干细胞治疗工作流程图

2021年1月24日发(作者：桑结加)
干细胞治疗工作流程


脐带血临床采集流程

干细胞是一 种未分化的细胞，具有自我更新、分化、发育再生各种组织器
官和人体的潜在功能。

脐带血广泛的应用前景备受关注，脐带血本属于废弃物，但是医学技术的
进步使得它的价值得到了空前的 提升。
1989
年，法国的鲁克罗曼教授用
HLA
相合的同胞脐带血干细胞进 行移植，成功地治疗了一例遗传性疾病—

可尼贫
血症，之后短短的
15年的时间，医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善
了多种疾病，包括
:
血液系 统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑
部疾病、肿瘤、糖尿病等。现在在儿童的干细胞移植方 面，由于可以存在
1-2
个
HLA
位点的不配型，免疫排斥反应小等原因，脐 带血干细胞已成为治疗一些
重大疾病的有效手段。同时，干细胞的进一步开发，还可用于抗衰老、器官修
复、美容等保健领域。干细胞技术和临床应用的飞速发展，给人类的健康带来
了新的希望和保障 。但是作为采集脐带血最主要的工作人员，我们所需要的操
作是非常简单的，但是对于术中操作之外，我 们还是会遇到以下的问题。解决
这些问题，我们才能放心的采集，存储，备用。但是真正合法，安全，便 捷的
让脐带血的干细胞移植到有需要的患者体，需要按以下流程操作：

脐带血采集条件：

以初产妇、年龄在
45
岁以或
35岁以经产妇，身体健康者为宜。

脐带血安全流程

1
、传染 病检查：孕妇在产前要做好身体检查。这些检查包括
:
肝功能是否
正常，有无梅毒螺旋 体，艾滋病病毒
(HIV )
、乙型肝炎病毒
(HBV )
、丙型肝炎
病毒
(HCV)
等病原体检测。
如果其中有一样是阳性的话，就不要再进行采集了。

2
、采集和储存的无菌观念：在自然分娩的情况下，一定要注意消毒。被
厌氧菌和需氧菌污染，检测为阳性时都不能储存和使用。在脐血被采集后，应
该尽快保存在
2- 8
℃的恒温箱中，并远离辐射源，不要让
X
射线照到。这样的脐
带血经科学实 验证实，放置
24
小时或在
-23
℃以下
48
小时，其中的 干细胞的活
性是没有明显影响的，但最长不应该超过
72
小时。

采集流程

何种方法采集脐带血更好些呢？
Solves
[5]< br>等证实了剖宫产情况下，以下两
种采集方法体采集法对得到的脐带血除血细胞比容及血小板外，< br>其他各项没有
明显不同。

体采集法：
产妇施行常规的子宫横切术，将 胎儿取出后，立即用两把止血
钳夹住脐带，将其与胎儿分离，然后用碘酒和
70%
酒精 消毒脐带，做脐静脉穿
刺后，
脐带血通过重力的作用流人含抗凝剂的无菌采集袋，
采集 完将其放入
4
℃
冰箱中保存。

体外采集法：
同样对产妇行 子宫横切术，待胎盘自然或人工剥离后，立即
将其置于采集区，胎盘取出与进行采集之间时间尽可能缩短 ，将胎盘放在一个
中间有孔的可供脐带自然垂下的采集台上，
对脐带进行严格消毒后行脐静脉穿
刺，血液在重力的作用下流人采集袋中，将其放人
4
℃冰箱保存。

脐带血贮存

因为脐血的采集、运输、储存和应用事实上有别于一般血液，国际上通行
的管理法规都将血液和组织细胞分别管理，
而我国目前的法规对脐血干细胞库
只简单归 属血液管理，

严重阻碍了干细胞产业的发展。首先，来源不一样，
脐带血是产妇和新 生儿血循环以外的胎盘和脐带中的血液，
一直是医院产科的
废弃物，采集对产妇和新生儿无任何 风险，然而其采集作为产妇生产过程的一
部分，只能由产科医护人员进行，不可能由其他人员采集；而其 应用主要是其
中的干细胞，不会发生一般血液的公共安全问题。我们所在的手术室其实是脐
带血 采集的主要场所，手术室护士以及产科医生也将是脐带血采集主要人员，
因此对于脐带血的采集问题还是 需要有必要的认识。

