免疫组化与免疫荧光的区别

2021年1月23日发(作者：古耕虞)
免疫组化与免疫荧光

一、两者都是
蛋白定位
的检测（也就是确定蛋 白是表达在细胞核
/
浆
/
膜）
。

二、区别是：

1
、概念和基本原理


免 疫组织化学又称免疫细胞化学，
是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过
抗原抗体反 应和组织化学的呈色反应，
对相应抗原进行定性、
定位、
定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、
组织化学的可见性巧妙地结合起来，
借助显微镜的现像和放大作用 ，
在细胞，
亚细胞水平检测各种抗原物质，
并可在原位显示相应的基因和基因表达产物 。
免疫
组织化学技术现已有：免疫荧光组织（细胞）化学技术、免疫酶组织（细胞）化学技术、 亲
和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。


免疫荧 光组织（细胞）化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检
测待测组织、细胞标本中 的靶抗原（或抗体）
，形成的抗原抗体复合物上带有荧光素，在荧
光显微镜下，
由于受 高压汞灯光源的紫外光照射，
荧光素发出明亮的荧光，
这样就可以分辨
出抗原
（或抗体）的所在位置及其性质，
并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。
以达到对
抗 原物质定位、定性、定量测定的目的。

2
、标本制作：


免疫荧光一般用冰冻切片
，
减少杂质干扰；
而
酶免疫组化一般用石蜡 切片或冰冻切片均
可以
。

3
、实验步骤：
免疫荧光染色步 骤简单，而酶免疫组化方法较为复杂
，多了
DAB
显色过程。

4< br>、染色后的标本保存：免疫荧光染色后的标本一般短时间拍照，时间长了荧光衰退；而酶
免疫组化 染色标本可以长期保存。

5
、免疫组化结果除了知道蛋白是在细胞浆还是细胞膜表达 高些，还可以用软件做相对定量
分析。

6
、
免疫荧光得到的图片是彩色的，漂亮些，可以发高档次文章
。


免疫学三大工具：
免疫组化、
Western
、
ELIS A
，分别用于定位，定
性和定量。