国家免费孕前优生健康检查-
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由于
HPV
不能在体外细胞培养,
故不能用简便 的血清血检测进行
HPV
的诊断和分型。
临床上
用于检测
HPV的方法包括细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和
PCR
等,其中以< br>PCR
方法的敏感性最高,是目前应用最多
感染的
HPV
型别、
含量、
持续时间决定病变的发展与预后
,
是进行
HP V
检测的主要内容。
目前主要是通过应用分子生物学方法进行
HPV DNA
的检测。
1
、现有的
HPV
实验室主要检测手段
:
①
聚合酶链反应
(PCR, Polymerase Chain Reaction):
扩增位于两段已知序列之间的
DNA
片断的方法。该法有较高的敏感度
,
可 进行
HPV
分型
,
缺点是对实验室环境要求较高
,
容
易发生样本间的交叉污染
,
从而导致假阳性率高。
②
核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度
,
还可以进行
HPV
DNA
的分型
,
各种核酸杂交检测方法有一定的
优缺点。
A
核酸印迹原位杂交
适用于
HPV
分型和
HPV DNA
分子量鉴定
,
虽然灵敏度高
,
但因操作复杂
,
需要新鲜组织标
本
,
不便在临床上大规模使用。
B
斑点印迹
其敏感度和 特异性均低于核酸印迹原位杂交法
,
虽然经济实用
,
但实验过程存在有放射< br>性污染
,
是环保所不能轻视的问题。
C
原位杂交(
in situ hybridization
,一种核酸杂交 技术,可用来测定基因或特定核
苷酸序列在核酸分子的所在部位,检测重组体
DNA
)
通过非放射性探针对石蜡组织进行检
测
,
能作定位检测
,
假阳性率低
,
但灵敏度不高
,
大大降低了临床使用价值。
D
杂交捕获法
(Hybrid Capture)
杂交捕获试 验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。
首先使
DNA
双链释放并分解
成为可以杂交的核苷酸单链
,DNA
单链与
RNA
组合探针结合为
R NA-DNA
杂合体
,
特异性抗体将
RNA- DNA
杂合体捕获
,
偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与
RNA-DNA
杂合体结合
,
碱性磷酸酶使酶
底物发光
,
根据光的强弱可确定碱性磷 酸酶的含量
,
从而确定
RNA-DNA
杂合体的含量。
能检测
13
种高危型
HPV,
包括
HPV16
、
18
、
31
、
33
、
35
、
39
、
45
、
51
、
52
、
56
、
58
、< br>59
、
68
。
各种检测方法的比较
各种检测方法的比较
.
精品文档
方法学
细胞学(
Cytology
)
斑点印迹(
Dot blot
)
核酸印迹原位杂交(
southern
灵敏度
低
中
高
特异性
低
中
高
技术特点
操作容易,成本较低,准确度较差
有一定放射性
标准、麻烦,不宜大规模使用
blot
hybridization
)
原位杂交(
In Situ
高
hybridization
)
无放射性,易使用, 高、低危型间有交叉反
杂交捕获(
HC
、
HC2
)
高
中
应,且不能分型
取材容易,但目前已应 用试剂的只能检测少
普通多聚酶链反应(
PCR
)
很高
中
数单一型别,如
6
、
11
、
18等,且由于技术上的问
题存在假阳性
中
蜡块组织包埋内检测
HPV
2
、最新推出的
HPV
的实验室检测技术
高灵敏度高危型
HPV
分型多色荧光实时
PCR
试剂:
为欧洲著名分子生物学研究机 构专门
针对宫颈癌筛查而全新设计的高危型
HPV
分型多色荧光实时
PCR< br>检测试剂,
可同时检测高危
型中最主要的
16
、
18
、
31/33
、
35/45
型。
了解宫颈疾病 人乳头状瘤病毒(
HPV
)感染患者中
HPV
亚型分布情况及高危型
HPV
的年
龄分布。
方法采用专利
Invader
酶切信号放大法,
利用
Cervista HPV HR Cervisat
核酸杂交
基因分型 试剂检测宫颈脱落细胞
HPV
的
14
个亚型
DNA
。
HPV
型组
A5/A6
A7
A9
亚型
51
,
56
,
66
18
,
39
,
45
,
59
,
68
16
,
31
,
33
,
35
,
52
,
58
备注
.
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