1
、
采集足月妊娠的健康产妇脐血，
以肝素抗 凝
（
40u/ml
）
，
脐血采集量
50
～
100ml
，采集后
2h
进行分离纯化处理。

2
、胎儿分娩后立即抽取脐血
,
经抗凝
,2-- 8
℃冰箱保存。


骨髓采集流程

接受干细胞治疗的病人 在术前应加强营养，改善体质。签署知情同意书，
干细胞治疗志愿书，手术同意书，及相关法律文书。对 病人进行生命体征的观
测，有发热和炎症患者需要待炎症控制后再进行移植治疗，女性病人避开月经期。全身衰竭，严重肝肾功能损害的病人不宜进行自体骨髓干细胞移植治疗。
此外，根据移植途径的 不同给病人做好相应的术前处理。

1
：

术前心理疏导，消除患者紧情绪。

重组人粒细胞刺激因子每天注射一支（皮下注射）
，打
1-- 2
天；病人身体状态
好，可不用做动员。

2
：
术前准备普 通骨穿针
2
个，
10ml
注射器
20
个，
在采集骨 髓前将每个注射器
中加入
1ml
肝素（抗凝）
，一次性采血袋或准备一个200ml
以上容量的瓶子，
术前消好毒，上盖橡胶盖或者软木盖，以便插针头，方便采集 的骨髓往瓶中注
入。术前
30min
行常规剂量头孢二代抗菌。

3
：骨髓采集一般为
2
——
4
个点的采集，在两个点不能够采集好的情 况下，采
集最大
4
个点。

4
：将采集好的骨髓或脐带血用医用纱布包裹，送分离。送病人回病房。

5
：将分离好的干细胞用生理盐水稀释成
4-5ml
干细胞悬液备用。

6
：术后进行
48
小时体温监测。

适应症
理论上干细胞能够治疗一切细胞损伤性疾病。
目前已经使用中联达生物有
限公司产品应用技 术成熟、疗效可靠、安全性高的疾病主要有：肝炎肝硬化、
溃疡性结肠炎、糖尿病足、闭塞性脉管炎下肢 坏死、神经损伤性疾病、老年痴
呆症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、帕金森氏病、糖尿病等

禁忌症

一切非细胞损伤性疾病；血液病；肝肾功能严重不足；发烧病人；有严重出血倾向病人；
孕妇或哺乳期女性；
合并大量腹腔、
肺部或其他系统严重感染；< br>心、肺、肾等重要脏器功能不全
/
衰竭不能配合治疗；过敏体质等其他严重情
况 影响治疗等。


科室运作流程

选择病例→术前准备（术前相关检 查、谈话记录、知情同意书，干细胞来
源选择脐带血、骨髓血）→标准收费


①脐带血通知妇产科或厂家

→治疗
前两日
通知细胞分离室

②骨髓血不能在细胞分离室采则通知手
术室（术前一日通知）

→

需介入的通知介入科（术前一日通知）
或再次通知手术室


治疗当 日；
进行
骨髓血、
脐带血采集→送细胞分离室分离→分离时间
3
小时 左右结束→干细胞送治疗室（介入科或手术室治疗）→病人送回病
房。

神经系统病变

适应症

脑外伤、脑外伤后遗症


脑梗塞、脑出血

脊髓损伤性截瘫急性期末（一周）


脑发育不全、脑萎缩

老年性痴呆、智力低下、帕金森病

脑瘫、长期昏迷、植物生存状态

肌萎缩侧索硬化症

运动神经元病


治疗方法

经颈动脉介入干细胞移植

1
、选择符合适应症患者，排除心、肺、肝、肾等脏器重大疾患。

2
、行头部磁共振、血、尿常规，凝血功能，输血四项，乙肝三系，生化全套，胸部
DR
、心< br>电图等，排除手术禁忌。

3
、采用骨髓或脐带血分离纯化
(
负收集混合法
)
收集干细胞，总数需＞
2
×
106/L
。< br>
4
、患者转移至介入室，常规经右腹股沟穿刺放置导管鞘，用
5F
多 功能造影管分别行双侧
颈动脉及椎基底动脉造影，排除脑血管畸形等疾病，并经双侧颈动脉注入充分稀释 后干细
胞悬液
4--5ml
，续推
2ml
生理盐水。

