除菌产品除菌效果检测与评价方法

2021年1月23日发(作者：苗海南)


除菌产品除菌效果检测与评价方法

1
．
原理



皮肤菌群可分为常驻菌群与暂驻菌 群两大类，
前者由长期寄生在皮肤上的细菌构
成，
后者则是因接触环境而污染的各种细 菌，
包括革兰阳性菌和革兰阴性菌，
可引起胃肠道
疾病和皮肤感染。


该方法是通过模拟的方法将实验菌污染于受试者手上，
使用试验样品按标准化的方法 洗手，
然后观察其对暂驻菌群的消除情况，以确定产品的功效。

2
．实验器材

（
1
）

实验样品：除菌洗手液
25
份

（
2
）

实验菌株：粘质沙雷氏菌（
A
TCC 14756
）

（
3
）

培养基：胰蛋白酶大豆肉汤培养基

（
4
）

胰蛋白酶大豆琼脂培养基

（
5
）

洗脱液：
0.4g KH2PO4
、
10.1gNa2HPO4
、
1.0g Triton X-100
和中和剂（经鉴定合格）溶解于
1L
蒸馏水中
,
用0.1mol/LHCL
或
0.1mol/LNaOH
调整
pH
至
7.8
。

（
6
）

稀释液：
1.0ml
吐温
80
、
0.4g KH2PO4
、
10.1gNa2HPO4
溶解于

1L
蒸 馏水中
,
调整
pH
至
7.2
。

（
7
）

振荡培养箱

温度范围
25
±
2
℃

（
8
）

自来水热水器


将自来水温度加热至
40
±
2
℃，用于洗手。

（
9
）培养箱

温度范围
25
±
2
℃

（
10
）菌落计数器

（
11
）塑料袋（
25
×
35cm
）

（
12
）
70%
异丙醇或
75%
的乙醇

3
．实验方法

（
1
）调整阶段

试验前
7
至
14
天，受试者使用不含抗抑菌成分的香皂、洗发液和沐浴露进行日常的 洗手、
洗澡。此阶段至少持续
7
天。

（
2
）试验阶段

a.
粘质沙雷氏菌的制备

将平皿或斜面培基上的单个菌落转种至
10
ml
胰蛋白酶大豆肉汤（
TSB
）中，在
25
±
2
°
C
条件下，培养24
±
4
小时。增菌成为粘质沙雷氏菌培养物。将该肉汤培养物再连续传两代，< br>取
0.1
ml
肉汤培养物转种入含
100
ml
TBS
的
500ml
三角烧瓶内，于
25
±
2
°< br>C
条件下，以
100
转
/
分钟的速度振荡培养
24< br>±
4
小时。使用时将细菌悬液浓度调整至
1
×
108
至
1
×
109cfu/ml
，使用时间不得超过
8
小时。< br>
b.
对照组实验方法

用
40
±
2
℃温水将受试者双手打湿
5
秒钟，注入
1.8
至
2.0 ml < br>无抗菌成分的沐浴液在双手中，搓双手及腕部
30
秒钟，用温水从指尖到肘部冲洗
30
秒钟。
（此时不要让手碰到水槽和其他物品，以免双手再被水槽等表面污染）
， 用纸巾将受试者双
手轻轻拍干，用
70%
异丙醇淋手心、手背
10
秒 钟，双手对搓
15
秒钟，

然后温水冲洗
15
秒钟，用纸巾擦干双手。

人工污染方法


将总量为
4.5 ml
的粘质沙雷氏菌悬液分三次涂布于双手，
每次
1.5 ml
，
将 液
体涂遍双手至腕部，避开指甲床处，每次涂布时间为
20
秒钟。涂布菌液的手不得与 身体接
触，第一次和第二次涂菌后自然干燥
30
秒钟，第三次涂布后自然干燥
90
秒钟。