怎么劝架-某天女孩喝醉了
实验三
精液品质的感观检查精子活率、
密度检查
一、实验目的
掌握检查精子密度、活率的方法;熟悉感观检查精液品质的方法。
二、实验材料
1.
精液
选用牛、羊、猪、马、犬、兔任意一种动物的新鲜精液。
2.
药械用品
显微镜、显微镜保温箱(或显微镜恒温台)
、载玻片、 盖玻片、搪瓷盘、
温度计、滴管、擦镜纸、纱布、蒸馏水、
3%
和
0.9%< br>氯化钠溶液、
2%
煤酚皂溶液、
1/3000
新洁尔灭溶液、
75%
酒精。
3.
其他
精子密度挂图及有关图表。
三、实验内容
(一)精液的感观检查
观察测定下列各项结果并记入登记表内。
1.
测定射精量
将采得的精液倒入有刻度的试管或集精杯中, 测量其容量。各家畜的
射精量平均为:马
70
(
30
—
10 0
)
ml
,驴
50
(
10
—
80
)
ml
,牛
4
(
2
—
10
)
ml
,羊
1.0
(
0.7
—
2.0
)
ml,猪
250
(
150
—
500
)
ml
。
2.
色泽、气味观察
观察精液的色泽并嗅闻气味。
3.
云雾状的观察
< br>观察牛、羊精液翻腾滚动的云雾状态,并按以下符号记入表内,云
雾状显著者以“
+++
”表示,有云雾状者以“
++
”表示,云雾状不明显或无云雾状者以“
+”
表示。
(二)精子密度检查及活率评分
1.
精子的密度
取
1
小滴精液在清洁的载玻片上,加上盖玻 片,使精液分散成均匀一
薄层,不得存留气泡,也不能使精液外流或溢于盖玻片上,置于显微镜下放大< br>400
—
600
倍
观察,按下列等级评定其密度。
密——在整个视野中精子密度很大,
彼此之间空隙很小,
看不清楚各个精子运动的活动
情况,这一级属于“密”
,每毫升精液含精子数约在
10
亿个以上,登记时记以“密” 字。
中——精子之间的空隙明显,
精子彼此之间的距离约有一个精子的长度,
有些精子的活
动情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”
,每毫升所含精子数约在< br>2
—
10
亿个之
间,登记时记以“中”字。
稀—— 精子分散于视野内,
精子之间的空隙超过一个精子的长度,
这种精液每毫升所含
精子是 在
2
亿以下,登记时记以“稀”字。
牛精子密度示意图
A:
密;
B.
中;
C.
稀
2.
精子的活率评定
必须于采精后立刻在
22
—
26
℃的实验室内进行,
最好是在
37
℃保
温箱内进行 ,在评定精子活率的同时也可以测定精子的密度。
用玻璃棒蘸取
1
滴原精液 或经稀释的精液
(马、猪精液的精子密度低,
可以不稀释,而
牛、羊精液的精子密度大 ,须用
0.9%
氯化钠溶液或其他稀释液进行稀释,其温度须与精液
温度相近)
,滴在载玻片上,加上盖玻片,其间应充满精液,不使气泡存在,也可滴在盖玻
片上翻放于凹玻片的凹 窝上,置于显微镜下放大
250
—
400
倍检查。注意显微镜的载物台须放平,最好是在暗视野中进行观察。
悬滴法检查精子活率
精子的活动有
3
种类型 ,即直线前进运动、旋转运动和振摆运动。评价精
子的活率是根据直线前进运动精子数的多少而定的,即 :
呈直线前进运动精子数
精子活率
?
?
