_实验室常用血液抗凝剂的特点及应用

2021年1月24日发(作者：劳培)


实验室常用血液抗凝剂的特点及应用



在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。而抗
凝剂种类较多，< br>实际应用中要根据不同的需要进行选择，
才能获得理想的效果。
实
验室中常用的 抗凝剂有
肝素
、
乙二胺四乙酸盐（
EDTA
盐）、枸橼酸盐、草酸盐
等
4
种，现将它们的特点及应用分别叙述如下：


一、
肝素



抗凝是用于血液化学成分检测的首 选抗凝剂。肝素是一种含有硫酸基团的粘多
糖，是分散相物质平均分子质量为
15000
。其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结
合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，
加速凝血酶
-
凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。
此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ） 来抑制凝血酶。常用肝素抗
凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾 盐会
增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为
10.0< br>～
12.5 IU/ml
血液。

肝素对血液成分干扰较少，
不影响红细胞体积，
不引起溶血，
适用于做红细胞渗透
性试验、血气、血浆渗透量、红 细胞压积及普通生化测定。但肝素具有抗凝血酶作
用，不适合做血凝试验。另外，
肝素过量可引 起白细胞聚集和血小板减少，所以不
适合做白细胞分类和血小板计数，
更不能用于止血检验。< br>此外，
肝素抗凝血不能用
于制作血涂片，因为
Wright
染色后出现 深蓝色背景，影响显微镜减产。肝素抗凝
血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。


二、
乙二胺四乙酸盐
(EDTA
盐
)


EDTA
能与血液中
Ca
2+
结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液 不能发生凝固。
EDTA
盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是
E DTA-K
2
，其
溶解度最高，抗凝速度最快。
EDTA
盐通常配成 质量分数是
15%
的水溶液，每
ml
血液加
1.2mgEDTA,< br>即每
5ml
血液加
0.04ml
15%EDTA
溶液。EDTA
盐可在
100
℃
下干燥，抗凝作用不变。


此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血
小板的聚集，适用于一般血液学检测。
但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造
成细胞皱缩。
EDTA
溶液
pH
与盐类关系较大，低
pH
可使细胞膨胀。
EDTA-K
2
可
使红细胞体积轻度膨胀，
采血后短时间内平均血小板体积非 常不稳定半小时后趋于
稳定。
EDTA-K
2
使

Ca2+
、
Mg
2+
下降，
同时使肌酸激酶、
碱性磷酸酶降 低，
EDTA-K
2
的最佳浓度为
1.5mg/ml
血液，如果血少 ，中性粒细胞会肿胀分叶消失，血小板会
肿胀、崩解，产生正常血小板的碎片，使分析结果产生错误。< br>EDTA
由于能抑制或
干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合，
不适于血 凝和血小板功能检测
，
也
不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外，
ED TA
能影响某些酶的活性和抑制
红斑狼疮因子，故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血 涂片。

三、
枸橼酸盐



枸橼酸盐主 要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的
Ca
2+
结合形成螯合物，
使Ca
2+
失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有
Na< br>3
C
6
H
5
O
7
·
2H
2
O
和
2Na
3
C
6
H
5
O
7
·
11H
2
O
两种晶体，
通常用前者配成
3. 8%
或
3.2%
的
水溶液，与血液按照
1:9
体积混合。< br>

大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定， 并且
对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，
可用于血小板功能分析。
枸橼酸钠细
胞毒性较小，也是输血中血液保养液的成分之一。但是，
枸橼酸钠
6mg
才能 抗凝
1ml
血液，碱性强，不适用于血液化验和生化测验。

四、草酸盐


草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原 理是溶解后解离的草酸根
与标本中的
Ca
2+
形成草酸钙沉淀，使
C a
2+
失去凝血功能，凝血过程被阻断。常用




