试管乙肝携带者微生物实验室生物安全操作规程

2021年1月22日发(作者：试管刚着床孕酮很低)
微生物实验室生物安全操作规程

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一、目的

制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境
造成污染。

二、适用范围


适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。

三、职责


实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。

四、安全操作规程：

1.
员工安全操作规程

1.1 < br>实验室入口处须贴上生物危险标志，
注明危险因子、
生物安全级别、
负责人姓名 和
电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。

1.2
禁止非工作 人员进入实验室。
参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可
进入，做好卫生防护，并 在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。

1.3
进行感染 性实验时，
禁止他人进入实验室，
或必须经实验室负责人同意后方可进入。
免疫耐受或 正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。

1.4
接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。

1.5
禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。

1.6
尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。

1.7
实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。

1.8
每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用
75%
乙醇或巴氏消毒液消
毒 。

1.9
工作人员应接受必要的免疫接种和检测
(
如乙型肝炎疫 苗、
卡介苗等
)
。
工作人员要
接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。
每年要接受一次最
新的培训。
人员暴露于感 染性物质时，
及时向实验室负责人汇报，
并记录事故经过和处理方
案。

1.10
禁止将无关动物带入实验室。

2.
无菌室安全操作规程

2.1
无菌培养室每天都要用
0 .2%
的新洁尔灭拖洗地面一次
(
拖布专用
)
，
紫外线照射 消毒
30min
以上，超净工作台台面每次实验前要用
75
％酒精擦洗。然后 紫外线消毒
30min
。操作
用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用
7 5%
酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

2.2
无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。


2.3
无菌室应备有工作浓度的消毒液，
如
5
％的甲酚溶液，
7 5
％的酒精，
0.1
％的新洁尔
灭溶液，等等。

2.4
无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。


2.5
需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜 的方
法灭菌。

2.6
工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒 ，然后在缓冲间更换专用工
作服，鞋，帽子，口罩和手套
(
或用
75%
乙醇等消毒剂再次擦拭双手
)
，方可进入无菌室进
行操作。

2.7
无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌
30
分钟，并且同时打开超净 台进
行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌
30
分钟。

2.8
供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用
75< br>％的酒
精棉球消毒外表面。

2.9
每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。

2.10
吸取菌液时，必须用移液器吸取，切勿直接用口接触吸管。

2.11
接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。

2.12
带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有
5%
来苏尔溶液 或巴氏消毒液
的消毒桶内消毒，
24
小时后取出冲洗。

2.13< br>如有菌液洒在桌上或地上，应立即用
5%
石碳酸溶液或
3
％的来苏尔倾 覆在被污染
处至少
30
分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高 压蒸汽灭菌后洗
涤。

2.14
凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。

2.15
无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下，取内径
90mm的无菌营
养琼脂平板
5
个，分别放置无菌室四周及中央位置，开盖暴露
3 0
分钟后，倒置于
36
℃培养
箱培养
48
小时，取出检查。
100
级洁净区平板杂菌数平均不得超过
1
个菌落
/
平皿，
10000
级洁净室平均不得超过
3
个菌落
/
平皿。如超过 限度，应用臭氧发生器等对无菌室进行彻底
消毒，直至重复检查合乎要求为止。

3.
压力蒸汽灭菌器的安全使用操作程序：

3.1
堆放：将需灭菌 的物品予以妥善包扎，各包之间留有空隙，依次堆放在灭菌桶的筛
板上，
以蒸汽穿透，
提高灭菌效果。
需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否
达到要求。

3.2
加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管
2
厘米以上（ 不宜过多）
；
连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。
3.3
密封：
在每次使用高压锅前，
都必须认真检查高压锅的出气伐 和安全阀，
确保其状
态完好，
如有故障，
在故障排除之前不得使用高压灭菌锅 。
把堆放好物品的灭菌桶放在锅体
内，盖上锅盖并锁紧。

3.4
加热灭菌：
将灭菌器接通与铭牌一致的电源，
按下电源开关，
接通电源，
指示 灯亮，
表示电源已正常输入本器，
按下开始按纽电热管开始加热工作；
灭菌期间工作人 员需监视高
压锅指示面板上的压力、温度和时间等。

3.5
开盖：
灭菌结束后，
切勿立即将灭菌锅内的蒸汽排出，否则：
由于液体物品的温度
未能下降 ，
而压力蒸汽突然释放，会使液体剧烈沸腾，造成溢出或容器爆裂。应待压力表指
针归零位后， 方可开启锅盖。

4.
生物安全柜操作规程

4.1
确认玻 璃窗处于关闭位置后，打开紫外灯，对安全柜内工作空间进行灭菌。灭菌结
束后，关闭紫外灯。安全柜使 用前后均需灭菌。

4.2
抬起玻璃门至正常工作位置。打开外排风机。打开荧光灯及 内置风机。检查回风格
栅，使之不要被物品堵塞。在无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作
10
分钟。

4.3
用消毒液彻底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡胶手套并套在 袖口上，如有必要的
话，戴防护眼镜和防护面罩。

4.4
按实验程序放入实验材料，要将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置。

尽量将所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要过载，不要挡住前后风口。
放入.
4.5
尽量避免使用可干扰安全柜内气流流动的装置和程序。在操作期间，避免随便移 动
材料，避免操作者的手臂在前方开口处频繁移动，尽量减少气流干扰。