100
%
总精子数
目前评定精子活率等级的方法有两种:
十级制——在显微镜视野中 估测直线前运动精子所占全部精子的百分数。
直线前进运动
的精子为
100%
者评为
1.0
级;
90%
者评定为
0.9
级;无直线前进运 动精子的精液为“
0
”级。
牛、羊的精液中由于副性腺分泌物少,精子密度 大,因此,要求精液达到
”
密
0.6”
(即
密度为“密”
, 活率为“
0.6
”级)及“中
0.8
”级以上才能作为合格的精液。而马、猪 的精
液中副性腺分泌物多,精子密度小,因此正常的精液定为“中
0.6
”
、
“稀
0.8
”以上的等级。
表
1
种公畜精液品质检查登记表
畜别
畜号
采精时间
(年月日)
射精量
(
ml
)
色泽
气味
云雾状
密度
活率
实验四
精子数量计算和畸形率的测定
一、实验目的
1.
掌握测定每毫升精液中所含精子数的方法,以及测定精子畸形率的操作要点。
2.
测定每一头份冷冻精液内有效精子数,以确定是否符合输精要求。
二、实验材料
1.
精液
任一种公畜或雄性动物的新鲜精液或冷冻精液。
2.
器械
显微镜、载玻片、盖玻片、红细胞及白细胞稀释管、血(色素)吸管、血细
胞计数盘 、光电比色计、
5ml
试管、
1ml
及
2ml
吸管、玻棒、 染色缸、染色架、玻片镊、纱
布。
3.
几种染色液配方
(
1
)
0.5%
龙胆紫
0.5g
96%
酒精
100ml
(
2
)酒精固定液
40%
甲醛(福尔马林)
12.5ml
96%
酒精
87.5ml
(
3
)凡那他氏镀银染色液
①
胡氏固定液
福尔马林
2ml
醋酸
1ml
蒸馏水
100ml
②
染色液
单宁酸
5g
石炭酸
1g
蒸馏水
100ml
③
硝酸银溶液
硝酸银
0.25g
蒸馏水
100ml
(
4
)威廉斯染色液
①
品红原液
品红
10g
96%
酒精
100ml
②
伊红原液
将伊红溶于酒精中制成饱和溶液。
③
染色液
品红原液
10ml
5%
石炭酸
100ml
取混合液
50ml
伊红原液
25ml
注:充分混合,至少放置
14
天后,经过滤可用于精子染色。
④
美蓝原液
美蓝
10g
酒精(
96%
)
100ml
4.
畸形精子形态图、血细胞计算盘构造图
三、实验内容
(一)精子数量测定
1.
血细胞计算盘测定法
(
1
)清洗器械
先将血细胞计算盘及盖玻片用蒸馏水冲 洗,使其自然干燥。血吸管或
红细胞和白细胞稀释管先用蒸馏水冲洗,再用
95%
酒精 清洗,最后用乙醚清洗。试管及吸
管洗净后须经烘干。
(
2
)精液的稀释
①
用
1ml
吸管准确吸取
3% NaCl 0.2ml
或
2m l
,注入小试管中。根据稀释倍数的要求,
再用血吸管吸出
10
μ
l
或
20
μ
l NaCl
溶液弃去。
②
用血吸管或红、白细胞稀释管吸取精液至刻度
10
μ
l
或
2 0
μ
l
处。
③
用纱布擦去吸管尖端附着的精液,将精液注入到小试管中。
④
用拇指按住小试管口,振荡
2
—
3min
使其混合均匀。
(
3
)精子的计数
①
将擦洗干净的计算盘置于显微镜载物台上,在计算室上盖上盖玻片。
②
< br>将试管中稀释好的精液,
滴一滴于计算室上盖玻片的边缘,
使精液自动渗入计算室。注意不要使精液溢出于盖玻片之上,
也不可因精液不足而致计算室内有气泡或干燥之处,
如
果出现有上述现象应重新操作。
③
静置
3min
后以
400
—
600
倍显微镜检查。
④
统计出计算室的四角及中央共
5
个中方格即
80
小方格的精子数。
⑤
统计每个小方格内的精子,只数小方格内压在左线和上线的精子。
⑥
由
5
个中方格(
80
个小方格)所统计的精子 数(
X
)代入下列公式即得出每毫升的
精子数。
X
?400
?
10
?
稀释倍数
?
1000
?
每毫升精液所含精子数
?
X
?
50000
?
稀释倍数
80
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