

10 0

ml
,驴
50

10

80

ml
,牛
4

2

10

ml
,羊
1.0

0.7

2.0

ml,猪
250

150

500

ml


2.
色泽、气味观察


观察精液的色泽并嗅闻气味。

3.
云雾状的观察

< br>观察牛、羊精液翻腾滚动的云雾状态,并按以下符号记入表内,云
雾状显著者以“
+++
”表示,有云雾状者以“
++
”表示,云雾状不明显或无云雾状者以“
+
表示。

(二)精子密度检查及活率评分

1.
精子的密度



1
小滴精液在清洁的载玻片上,加上盖玻 片,使精液分散成均匀一
薄层,不得存留气泡,也不能使精液外流或溢于盖玻片上,置于显微镜下放大< br>400

600

观察,按下列等级评定其密度。

密——在整个视野中精子密度很大,
彼此之间空隙很小,
看不清楚各个精子运动的活动
情况,这一级属于“密”
,每毫升精液含精子数约在
10
亿个以上,登记时记以“密” 字。

中——精子之间的空隙明显,
精子彼此之间的距离约有一个精子的长度,
有些精子的活
动情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”
,每毫升所含精子数约在< br>2

10
亿个之
间,登记时记以“中”字。

稀—— 精子分散于视野内,
精子之间的空隙超过一个精子的长度,
这种精液每毫升所含
精子是 在
2
亿以下,登记时记以“稀”字。

牛精子密度示意图

A:
密;
B.
中;
C.



2.
精子的活率评定


必须于采精后立刻在
22

26
℃的实验室内进行,
最好是在
37
℃保
温箱内进行 ,在评定精子活率的同时也可以测定精子的密度。

用玻璃棒蘸取
1
滴原精液 或经稀释的精液
(马、猪精液的精子密度低,
可以不稀释,而
牛、羊精液的精子密度大 ,须用
0.9%
氯化钠溶液或其他稀释液进行稀释,其温度须与精液
温度相近)
,滴在载玻片上,加上盖玻片,其间应充满精液,不使气泡存在,也可滴在盖玻
片上翻放于凹玻片的凹 窝上,置于显微镜下放大
250

400
倍检查。注意显微镜的载物台须放平,最好是在暗视野中进行观察。









悬滴法检查精子活率
精子的活动有
3
种类型 ,即直线前进运动、旋转运动和振摆运动。评价精
子的活率是根据直线前进运动精子数的多少而定的,即 :

呈直线前进运动精子数
精子活率
?
?
100
%

总精子数
目前评定精子活率等级的方法有两种:

十级制——在显微镜视野中 估测直线前运动精子所占全部精子的百分数。
直线前进运动
的精子为
100%
者评为
1.0
级;
90%
者评定为
0.9
级;无直线前进运 动精子的精液为“
0
”级。

牛、羊的精液中由于副性腺分泌物少,精子密度 大,因此,要求精液达到


0.6”
(即
密度为“密”
, 活率为“
0.6
”级)及“中
0.8
”级以上才能作为合格的精液。而马、猪 的精
液中副性腺分泌物多,精子密度小,因此正常的精液定为“中
0.6


“稀
0.8
”以上的等级。





1


种公畜精液品质检查登记表


畜别

畜号

采精时间

(年月日)

射精量


ml


色泽

气味

云雾状

密度

活率











实验四



精子数量计算和畸形率的测定



一、实验目的


1.
掌握测定每毫升精液中所含精子数的方法,以及测定精子畸形率的操作要点。

2.
测定每一头份冷冻精液内有效精子数,以确定是否符合输精要求。


二、实验材料


1.
精液


任一种公畜或雄性动物的新鲜精液或冷冻精液。

2.
器械


显微镜、载玻片、盖玻片、红细胞及白细胞稀释管、血(色素)吸管、血细
胞计数盘 、光电比色计、
5ml
试管、
1ml

2ml
吸管、玻棒、 染色缸、染色架、玻片镊、纱
布。

3.
几种染色液配方


1

0.5%
龙胆紫


0.5g







96%
酒精


100ml

2
)酒精固定液

40%
甲醛(福尔马林)


12.5ml






96%
酒精


87.5ml

3
)凡那他氏镀银染色液



胡氏固定液

福尔马林


2ml







醋酸


1ml







蒸馏水


100ml


染色液

单宁酸


5g








石炭酸


1g








蒸馏水


100ml


硝酸银溶液

硝酸银


0.25g











蒸馏水


100ml

4
)威廉斯染色液



品红原液

品红


10g








96%
酒精


100ml


伊红原液


将伊红溶于酒精中制成饱和溶液。



染色液

品红原液


10ml









5%
石炭酸


100ml
取混合液


50ml









伊红原液


25ml
注:充分混合,至少放置
14
天后,经过滤可用于精子染色。



美蓝原液

美蓝


10g










酒精(
96%



100ml
4.
畸形精子形态图、血细胞计算盘构造图

三、实验内容


(一)精子数量测定

1.
血细胞计算盘测定法


1
)清洗器械


先将血细胞计算盘及盖玻片用蒸馏水冲 洗,使其自然干燥。血吸管或
红细胞和白细胞稀释管先用蒸馏水冲洗,再用
95%
酒精 清洗,最后用乙醚清洗。试管及吸
管洗净后须经烘干。


2
)精液的稀释




1ml
吸管准确吸取
3% NaCl 0.2ml

2m l
,注入小试管中。根据稀释倍数的要求,
再用血吸管吸出
10
μ
l

20
μ
l NaCl
溶液弃去。



用血吸管或红、白细胞稀释管吸取精液至刻度
10
μ
l

2 0
μ
l
处。



用纱布擦去吸管尖端附着的精液,将精液注入到小试管中。



用拇指按住小试管口,振荡
2

3min
使其混合均匀。


3
)精子的计数



将擦洗干净的计算盘置于显微镜载物台上,在计算室上盖上盖玻片。


< br>将试管中稀释好的精液,
滴一滴于计算室上盖玻片的边缘,
使精液自动渗入计算室。注意不要使精液溢出于盖玻片之上,
也不可因精液不足而致计算室内有气泡或干燥之处,

果出现有上述现象应重新操作。



静置
3min
后以
400

600
倍显微镜检查。


统计出计算室的四角及中央共
5
个中方格即
80
小方格的精子数。



统计每个小方格内的精子,只数小方格内压在左线和上线的精子。




5
个中方格(
80
个小方格)所统计的精子 数(
X
)代入下列公式即得出每毫升的
精子数。

X
?400
?
10
?
稀释倍数
?
1000
?
每毫升精液所含精子数
?
X
?
50000
?
稀释倍数
80

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