试管打几天促排针实验一 实验室环境和人体表面的微生物检查

2021年1月22日发(作者：试管血值大于1千正常吗)


实验
1


实验室环境和人体表面的微生物检查

一、实验目的

1
、证实实验室环境和人体表面存在微生物。

2
、

观察不同类群微生物的菌落形态特征。

3
、

比较不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。

4
、体会无菌操作的重要性。

二、基本原理



通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，
经过生长繁殖形成几百万个
聚集在一起的肉眼可见的菌落。
平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，
当取自不同来源的样品接种于培养基上，在
37
℃温度下培养，
1
—
2
天内每一菌体即能通过很多次细胞分
裂而进行繁殖，
形成一个可见的细胞群体的集落，
称为菌落。
每一种细菌所形成的菌落都有
它自己的特点。因此，可通过平板培养来检查环境中 细菌的数量和类型。

三、实验器材

1
、培养基

牛肉膏蛋白胨培养基

2
、溶液和试剂

无菌水

3
、仪器和其他用品

平板，试管，灭菌棉签（装在试管内）
，试管 架，漏斗，止水夹，煤气灯或酒精灯，记号笔，
接种环，标签纸，废液缸等。

四、实验操作

1
、牛肉膏蛋白胨培养基的制备：

（1
）称量：准确称取牛肉膏
1.8
克、蛋白胨
6.0
克、
Nacl3.0
克放入烧杯中。

（
2
）熔化：在上述烧杯中加入 少于所需的水量（所需水量为
600ml
）
，用玻璃棒搅匀，补充
水到所需的 总体积
600ml
。

（
3
）调
pH
：用
1mol/L NaOH
和
1mol/L HCl
进行调节，直至溶液
pH
达到
7.0~7.2
。
< br>（
4
）分装：将其中
300ml
溶液装入
500ml
三角瓶中，向三角瓶中加入
6.0
克琼脂，向烧杯
剩余液体中加入
6.0克琼脂，在石棉网上加热烧杯，使琼脂溶解，将烧杯中溶液分装到
10
支试管中，每支试管 中加入体积为试管总体积的
1
/
5
左右。

（
5
）加塞：在三角瓶口上塞上棉塞，防止外界微生物进入造成污染。
（
6
）包扎：加塞后，在棉塞外包一层牛皮纸，将全部试管用麻绳捆好（还有一支装有无菌
水的试管）
，同样的方法把三角瓶包好，扎好。用记号笔注明培养及名称、组别、配制日期。< br>
（
7
）灭菌：将上述培养基以
0.1MPa
，
12 1
℃，
90min
高压蒸汽灭菌。

（
8
）搁置斜 面：将灭菌的试管培养基冷却至
50
℃左右，将

试管口端搁在玻璃棒或其他 合
适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管的总长的一般为宜。





2
、倒平板：

点燃酒精灯，右手握住三角瓶底部，< br>用左手小指将棉塞夹住，
拔出，随之将瓶口边缘在火焰
上过一下，
杀死粘在瓶口 外的杂菌。
左手拿起一套平皿，
用无名指和小指托住平皿底部，用
中指和大拇指夹住皿 盖并开启一缝，恰好能让三角瓶伸入，随后倒出培养基。倒入
15~20ml
培养基，铺满整个 皿底。盖上皿盖，置水平位置待凝。重复上述操作，共倒平皿
18
个。

3
、微生物采集：

（
1
）空气

将6
个平板在实验室环境中移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中。
5min
后 ，将其中
三个盖上皿盖，分别贴上标签，注明日期、组别、样品来源、暴露时间和编号，
10m in
后，
将剩余三个盖上皿盖，分别贴上标签，注明日期、组别、样品来源、暴露时间和编号。

（
2
）桌面

用无菌水湿润棉签，用棉签在实验台面擦拭 约
2cm
2
的范围，在火焰旁用左手拇指和中指将
平皿开启成一缝，将棉签伸 入，在琼脂表面接种，之后立即闭合皿盖。共做三套相同平皿，
分别贴上标签，注明日期、组别、样品来 源和编号。

（
3
）洗手前

用无菌水湿润棉签，用棉签在 手表面擦拭，在火焰旁用左手拇指和中指将平皿开启成一缝，
将棉签伸入，在琼脂表面接种，之后立即闭 合皿盖。共做三套相同平皿，分别贴上标签，注
明日期、组别、样品来源和编号。

（
4
）洗手后

用肥皂和刷子用力刷手，
在水流中冲洗干净 ，
干燥后用无菌水湿润棉签，
用棉签在手表面擦
拭，在火焰旁用左手拇指和中指将平皿 开启成一缝，将棉签伸入，
在琼脂表面接种，之后立
即闭合皿盖。共做三套相同平皿，分别贴上 标签，注明日期、组别、样品来源和编号。

（
5
）硬币

用无菌水湿润棉签，用棉签擦拭硬币表面，在火焰旁用左手拇指和中指将平皿开启成一缝，
将棉签伸入， 在琼脂表面接种，之后立即闭合皿盖。共做三套相同平皿，分别贴上标签，注
明日期、组别、样品来源和 编号。

4
、

微生物培养：

将每一组
（
3
个）
中编号为
1
的平板放在
28
℃环境培养箱 中培养，
将编号为
2
和
3
的平板放
在
37
℃的环境培养箱中培养，时间为一周。

5
、

菌落特征描述方法：

(a)

大小：大、中、小、针尖状。可先将 整个平板上的菌落粗略观察一下，再决定大、中、
小的标准，或由教师指出一个大小范围。

(b)

颜色：黄色、金黄色、白色、乳白色、灰色、红色、粉红色等。

(c)

干湿：干燥、湿润、粘稠。

(d)

形态
:
圆形、不规则等。

(e)

边缘：整齐、不整齐等。

(f)

表面：高度扁平、隆起、凹下。

五、实验报告





1
、结果

（
1
）菌落描述


样品①、③









样品②、④












样品⑤














样品⑥

样品来源

①

1-4-
空
10
-3-37
℃

②

1-4-
空
5
-2-37
℃

③

1-4-
空
10
-3-37
℃

④

1-4-
空
5
-2-37
℃

⑤

1-4-
手后
-3-37
℃

⑥

1-4-
手前
-3-37
℃

（
2
）比较

菌落描述

大、白、干、圆、整齐、扁平

小、黄、干、圆、整齐、扁平

中、淡黄、湿、圆、整齐、隆起

大、乳白、湿、不规则、锯齿、扁平

小、白、湿、圆、整齐、外凸内凹

小、乳白、湿、不规则、锯齿、隆起

菌落数

3
4
1
1
1
1
记录人

李龙

商倩倩

泮力菁

汤艳楠

泮力菁

吴彤


1-4-
空
10
-37
℃











1-4-
空
5
-37
℃








1-4-
洗手前—
28
℃



1-4-
洗手后—
28
℃

样品来源

1-4-
空
10
-37
℃

1-4-
空
5
-37
℃

1-4-
洗手前—
28
℃

1-4-
洗手后—
28
℃

（
3
）相似菌

菌落数量（总数）

22
15
12
9
种类（形态不一致）

6
6
4
6