5
、术后配合单唾液酸四己神经节苷脂注射液等营养神经治疗。

6
、采用美国功能独立性评测评分对患者术前、术后
3
个月、
6
个月进行评定。 主要评价
6
个方面的能力：生活自理能力，括约肌控制能力，活动能力，行动能力，理解交流 能力，
社会认识能力。

腰穿注射干细胞移植

1
、

术前心理疏导，消除患者紧情绪。

2
、

患者侧卧，
“抱膝凸腰”打开腰椎间隙。

3
、

选择
L3
－
4
间隙为穿刺点，术野消毒铺巾。

4
、

穿刺成功后引出脑脊液
2-3ml
。

5
、

取干细胞浓度〉
2
×
10
6
/L
的提取液
4ml
缓慢推注至蛛网膜下腔，续推
2ml
生理盐水 。

6
、

留针
3
～
5min
观 查病人，正常后拔针，无菌纱布覆盖穿刺点，术后去枕平卧
6
小时。


立体定向移植


采用立体定向技术定位病变部位，在局麻状态下，颅 骨钻孔，插入穿刺针，应用微量
泵将事先准备的干细胞缓慢注入靶点。


脑室引流管注入


静脉滴注

用生理盐水稀释至
100ml
一小时缓慢静脉滴入



肝病科

适应症：

肝炎后肝硬化失代偿期

酒精性肝硬化失代偿期


原发性胆汁淤积性肝硬化

丙肝后肝硬化失代偿期


不明原因性肝硬化失代偿期

自身免疫性肝病


药物性肝病

急性重型肝炎


慢性重型肝炎

肝炎后肝硬化合并肝癌


重症肝炎合并肝癌


治疗方法

肝固有动脉介入：
在
DSA
下经股动脉穿刺插管
,
置管于肝固有动脉进行造
影
,
观察肝血管情况及有无占位性病变。 将待用的细胞悬液
10-15ml
于
10-15
分钟经肝固有动脉或左右肝动 脉缓慢注入
;
术毕拔管
,
穿刺点加压包扎后返回
病房
,穿刺侧下肢制动
6h
。


分泌科

适应症：

Ⅰ型糖尿病

Ⅱ型糖尿病

糖尿病足


治疗方法

Ⅰ型糖尿病


采用环磷酰胺
+
兔抗胸腺细胞球蛋白方案预处理，
两日将分离好的干细胞< br>稀释至
100ml
静脉回输或在
DSA
引导下经股动脉穿刺插管置管于 胰背动脉将
干细胞悬液
10ml
缓慢注入。

Ⅱ型糖尿病

在
DSA
引导下经股动脉穿刺插管置管于胰背动脉将干细胞悬液
10ml缓慢注
入。

Ⅰ型、Ⅱ型
观察治疗前后胰岛素注射剂量、
HbA 1c
、平胰岛功能、等变化。

糖尿病足

将分离好的干细胞用生理盐水稀释至
60ml
／腿干细胞悬液备用。

消毒、
铺巾，
双下肢贴皮肤保护膜。
将干细胞悬液注射到患者缺血的下肢。
从上向下顺序注射，
每个点注射约
1ml
，
注射深度在
1.5
—
2cm
之间，
相邻的最
大间距离为
1
—
1.5 cm
。注射完毕后，注射点用无菌敷料包扎。



血管外科

闭塞性脉管炎

治疗方法：将分离好的干细胞用生理盐水 稀释至
60ml
／腿干细胞悬液备
用。

消毒、
铺巾，
双下肢贴皮肤保护膜。
将干细胞悬液注射到患者缺血的下肢。