的草酸盐抗凝剂种类有草酸钠、
草酸钾和草酸铵，
草酸钠的常用浓度为
O.1 mol/L
，
与血液按
1:9
比例使用。但是，高浓度
k
+
或
Na
+
易使血细胞脱水皱缩，而草酸铵则
可使血细胞膨胀，
故测定血细胞比容时用草酸铵与草酸钾或草酸钠两者适当比例混
合的抗凝剂，
恰好不影响红细 胞的形态和体积。
常用于血液生化测定，
但不适用于
K
+
、
Ca
2+
的测定。由于生成草酸钙沉淀，红细胞会出现锯齿状，白细胞出现空泡，
淋 巴细胞及单核细胞会变形，
不宜做血片检查。
草酸盐可使血小板聚集，
并影响白
细胞形态，不能用于白细胞和血小板分类计数。


主要参考文献：
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附录四

常用抗凝剂的配制及用法

2009-06-02 17:32




附录四

常用抗凝剂的配制及用法


在医学实验中常需动 物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的
抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度 大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素

（
1
）肝素抗凝作用原理

肝素的抗凝作用很强
,
作死亡复苏等实验时
,
常用它作动物全身抗凝剂，肝素
的抗凝作用主要是抑制凝血致 活酶的活力，
阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等
作用，从而使血液不发生凝固。

（
2
）配制和用量

纯的肝素
10mg
能抗凝
65~125 ml
血液
(
按
lmg
等于
125U
，
10~20U
能抗
1 ml
血液计
)
。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效< br>果也不相同。
一般可配成
1
％肝素生理盐溶液，
用时取
0．
1
毫升于试管内，
100
℃
烘干，每管能抗凝
5～
10ml
血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，
直接抽血至注射器 内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，
一般剂量为：
大
白鼠
2
．
5
～
3
．
0mg/200
～
300g< br>体质量，兔
10mg
／
kg
体质量，狗
5
～
10mg
／
kg
体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，
因此当用盐析法 分离蛋白质作蛋白质各部分
的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素
1250 0U
，相当于
10
0mg
。

二、草酸盐合剂

（
1
）原理

草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩 小，因此草酸铵与草
酸钾按
3
：
2
比例配置，可使血细胞体积保持不 变；加福尔马林则能防止微生物
在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。





（
2
）配制方法及用量

草酸铵< br>1
．
2g
、草酸钾
0
．
8g
、福尔马林1
．
0ml
、蒸馏水加至
100ml
每毫升血
加草酸盐 合剂
0
．
1ml(
即相当草酸铵
1
．
2mg
，草酸钾
0
．
8mg)
。根据取血量将计
算好的草酸盐剂量加入玻 璃容器内烤干备用。如取
0
．
5ml
于试管，烘干后每管
可使
5ml
血不凝固。

（
3
）注意事项

草酸的作 用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用
时注意加的量应适中，
不能过 多，
以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血
液内钙或钾的测定，也不能用于血液 非蛋白氮测定。

三、枸櫞酸钠

常配成
3
～
5%
水溶液。也可直接加粉剂，每毫升血加
3
～
5mg
，即可达到抗凝< br>目的。

枸櫞酸钠可使钙失去活性，防止凝血。但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。
仅可用于红细胞沉降速度测定。
急性血压测定实验所用枸櫞酸
钠 为
5
～
6
％溶液。

四、草酸钾

（一）原理和注意事项

草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中 的钙离子结合，
形成不溶解的草酸钙，
使血液不凝固。
常用于非蛋白氮测定，
但不适用于测定钾
和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。

（二）配制及使用方法

取草酸钾
10g
，
加蒸馏水少许使 溶解，
再加蒸馏水至
100ml
。
配制成
10
％水溶
液，如每管加
0.1ml
则可使
5~10ml
血不凝。一般如作微量检验， 用血量较少，
可配制成
2
％溶液，如每管加
0
．
1ml可使
1~2ml
血液不凝。

五、乙二胺四乙酸二钠盐（
EDTA
）

EDTA
对血液中 钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。每
0.
8mg
可抗凝
1ml
血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多
种抗凝。




你