精液稀释：不同方法的比较

2021年1月22日发(作者：狄宇清)

精液稀释：不同方法的比较

作者：
W.E. Morgan Morrow
，北卡罗莱纳大学

－

在所有种公猪管理当中，良好 的精液处理措施都
是非常重要的一环。
“预稀释”则是最近逐渐受到重视的一项措施，
就是在精液稀释的过程中先加少
量稀释剂，然后再加入全部稀释剂。


e>

Dr Morgan Morrow
猪兽医专家

编注

在最近加拿大多伦多举行的美国猪兽医年会上，
Deborah Murray
和明尼苏达大
学的三个同事
Darwin Reicks
博士、
Chris Kuster
博士和
Bob Morris on
博士对
经过预稀释的精液和未经预稀释的精液进行了对比。以下是他们的研究报告。

介绍

种公猪精液预稀释的目的主要是为了减轻精子的冷休克。
影响精子 功能的因素包
1
括采精温度、存储温度和悬浮媒介
。精液温度如果突然从体温降至15 ℃以下，
就会出现冷休克，精子活力会降低
2
，可另一方面精液采集之后又必须尽快稀 释。
另外，预稀释情况下先加入少量（
100ml
）稀释液，然后再加入全部稀释液， 让
渗透压有一个逐渐变化的过程。
预稀释会让新鲜精液迅速获得抗生素的保护。
一般公猪精液当中都含有细菌，浓度最高可达到
109
3
cfu/ml
。< br>

然而，
预稀释需要花费更多的时间。
与预稀释相比，
一次 性全部稀释可节省时间，
而且只需操作一次，
错误操作的风险较低。
本研究的目的就是 要搞清楚，
在授精
效果方面，预稀释处理的精液与未经预稀释的精液之间是否存在显著的差异。

材料与方法

试验精液采自
69
头相同环境下饲养的不同 日龄的杂交终端公猪。
用徒手带橡胶手
套进行采精，精液采入
3.8
升的塑料 采集袋中，采集袋置于预热过的杯子里，袋
内装有纱布过滤器。对精液进行称重，根据重量来估计一次射 精的精子数。


对盛放精液的塑料袋进行按摩（为了使样品均匀一致）
，用 吸管吸取一滴精液到
预热过的载玻片上，
置于相衬显微镜下检查精子的活力。
根据精子 活力将精液评
定为合格或不合格。如果不合格，就将精液弃置。


用移液管 吸取
100
微升精液，置于
2.4ml
柠檬酸钠溶液中，混合均匀，然后用多
通道显微红外快速成像系统（
IMV Microreader
）来检查精子浓度。对 样品中形
态异常的精子进行计数
（数
25
格）
，
根据异常精 子的比例对精子浓度进行了校正。
校正过程不考虑附着原生质滴的精子比例。
根据校正过的精子 浓度，
决定该次射
精的精液可分成多少份授精剂数，
以及总稀释容积应为多少。
然后对公猪号、
采
精人员、采精总容积、每毫升精子数（百万）
、尾部卷曲精子的比 例（％）
、附着
原生质滴的精子比例（％）
、死亡精子比例（％）等情况进行记录。< br>

精液置于恒温装置中，维持在37℃。采精
2
分钟后，将精液取出 恒温装置，等分
为两份。一份加入
100ml
稀释液，标为
E
；另一 份不加任何稀释液，标为
O
（表

1
）
。之后将两份精液重 新放回恒温装置。采精
6
分钟后，按计算好的稀释容积将
两份精液完全稀释。
分别从两份精液中各取一滴滴于载玻片上，
置显微镜下检查
精子活力。精子活力大于
7 0
％的为合格，小于
70
％的为不合格。如果
E
、
O
当中
任何一份不合格，就将两份精液全部弃置。然后将
2
到
5
份完 全稀释的精液按
E
组和
O
组混合，
再检查精子活力。
然后用
Cryovet
自动包装机将混合后的精液包
装好，
贴上标签。
经过 预稀释的精液贴上红色标签，
未经预稀释的精液贴上蓝色
标签。包装好的精液在室温下冷却30
至
45
分钟，然后转入16℃的环境中。

表

1:
稀释剂分组和稀释时间

E
组

1: 2
分钟时用
100ml
稀释剂预稀释

O
组

2: 6-8
分钟时加入其余的稀释剂

6-8
分钟时加入全部稀释剂

精液完全冷却之后，
就可以拿到母猪 场去授精了。
从每份混合精液里流出一份样
品，分别于
24
、
48< br>、
72
、
96
和
120
小时对样品进行测评。如果上 述任何时间发现
某份混合精液的品质不合格，就通知母猪场，将该份精液弃置。

< br>精液被派发到
5
家母猪场（共计
1,700
头母猪）
，每家猪 场接到的
O
组和
E
组精液
剂数相同。
各家猪场按自己的操作 规程进行精液处理、
发情检查，
并对母猪进行
人工授精。
试验过程中各家猪场 仅采用试验精液，
直到试验精液用完为止。
所有
精液都在采集后
5
天 之内用完。各猪场用相同剂数的
O
组和
E
组精液进行授精，
双号的母 猪用
E
组精液授精，单号母猪用
O
组精液授精。本试验中一共用了
9 8
份混合精液。

统计分析

研究开始之前，我们做了统计鉴定力分 析，要想鉴定出分娩率上
5
％的区别，每
个处理需要大约
985
头母 猪；要想鉴定出窝产仔数上
0.5
头
/
窝的区别，每个处理
需要大约
645
窝（鉴定力＝
0.80
，置信概率＝
0.05
）。试验抽样为母猪。自变量为